Seminario 5 Regulación de la expresión génica II - Sebastian Giusti

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https://www.youtube.com/watch?v=xAig66tIoz4

Sintesi

TLDRLa clase aborda la regulación de la expresión génica en niveles postranscripcional, traduccional y posttraduccional, destacando el procesamiento del ARN mensajero, la estabilidad de los ARN y la regulación de las proteínas. Se discuten las modificaciones del ARN como el capping y la poliadenilación, el splicing, y el papel de los microARNs en la reducción de la estabilidad del ARN mensajero. Además, se explora cómo el sistema ubiquitina-proteasoma degrada proteínas no deseadas. Se enfatiza cómo estos mecanismos regulan no solo la cantidad, sino también la calidad y actividad del producto génico final.

Punti di forza

  • 📚 Regla en tres niveles: postranscripcional, traduccional y posttraduccional.
  • 🧬 El capping protege el ARN mensajero de la degradación.
  • 💡 La poliadenilación añade estabilidad al ARN mensajero.
  • 🔄 El splicing alternativo genera isoformas proteicas distintas.
  • 🔍 MicroARNs regulan la estabilidad y traducción de ARN mensajeros.
  • ⚙️ La ubiquitina marca proteínas para su degradación en el proteasoma.
  • 🛡️ Factores de inicio de traducción ensamblan ribosomas en ARN mensajero.
  • ⚠️ El nonsense mediated decay degrada ARN con codones stop prematuros.
  • 🌀 Regulación de calidad mantiene la funcionalidad del producto génico.
  • 🧩 La estabilidad del ARN mensajero varía entre diferentes tipos.

Linea temporale

  • 00:00:00 - 00:05:00

    En esta clase se analiza la regulación de la expresión génica en niveles postranscripcional, traduccional y posttraduccional, contrastando con la clase anterior que se centró en la regulación pretranscripcional. Se revisan los mecanismos que controlan la condensación de la cromatina y la transcripción, destacando el papel de los factores de transcripción y los modificadores epigenéticos.

  • 00:05:00 - 00:10:00

    Se introduce el concepto de procesamiento del ARN mensajero, que incluye la modificación de los extremos 5' y 3', el corte y empalme de exones, y se enfatiza que estos procesos son co-transcripcionales, es decir, ocurren simultáneamente con la transcripción del ARN.

  • 00:10:00 - 00:15:00

    Se explica la modificación del extremo 5' del ARN mensajero, conocido como capping, que protege el ARN de la degradación y facilita su exportación y traducción. Se menciona la importancia del cap binding complex en este proceso.

  • 00:15:00 - 00:20:00

    Se detalla la modificación del extremo 3' del ARN mensajero, que incluye el corte y la adición de una cola de poliadenina, lo que también protege el ARN y facilita su exportación y traducción.

  • 00:20:00 - 00:25:00

    Se aborda el proceso de splicing, que implica la eliminación de intrones y la unión de exones, destacando la importancia de las secuencias consenso del splicing y el papel del espliciosoma en este proceso.

  • 00:25:00 - 00:30:00

    Se discute la naturaleza discontinua de los genes eucariotas, donde los exones son interrumpidos por intrones, y se explica cómo el splicing permite la generación de un ARN mensajero maduro a partir de un transcripto primario.

  • 00:30:00 - 00:35:00

    Se introduce el concepto de splicing alternativo, que permite la producción de diferentes isoformas de proteínas a partir de un mismo gen, dependiendo del tejido y del contexto de desarrollo.

  • 00:35:00 - 00:40:00

    Se analizan los mecanismos que regulan el splicing alternativo, incluyendo la existencia de secuencias fuertes y débiles de splicing, así como la influencia de proteínas reguladoras que pueden bloquear o facilitar el reconocimiento de los sitios de splicing.

  • 00:40:00 - 00:45:00

    Se concluye que el ARN mensajero maduro contiene regiones no traducidas (UTR) que son cruciales para la estabilidad y regulación de la traducción, y se menciona la interacción de proteínas con el ARN mensajero para su correcta exportación y traducción.

  • 00:45:00 - 00:50:00

    Se examinan los mecanismos de control de calidad en la traducción, incluyendo la degradación de ARNs mensajeros con codones de parada prematuros, y se introduce el concepto de nonsense mediated decay como un mecanismo de regulación postranscripcional.

  • 00:50:00 - 00:57:18

    Finalmente, se discuten los mecanismos que regulan la estabilidad y actividad de las proteínas, incluyendo la ubiquitinación y su papel en la degradación de proteínas no funcionales, así como la importancia de las modificaciones postraduccionales en la regulación de la actividad proteica.

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Video Domande e Risposte

  • ¿Qué se estudia en la clase?

    Se estudia la regulación postranscripcional, traduccional y posttraduccional de la expresión génica.

  • ¿Qué es el capping de ARN?

    Es una modificación del extremo 5' del ARN que protege contra la degradación y facilita la exportación del ARN.

  • ¿Qué función tiene la poliadenilación en el ARN mensajero?

    Agrega una cola de adeninas que protege el extremo 3' y ayuda en la exportación y traducción del ARN.

  • ¿Qué es el splicing alternativo?

    Es un proceso que permite a un mismo gen generar diferentes isoformas de proteínas al remover ciertos intrones en distintas condiciones.

  • ¿Cómo afectan los microARNs la estabilidad del ARN mensajero?

    Se unen a regiones específicas del ARN mensajero, reduciendo su estabilidad y bloqueando su traducción.

  • ¿Qué es el sistema ubiquitina-proteasoma?

    Es un mecanismo que marca proteínas para su degradación mediante la adición de ubiquitina.

  • ¿Qué son los factores de inicio de la traducción?

    Son proteínas que facilitan el ensamblaje del ribosoma en el ARN mensajero para comenzar la traducción.

  • ¿Cómo se regula la calidad del ARN mensajero?

    A través de mecanismos como el nonsense mediated decay que degrada ARN mensajeros con codones de parada prematuros.

  • ¿Cuál es la diferencia entre regulación pretranscripcional y postranscripcional?

    La regulación pretranscripcional controla si un gen se expresa y con qué frecuencia, mientras que la postranscripcional regula la estabilidad y actividad del producto genético ya formado.

  • ¿Cómo se mide la estabilidad del ARN mensajero?

    La estabilidad se mide en términos de vida media, que puede variar entre diferentes tipos de ARN mensajeros.

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    En la clase de hoy vamos a analizar la
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    segunda parte de la unidad conceptual
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    que trata sobre la regulación de la
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    expresión génica. Y en esta clase nos
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    focalizaremos en los niveles
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    postranscripcional, traduccional y
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    posttraduccional. Para comprender mejor
  • 00:00:20
    cuál es el foco de la clase y qué es lo
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    que suma esta clase número cinco a la
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    clase
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    anterior, hagamos una breve
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    recapitulación de lo que hemos visto
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    respecto de la regulación de la
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    expresión génica. En la clase anterior
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    nos focalizamos en aquellos pasos
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    iniciales de la expresión
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    génica. En particular vimos como el
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    grado de condensación de la cromatina
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    regula la accesibilidad de la maquinaria
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    transcripcional y a esta a los
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    mecanismos que controlan el grado de
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    condensación de la cromatina. Los
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    denominamos en su conjunto regulaciones
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    pretranscripcionales y también vimos los
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    mecanismos que regulan el inicio y la
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    frecuencia de la transcripción
  • 00:01:13
    misma. Estos
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    mecanismos eh los explicamos en términos
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    moleculares mediante un conjunto de
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    elementos entre los cuales se destacan
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    el rol de los factores específicos de la
  • 00:01:27
    transcripción.
  • 00:01:29
    Estas proteínas que tienen la capacidad
  • 00:01:31
    de unirse al ADN en conjunto con otras
  • 00:01:35
    proteínas que se unen a ellos
  • 00:01:37
    denominados
  • 00:01:39
    correguladores, pueden reclutar a sitios
  • 00:01:41
    específicos del genoma a modificadores
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    epigenéticos, por ejemplo, complejos
  • 00:01:47
    modificadores de histonas que las pueden
  • 00:01:50
    acetilar, desacetilar, metilar o
  • 00:01:53
    desmetilar y complejos remodeladores de
  • 00:01:55
    la cromatina que pueden movilizar
  • 00:01:57
    algunos núcleos
  • 00:01:59
    exponiendo segmentos específicos del
  • 00:02:01
    ADN.
  • 00:02:03
    Dependiendo de si el sitio a donde se
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    unieron estos factores específicos de la
  • 00:02:07
    transcripción, sean potenciadores o
  • 00:02:10
    enhancers por un lado o silenciadores
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    por otro, tendrán un efecto positivo o
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    negativo sobre la formación del complejo
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    del inicio de la transcripción y
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    aumentarán o disminuirán respectivamente
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    la
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    frecuencia de inicio de la
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    transcripción. Recordemos que la RN
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    polimerasa
  • 00:02:32
    2 no solo necesita reconocer
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    molecularmente el promotor
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    teniendo la zona de la cromatina laxa en
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    el sitio del promotor de un gen
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    determinado, sino que necesita de
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    señales moleculares adicionales para
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    pasar de ese estado inactivo, aunque
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    posicionado en el promotor, a un estado
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    activo. En síntesis, estos procesos que
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    analizamos la clase anterior nos
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    permitían pensar en un aspecto
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    particular de la regulación de la
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    expresión
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    génica, aquel en donde lo que se está
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    regulando es el nivel, es decir, la
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    cantidad de un producto
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    génico. El resultado de esos procesos
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    era si un gen se iba a expresar o no y
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    cuál era
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    la frecuencia con la que ese gen iba a
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    transcribirse, impactando en la cantidad
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    del producto
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    génico. A diferencia de eso, vamos a
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    complejizar algunas cuestiones en el
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    seminario de hoy. En primer lugar, vamos
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    a analizar algunos puntos diferentes de
  • 00:03:43
    la regulación de la expresión génica
  • 00:03:45
    posteriores a la producción.
  • 00:03:48
    Eh, al inicio de la
  • 00:03:50
    transcripción, por ejemplo, vamos a
  • 00:03:53
    analizar los mecanismos de procesamiento
  • 00:03:56
    de la RN y su exportación al citosol.
  • 00:03:59
    Vamos a estudiar con cierto detalle los
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    mecanismos que regulan la
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    estabilidad del RN y finalmente vamos a
  • 00:04:07
    estudiar mecanismos que regulan la
  • 00:04:09
    estabilidad y la actividad de las
  • 00:04:12
    proteínas. Esta clase va a estar
  • 00:04:15
    focalizada
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    en aquellos genes que codifican para
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    proteínas. Es decir, que los ARN cuyo
  • 00:04:23
    procesamiento y regulación vamos a
  • 00:04:25
    analizar son fundamentalmente ARNs
  • 00:04:29
    mensajeros.
  • 00:04:34
    Me gustaría subrayar, ya que vamos a
  • 00:04:37
    analizar con bastante detalle algunos
  • 00:04:41
    mecanismos centrados en las moléculas de
  • 00:04:43
    ARN, algunas propiedades biológicas de
  • 00:04:47
    estas moléculas que las distinguen de
  • 00:04:49
    otras biomoléculas de las células como
  • 00:04:50
    las proteínas y el ADN.
  • 00:04:54
    En primer lugar, a diferencia de la
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    molécula de de las moléculas de ADN, que
  • 00:04:59
    son muy estables, las moléculas de ARN
  • 00:05:02
    son lábiles. Esto significa que se
  • 00:05:05
    degradan con
  • 00:05:06
    facilidad, tanto dentro de la célula
  • 00:05:09
    como por fuera cuando se hace un
  • 00:05:11
    procedimiento experimental de extracción
  • 00:05:13
    de ARN de las células.
  • 00:05:16
    Por fuera de las células, las moléculas
  • 00:05:18
    de ARN son muy sensibles, se degradan
  • 00:05:21
    con facilidad ante cambios en el pH y la
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    temperatura, por ejemplo. Y dentro del
  • 00:05:26
    interior de las
  • 00:05:28
    células son sustrato de un conjunto
  • 00:05:32
    amplio de enzimas dentro de las células
  • 00:05:35
    que se
  • 00:05:36
    denominan eh nucleasas de ARN. Estas
  • 00:05:40
    nucleas pueden ser exonucleas, es decir,
  • 00:05:44
    pueden degradar a las moléculas de RN a
  • 00:05:47
    partir de sus extremos. Hm.
  • 00:05:50
    despolimerizando los ribonucleótidos que
  • 00:05:53
    las
  • 00:05:54
    constituyen. Y estas son las enzimas más
  • 00:05:57
    abundantes, pero también hay algunas
  • 00:05:59
    endonucleas, es decir, enzimas que
  • 00:06:01
    pueden romper los enlaces entre los
  • 00:06:06
    nucleótidos, los enlaces fosfodiéster
  • 00:06:08
    entre los
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    nucleótidos, aún por fuera de los
  • 00:06:11
    extremos de las moléculas.
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    Otra propiedad de las moléculas de ARN
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    es que si bien en los libros de texto
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    tendemos a
  • 00:06:23
    eh tienden a ser representadas de manera
  • 00:06:26
    lineal
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    huciones acuosas y dentro de las
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    células, las moléculas de RN adoptan
  • 00:06:35
    conformaciones tridimensionales
  • 00:06:37
    complejas. Y esta aquí vemos en esta
  • 00:06:40
    diapositiva un ejemplo de un ARN lineal.
  • 00:06:44
    pero que ha adoptado esta configuración
  • 00:06:46
    tridimensional compleja, formando, por
  • 00:06:49
    ejemplo, enlaces
  • 00:06:52
    complementarios hm en intracatenarios,
  • 00:06:56
    en aquellos sectores en donde se forman
  • 00:06:58
    esos enlaces intracatenarios. Hm. Por
  • 00:07:01
    ejemplo, las adeninas eh de una molécula
  • 00:07:05
    de ARN lineal pueden formar enlaces
  • 00:07:08
    complementarios con uracilos presentes
  • 00:07:11
    en otra parte de la molécula y así
  • 00:07:14
    sucesivamente. Y aquellos tractos en
  • 00:07:17
    donde se forman estas enlaces
  • 00:07:19
    complementarios tienden a adoptar una
  • 00:07:21
    forma
  • 00:07:22
    hiloidal. Esta propiedad de adoptar una
  • 00:07:25
    forma tridimensional compleja nos
  • 00:07:28
    permite comprender cómo dentro de la
  • 00:07:30
    célula se produce un reconocimiento
  • 00:07:32
    específico entre las moléculas de ARN y
  • 00:07:36
    las de otras proteínas. Hm. Recordemos,
  • 00:07:39
    por ejemplo, que el reconocimiento
  • 00:07:40
    molecular proteína a proteína se basa en
  • 00:07:43
    la complementariedad de formas
  • 00:07:46
    tridimensionales. Hm. Un ejemplo es la
  • 00:07:49
    complementaridad que existe entre muchas
  • 00:07:51
    enzimas y su sustrato. Algo análogo,
  • 00:07:54
    esta complementaridad tridimensional
  • 00:07:56
    también se da entre proteínas que tienen
  • 00:07:58
    la capacidad de unirse a determinados
  • 00:08:01
    ARNs y la forma tridimensional
  • 00:08:03
    particular de estos.
  • 00:08:06
    Pero no solo las moléculas de ARN tienen
  • 00:08:09
    la capacidad de unirse a proteínas
  • 00:08:12
    específicas gracias a esta forma
  • 00:08:14
    tridimensional que poseen, sino que
  • 00:08:18
    también pueden unirse a otros ARNs o a
  • 00:08:23
    moléculas de ADN mediante
  • 00:08:25
    complementariedad de bases. Es decir,
  • 00:08:28
    dos principios físicoquímicos distintos
  • 00:08:31
    permiten a las moléculas de RN reconocer
  • 00:08:35
    molecularmente, por un lado, las
  • 00:08:37
    proteínas y, por otro lado, a otros
  • 00:08:40
    ácidos
  • 00:08:41
    nucleicos. Analicemos en primer lugar el
  • 00:08:44
    procesamiento del ARN mensajero
  • 00:08:47
    eucariota.
  • 00:08:48
    Se denomina procesamiento o maduración
  • 00:08:51
    de la RN al conjunto de modificaciones
  • 00:08:53
    que sufre el transcripto primario, el
  • 00:08:56
    producto de la transcripción de la RN
  • 00:08:58
    polimerasa 2, hasta convertirse en el
  • 00:09:00
    transcripto maduro, que es el ARN
  • 00:09:03
    mensajero, listo para ser exportado al
  • 00:09:05
    citosol.
  • 00:09:07
    Este procesamiento consta de tres pasos
  • 00:09:11
    moleculares. La modificación del extremo
  • 00:09:14
    5 prima de la RN. El extremo CCO prima
  • 00:09:18
    es está ubicado en el primer nucleótido
  • 00:09:22
    que introduce la RN polimerasa en el
  • 00:09:26
    transcripto en producción.
  • 00:09:31
    Luego el corte y empalme de exones, un
  • 00:09:34
    proceso conocido por su nombre en inglés
  • 00:09:36
    splicing y el y la modificación
  • 00:09:39
    covalente del extremo 3 prima, que es el
  • 00:09:43
    extremo final del ARN.
  • 00:09:48
    A pesar de mencionarlos de manera
  • 00:09:51
    secuencial, estos tres pasos moleculares
  • 00:09:54
    del procesamiento de la RN eucariota no
  • 00:09:57
    son posteriores a la producción del
  • 00:10:00
    transcripto primario, sino que los
  • 00:10:04
    hallazgos durante la década de los 80 y
  • 00:10:08
    de los 90 en el ámbito de la
  • 00:10:10
    investigación permitieron determinar que
  • 00:10:13
    todos estos pasos moleculares de
  • 00:10:14
    procesamiento sonranscripcional.
  • 00:10:17
    ionales ocurren al mismo tiempo que la
  • 00:10:19
    RN polimerasa 2 está transcribiendo
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    activamente el transcripto primario. En
  • 00:10:26
    este esquema podemos observar el
  • 00:10:29
    resultado de manera esquemática, el
  • 00:10:32
    resultado de muchos años de
  • 00:10:34
    investigación en donde pudo
  • 00:10:35
    determinarse, por ejemplo, que las
  • 00:10:37
    enzimas y proteínas que catalizan cada
  • 00:10:40
    uno de estos pasos del procesamiento se
  • 00:10:44
    encuentran asociadas efectivamente a
  • 00:10:48
    sectores de la RN polimerasa, por
  • 00:10:50
    ejemplo, las enzimas. Aquí podemos ver a
  • 00:10:53
    las enzimas que van a realizar el
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    proceso de capping y a las enzimas que
  • 00:10:58
    van a ser eh el procesamiento de
  • 00:11:03
    splicing y a las que van a modificar al
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    extremo tres prima asociadas al dominio
  • 00:11:08
    carboxiterminal fosforilado, que era
  • 00:11:10
    característico de una RN polimerasa en
  • 00:11:14
    activa transcripción.
  • 00:11:17
    Comencemos entonces con el primero de
  • 00:11:19
    estos procesos, la modificación del
  • 00:11:21
    extremo 5 prima que se denomina capping
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    en inglés o agregado de la caperusa en
  • 00:11:27
    español. Es una modificación covalente
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    de uno de los extremos de la
  • 00:11:32
    RN. Observamos en el sector izquierdo de
  • 00:11:35
    la diapositiva la representación
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    molecular en vertical y en celeste de un
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    ARN mensajero. Hm.
  • 00:11:43
    El primer nucleótido, el extremo 5
  • 00:11:48
    prima, resultará ser modificado por el
  • 00:11:50
    agregado, por la unión covalente de un
  • 00:11:52
    nucleótido modificado, pero que a
  • 00:11:54
    diferencia del resto de los nucleótidos
  • 00:11:56
    que se unen en un sentido 5 prima, tres
  • 00:11:59
    prima, es decir, con una vinculación
  • 00:12:03
    entre carbonos particulares de los
  • 00:12:06
    azúcares de los ribos nucleótidos.
  • 00:12:10
    En el caso del CAP, la unión es 5 prima
  • 00:12:14
    a CCO prima. Hm. Y otra alteración
  • 00:12:18
    respecto de los nucleótidos usuales es
  • 00:12:20
    que este nucleótido, que es una
  • 00:12:21
    guancina, se encuentra metilada en una
  • 00:12:24
    posición particular de su anillo
  • 00:12:26
    nitrogenado. Hm.
  • 00:12:31
    Los
  • 00:12:35
    transcript de siete metil guanoina
  • 00:12:38
    pueden ser reconocidos molecularmente
  • 00:12:40
    por un conjunto de proteínas denominadas
  • 00:12:43
    complejos de unión a la caperusa. CBC
  • 00:12:47
    por sus siglas en inglés, cap binding
  • 00:12:49
    complex.
  • 00:12:51
    Y el efecto que tiene el agregado de
  • 00:12:54
    esta armazón proteico en el extremo
  • 00:12:57
    cinco prima del mensajero es proteger
  • 00:13:00
    ese extremo de la degradación por las
  • 00:13:02
    abundantes exonucleas dentro de la
  • 00:13:05
    célula y también, como veremos en breve,
  • 00:13:09
    permitirá la correcta exportación del
  • 00:13:11
    ARN a través de los poros nucleares y
  • 00:13:15
    posteriormente también participará del
  • 00:13:17
    reconocimiento de la maquinaria de la
  • 00:13:19
    traducción.
  • 00:13:24
    H analicemos la modificación del otro
  • 00:13:27
    extremo del transcripto primario, del
  • 00:13:30
    extremo final.
  • 00:13:33
    H dentro de la secuencia génica que está
  • 00:13:36
    transcribiendo la RN polimerasa, aquí
  • 00:13:39
    podemos ver en celeste el transcripto
  • 00:13:43
    primario que está siendo producido por
  • 00:13:45
    la RN
  • 00:13:47
    polimerasa utilizando como molde las
  • 00:13:50
    secuencias génicas. Dentro de la
  • 00:13:52
    secuencia génica que va a transcribir la
  • 00:13:54
    RN polimerasa, hay una secuencia que
  • 00:13:56
    quedará plasmada en el
  • 00:13:59
    ARN del transcripto, que es A a Aa U a A
  • 00:14:05
    a
  • 00:14:05
    Aa. Esta secuencia de
  • 00:14:10
    ribonucleótidos es una señal de corte y
  • 00:14:14
    poliadenilación que será reconocido por
  • 00:14:16
    enzimas que estaban viajando en el
  • 00:14:18
    dominio CTD fosforilado de la RNA
  • 00:14:21
    polimerasa y van a catalizar un
  • 00:14:25
    corte un clivaje del transcripto
  • 00:14:29
    primario que está siendo producido por
  • 00:14:31
    la RN polimerasa.
  • 00:14:34
    La RN polimerasa seguirá transcribiendo
  • 00:14:37
    algunos eh cientos de nucleótidos más,
  • 00:14:40
    pero ese ARN adicional que genere la
  • 00:14:42
    polimerasa es frecuentemente
  • 00:14:45
    degradado. Ahora bien, luego que se
  • 00:14:48
    produce el corte o clivaje justo por
  • 00:14:50
    debajo de esta secuencia de clivaje y
  • 00:14:54
    poladenilación, otra enzima
  • 00:14:57
    denominada eh
  • 00:14:59
    poliapolimerasa va a adicionar cientos
  • 00:15:03
    de nucleótidos de adenina en este
  • 00:15:05
    extremo final del transcripto. Notemos
  • 00:15:09
    entonces que esta cola de polia, este
  • 00:15:11
    tracto de adeninas, no estaba codificada
  • 00:15:14
    en el genoma, sino que es agregado por
  • 00:15:16
    una enzima que polimeriza en ausencia de
  • 00:15:19
    molde.
  • 00:15:22
    Está tracto de cientos de moléculas de
  • 00:15:25
    adenina es reconocido por un conjunto de
  • 00:15:27
    proteínas denominadas proteínas de unión
  • 00:15:30
    a la poli o polie binding proteins que
  • 00:15:34
    nuevamente protegen ahora el extremo
  • 00:15:37
    tres prima de la acción de
  • 00:15:40
    exonucleas y van a permitir la correcta
  • 00:15:43
    exportación y el reconocimiento de la
  • 00:15:45
    maquinaria transduccional, es decir,
  • 00:15:48
    tanto la modificación del extremo 5
  • 00:15:50
    prima como del extremo 3 prima convergen
  • 00:15:53
    en las funciones que cumplen, aunque los
  • 00:15:55
    mecanismos moleculares que las producen
  • 00:15:58
    sean distintos.
  • 00:16:01
    Analicemos ahora la última de
  • 00:16:04
    las modificaciones eh de procesamiento
  • 00:16:08
    que sufre el transcripto
  • 00:16:11
    primario, el corte y empalme de exones o
  • 00:16:16
    como se lo conoce en inglés splicing del
  • 00:16:19
    RN
  • 00:16:20
    mensajero. Para comprender este último
  • 00:16:22
    tipo de procesamiento, debemos advertir
  • 00:16:27
    que los genes eucariotas son
  • 00:16:31
    discontinuos. Este hallazgo producido en
  • 00:16:33
    la década de los 70 sorprendió a la
  • 00:16:36
    comunidad científica que venía
  • 00:16:38
    trabajando hasta ahora para comprender
  • 00:16:40
    los mecanismos de expresión génica con
  • 00:16:43
    sistemas procariotas en donde los genes
  • 00:16:45
    son continuos. ¿Qué significa
  • 00:16:48
    exactamente que los genes eucariotas
  • 00:16:50
    sean discontinuos?
  • 00:16:53
    Significa que las
  • 00:16:55
    secuencias que están presentes en el
  • 00:17:00
    transcripto maduro, en aquel que va a
  • 00:17:02
    ser exportado el citosol, no se
  • 00:17:04
    encuentran de manera continua y lineal
  • 00:17:07
    en el genoma a partir del cual se
  • 00:17:09
    produce el transcripto primario, sino
  • 00:17:12
    que esas secuencias se encuentran
  • 00:17:14
    fragmentadas y dispersas, interrumpidas,
  • 00:17:17
    si se quiere, por otras
  • 00:17:19
    secuencias de ADN. que no van a estar
  • 00:17:23
    presentes en el transcripto final que va
  • 00:17:26
    a ser exportado al
  • 00:17:27
    citosol. Por convención, aquellas
  • 00:17:30
    secuencias del ADN que finalmente
  • 00:17:33
    estarán representadas en el transcripto
  • 00:17:35
    maduro se las denomina exones. Y a las
  • 00:17:39
    secuencias entre los exones que serán
  • 00:17:42
    removidas durante el procesamiento y por
  • 00:17:45
    ende estarán presentes en el transcripto
  • 00:17:48
    maduro final, se las denomina intrones.
  • 00:17:54
    Algo notable es que los exones suelen
  • 00:17:58
    ser en general mucho más pequeños que
  • 00:18:01
    los intrones. Hm. De modo tal que los
  • 00:18:03
    exones representan una proporción
  • 00:18:05
    minoritaria en la secuencia total de
  • 00:18:11
    ADN. ¿Cómo es este proceso de remoción
  • 00:18:15
    de intrones?
  • 00:18:18
    Es un proceso molecular que también fue
  • 00:18:21
    comenzado que se comenzó a comprender
  • 00:18:23
    durante la década de los 70, pero
  • 00:18:25
    avanzaron las investigaciones a la
  • 00:18:27
    década posterior para lograr descifrarlo
  • 00:18:29
    de una manera más
  • 00:18:31
    completa y debemos tener en cuenta para
  • 00:18:34
    comprender lo que es un proceso
  • 00:18:36
    altamente preciso en términos
  • 00:18:38
    moleculares. Notemos que
  • 00:18:41
    implica el clivaje, el corte de eh los
  • 00:18:46
    enlaces covalentes en dos puntos de la
  • 00:18:50
    secuencia del transcripto primario y la
  • 00:18:53
    unión posteriormente de dos exones que
  • 00:18:57
    estaban separados antes por un intrón.
  • 00:19:01
    Notemos que si este proceso se
  • 00:19:03
    produjera, por ejemplo, por un error
  • 00:19:05
    molecular de un único nuucleótido, esto
  • 00:19:08
    tendría
  • 00:19:10
    consecuencias negativas para la célula,
  • 00:19:12
    porque esto probablemente produciría una
  • 00:19:15
    alteración en cómo se leen los codones
  • 00:19:18
    en el proceso de la traducción, luego en
  • 00:19:20
    el transcripto primario. Por eso, una
  • 00:19:24
    pregunta que se hacía la comunidad
  • 00:19:25
    científica durante los años 70 y 80 es,
  • 00:19:29
    ¿cuál es el proceso molecular que
  • 00:19:31
    permite remover los intrones y unir los
  • 00:19:34
    exones con tanta exactitud?
  • 00:19:37
    Y parte de la respuesta es que se han
  • 00:19:39
    encontrado que secuencias en el
  • 00:19:43
    transcripto primario,
  • 00:19:46
    hm, denominadas secuencias con senso del
  • 00:19:48
    splicing, van a guiar a la maquinaria
  • 00:19:51
    molecular que va a ejecutar estos pasos
  • 00:19:53
    de corte y empalme. Estas secuencias con
  • 00:19:57
    senso del splicing se ubican
  • 00:19:59
    fundamentalmente en tres sectores.
  • 00:20:06
    en aquella región que está en la
  • 00:20:08
    interfaz entre el exón y el
  • 00:20:11
    intrón, un sitio que está hacia el
  • 00:20:14
    extremo 5 prima del
  • 00:20:17
    transcripto. Lo llamaremos sitio dador
  • 00:20:20
    del splicing o sitio 5 prima. Otra
  • 00:20:23
    secuencia que está también en la
  • 00:20:26
    interfaz entre el intron y el exón
  • 00:20:29
    posterior, que denominaremos sitio
  • 00:20:32
    aceptor del splicing o sitio 3 prima y
  • 00:20:36
    nucleótidos que están en el interior del
  • 00:20:38
    exón que se denominan sitio de
  • 00:20:41
    ramificación. Hm.
  • 00:20:44
    Estas secuencias, como yo les decía, van
  • 00:20:47
    a reclutar a la maquinaria molecular que
  • 00:20:50
    va a ejecutar los pasos de ruptura y
  • 00:20:54
    formación de nuevos enlaces covalentes
  • 00:20:57
    característicos del
  • 00:21:00
    splicing. Justamente lo que se descubrió
  • 00:21:03
    en los años 80 fue que esta maquinaria
  • 00:21:06
    puede hacer este trabajo con enorme
  • 00:21:08
    precisión por su composición molecular.
  • 00:21:13
    Estamos hablando de un conjunto de
  • 00:21:16
    proteínas asociadas a RN pequeños que en
  • 00:21:20
    conjunto se denomina el
  • 00:21:24
    spliciosoma. A las moléculas que se
  • 00:21:26
    componen por ARNs y proteínas que forman
  • 00:21:29
    un complejo funcional entre ARns y
  • 00:21:32
    proteínas, se las conoce como
  • 00:21:35
    ribonucleoproteínas y es un conjunto de
  • 00:21:37
    ribonucleoproteínas las que conforman el
  • 00:21:40
    spliciosoma.
  • 00:21:42
    Hay un total de cinco
  • 00:21:44
    ribonucleoproteínas. Cada una de ellas
  • 00:21:47
    va a estar unida a un pequeño RN
  • 00:21:50
    denominado ARN pequeño nuclear.
  • 00:21:55
    Sns, por sus siglas en inglés, small
  • 00:21:58
    nuclear arns. H.
  • 00:22:03
    Aquí observamos, por ejemplo, una de
  • 00:22:06
    estas
  • 00:22:08
    ribonucleoproteínas h que por estar
  • 00:22:12
    asociadas a RN pequeños se las denomina
  • 00:22:15
    en inglés SN RNPs, small nuclear
  • 00:22:19
    ribonucleo proteins. Y en la jerga de la
  • 00:22:22
    investigación científica, como es una
  • 00:22:24
    palabra difícil de leer porque no tiene
  • 00:22:26
    vocalas, se la llama
  • 00:22:30
    snorps. Entonces, podemos decir que el
  • 00:22:32
    espliciosoma está compuesto de cinco
  • 00:22:35
    snurps, cada uno de ellos compuesto por
  • 00:22:38
    sub unidades proteicas y uno de estos
  • 00:22:40
    cinco ARN pequeños
  • 00:22:45
    nucleares. El
  • 00:22:47
    reconocimiento entonces de la secuencia
  • 00:22:49
    consenso que está entre los exones y los
  • 00:22:52
    intrones y del sitio de ramificación es
  • 00:22:55
    producido por complementariedad de bases
  • 00:22:57
    entre los ARNs pequeños que forman parte
  • 00:23:01
    de las subunidades del
  • 00:23:03
    espliciosoma. Y también veremos que la
  • 00:23:05
    interacción entre las subunidades del
  • 00:23:08
    esplayosoma entre sí también van a estar
  • 00:23:10
    mediadas por reconocimiento, por
  • 00:23:12
    complementariedad de bases de los ARN
  • 00:23:15
    pequeños. entre
  • 00:23:18
    sí. Analicemos un poco más en detalle
  • 00:23:21
    cuáles son los mecanismos moleculares
  • 00:23:23
    que ejecutan estas ribonucleos
  • 00:23:26
    proteínas, es decir, el
  • 00:23:28
    spliciosoma. Cada evento de splicing,
  • 00:23:31
    como hemos conceptualizado, remueve un
  • 00:23:34
    intrón e involucra dos reacciones
  • 00:23:37
    secuenciales de corte eh y formación de
  • 00:23:41
    nuevos enlaces covalentes conocidas como
  • 00:23:44
    transesterificaciones. Hm.
  • 00:23:46
    En un primer momento, distintas
  • 00:23:49
    subunidades del pladiciosoma, distintas
  • 00:23:53
    ribonucleoproteínas reconocen los
  • 00:23:55
    distintos sitios con censo, uno el sitio
  • 00:23:58
    dador del splicing, otro el sitio de
  • 00:24:01
    ramificación y la primera ruptura y
  • 00:24:04
    formación de enlaces covalentes se da
  • 00:24:06
    aquí, en
  • 00:24:08
    donde un nucleótido particular en el
  • 00:24:11
    sitio de ramificación forma un enlace
  • 00:24:13
    covalente con el nucleótido que estaba
  • 00:24:17
    en la transición entre un exón y un
  • 00:24:19
    intrón en el sitio dador de splicing.
  • 00:24:22
    Esto involucrará una ruptura previa de
  • 00:24:25
    este enlace y la formación de un enlace
  • 00:24:27
    covalente. Un segundo. Esto generará
  • 00:24:30
    esta esta primera reacción genera un
  • 00:24:32
    pequeño
  • 00:24:34
    lazo en el punto de ramificación. Luego,
  • 00:24:38
    la segunda transestificación se dará
  • 00:24:41
    entre el extremo hidroxilo libre que
  • 00:24:43
    quedó en el
  • 00:24:44
    exón eh anterior y el límite exxón
  • 00:24:50
    intrón posterior. Esta es la segunda
  • 00:24:53
    transestificación que produce el
  • 00:24:55
    splazoma. Estas reacciones están
  • 00:24:58
    catalizadas
  • 00:24:59
    enzimáticamente y algo notable es que
  • 00:25:02
    esa actividad enzimática no es no está
  • 00:25:05
    producida por las proteínas del
  • 00:25:08
    esplicosoma, sino que está catalizada
  • 00:25:10
    por los ARN pequeños
  • 00:25:13
    mismos. Y esta fue una de las primeros
  • 00:25:15
    descubrimientos de que los moléculas de
  • 00:25:18
    ARN también pueden funcionar como
  • 00:25:20
    catalizadores biológicos o ribocimas.
  • 00:25:24
    Finalmente, entonces, como consecuencia
  • 00:25:26
    de la remoción de este intron, eh el
  • 00:25:29
    intrón queda en forma de lazo y luego se
  • 00:25:31
    degradará en el interior del núcleo y en
  • 00:25:34
    el sitio en donde se produjo el empalme
  • 00:25:37
    de los dos hexones que antes estaban
  • 00:25:39
    separados por un intrón y ahora quedaron
  • 00:25:43
    continuos, queda un residuo proteico,
  • 00:25:45
    ¿si? una modificación proteica alrededor
  • 00:25:48
    de ese sitio en donde se produjo el
  • 00:25:49
    splicing, aquí representado en el
  • 00:25:51
    esquema con un pequeño cuadrado rojo que
  • 00:25:53
    se denomina complejo de unión a exones.
  • 00:25:57
    Hm. Recordemos a este componente
  • 00:25:59
    molecular porque cumplirá una función
  • 00:26:02
    que analizaremos
  • 00:26:06
    posteriormente. Si bien el splicing se
  • 00:26:09
    produce cada vez que se transcribe
  • 00:26:12
    cualquier
  • 00:26:13
    ARN eucariota y en particular cualquier
  • 00:26:16
    ARN
  • 00:26:18
    humano, se ha podido identificar que
  • 00:26:20
    este proceso no ocurre exactamente del
  • 00:26:23
    mismo modo para el mismo transcripto en
  • 00:26:26
    distintos tejidos en los que este gen se
  • 00:26:29
    exprese o en distintos momentos del
  • 00:26:32
    desarrollo. Por ejemplo, se ha visto que
  • 00:26:36
    ciertas secuencias que, por ejemplo,
  • 00:26:39
    pensemos en esta representación en donde
  • 00:26:43
    tenemos un gen eucariota discontinuo
  • 00:26:46
    compuesto por cinco hexones. Y
  • 00:26:49
    focalicémonos en el exon número tres. Lo
  • 00:26:52
    que se ha observado es que este gen
  • 00:26:55
    cuando se expresa en ciertos
  • 00:26:57
    tejidos, esta secuencia que denominamos
  • 00:27:00
    exón se comporta como tal y está
  • 00:27:02
    presente en ARN mensajero maduro y
  • 00:27:06
    contribuye, por ejemplo, con sus
  • 00:27:09
    secuencias a la codificación de los
  • 00:27:12
    aminoácidos que finalmente van a ser
  • 00:27:14
    traducidos a partir de la misma. En
  • 00:27:17
    tanto que cuando estos cuando este gen
  • 00:27:20
    se expresa en otros tejidos, este
  • 00:27:23
    secuencia ya no se comporta como un
  • 00:27:25
    exón, sino que se comporta como un
  • 00:27:27
    intrón y es removido. Hm. Y está ausente
  • 00:27:31
    del transcripto primario. H el efecto
  • 00:27:34
    final es que distintos tejidos generan
  • 00:27:38
    isoformas de una misma proteína,
  • 00:27:41
    variantes funcionales de una misma
  • 00:27:44
    proteína.
  • 00:27:46
    Veámoslo con un poco más de
  • 00:27:52
    detalle. En el caso del gen de la
  • 00:27:54
    tropimioina, como para poner un ejemplo,
  • 00:27:56
    que seguramente es una proteína que
  • 00:27:58
    seguramente quienes estén haciendo
  • 00:28:00
    histología ya la han analizado porque
  • 00:28:04
    cumple un rol en la contracción
  • 00:28:06
    muscular.
  • 00:28:09
    Sin embargo, este gen de la
  • 00:28:10
    tropomicioina no se expresa únicamente
  • 00:28:13
    en el músculo estriado, hm, sino que se
  • 00:28:17
    expresa en otros tejidos. Y si uno
  • 00:28:20
    compara cuáles son las secuencias que se
  • 00:28:24
    comportan como exones en el músculo
  • 00:28:27
    estriado, cuando uno compara con la
  • 00:28:30
    secuencia del transcripto primario,
  • 00:28:32
    notará que hay diferencias respecto de
  • 00:28:34
    cuáles son las secuencias que se
  • 00:28:35
    comportaron como exones en
  • 00:28:37
    comparación con los transcriptos que se
  • 00:28:40
    generan cuando este gen se expresa en el
  • 00:28:44
    cerebro. Hm.
  • 00:28:46
    Es decir, por un
  • 00:28:50
    lado, el concepto de splicing
  • 00:28:53
    alternativo nos ayuda a pensar en un
  • 00:28:57
    mecanismo mediante el cual se aumenta la
  • 00:28:59
    capacidad codificante del genoma, porque
  • 00:29:02
    a partir de un mismo segmento de ADN
  • 00:29:05
    pueden
  • 00:29:06
    generarse distintos transcriptos
  • 00:29:08
    primarios, seguramente en tejidos
  • 00:29:10
    distintos o en distintos momentos del
  • 00:29:12
    desarrollo que generarán isoforas de una
  • 00:29:15
    misma
  • 00:29:16
    proteína, pero también nos permite
  • 00:29:20
    relativizar de alguna manera la
  • 00:29:22
    definición de exón o intrón, h, ya que
  • 00:29:26
    algunas secuencias se comportan como
  • 00:29:29
    exones en algunos tejidos y en algunos
  • 00:29:31
    contextos particulares del desarrollo,
  • 00:29:33
    pero no se comportan como exones en
  • 00:29:38
    otros. ¿Cómo se regula este splicing
  • 00:29:42
    alternativo?
  • 00:29:47
    Este splicing alternativo, primero antes
  • 00:29:49
    de ver los mecanismos de
  • 00:29:52
    regulación, me gustaría mencionar en qué
  • 00:29:54
    consiste. No toda alteración del
  • 00:29:56
    mecanismo de splicing ha sido observada
  • 00:29:59
    empíricamente. La más lo más frecuente
  • 00:30:02
    es que una secuencia que se comporta
  • 00:30:04
    como un exón en ciertos tejidos se
  • 00:30:07
    comporte como un intrón en otros. Y a
  • 00:30:09
    este mecanismo se lo denomina salteo de
  • 00:30:11
    exones. Hm.
  • 00:30:13
    También se puede producir la retención
  • 00:30:15
    de un intron, es decir, una secuencia
  • 00:30:17
    que usualmente se comporta con como un
  • 00:30:19
    intron, no sea removida en algunos
  • 00:30:22
    tejidos. Hm. Y hay otros mecanismos
  • 00:30:25
    adicionales que también han sido
  • 00:30:27
    descrptos. La pregunta sería ahora,
  • 00:30:30
    ¿cuáles son los mecanismos moleculares
  • 00:30:32
    que
  • 00:30:33
    permiten que en distintos tejidos o en
  • 00:30:36
    distintos momentos del
  • 00:30:38
    desarrollo, a partir de la expresión del
  • 00:30:40
    mismo gen, se generen estas formas
  • 00:30:42
    alternativas de splicing?
  • 00:30:46
    Para comprender estos mecanismos
  • 00:30:49
    moleculares, volvamos a un concepto que
  • 00:30:51
    hemos visto hace algunos
  • 00:30:53
    minutos, la idea de las secuencias
  • 00:30:56
    consenso del
  • 00:30:58
    splicing. Que las secuencias sean
  • 00:31:01
    consenso. Este nombre particular que le
  • 00:31:04
    damos significa que no todas las
  • 00:31:07
    secuencias que encontramos los límites
  • 00:31:09
    entre los exones e intrones y las
  • 00:31:12
    secuencias de los puntos de ramificación
  • 00:31:14
    son exactamente idénticas en todos los
  • 00:31:19
    exones e intrones en los distintos genes
  • 00:31:21
    humanos, sino que hay un alto grado de
  • 00:31:24
    similitud.
  • 00:31:27
    Entonces, esto
  • 00:31:29
    hace o ha podido observarse que algunas
  • 00:31:33
    secuencias
  • 00:31:34
    particulares tengan mayor capacidad para
  • 00:31:37
    reclutar a la maquinaria del splicing,
  • 00:31:40
    para reclutar a ese sitio al
  • 00:31:43
    spliciosoma.
  • 00:31:44
    A esas secuencias que tienen alta
  • 00:31:46
    afinidad por el splicosoma, las
  • 00:31:48
    denominados las denominamos secuencias
  • 00:31:51
    fuertes de
  • 00:31:53
    splicing. En tanto que variantes de
  • 00:31:55
    estas secuencias consenso que tienen una
  • 00:31:58
    menor capacidad para reclutar al
  • 00:32:00
    pliciosoma y que necesitan de proteínas
  • 00:32:03
    adicionales para producir efectivamente
  • 00:32:05
    este reclutamiento, las denominamos
  • 00:32:07
    secuencias débiles del
  • 00:32:11
    splicing. Con esta
  • 00:32:14
    consideración, veamos otro aspecto de
  • 00:32:17
    este mecanismo de regulación, la
  • 00:32:19
    existencia de proteínas reguladoras del
  • 00:32:23
    splicing.
  • 00:32:25
    Imaginemos e dos tejidos
  • 00:32:27
    inicialmente en donde se expresa un
  • 00:32:29
    mismo gen. Podríamos pensar en el
  • 00:32:31
    ejemplo del gen de la
  • 00:32:33
    tropomiosina en el músculo estriado
  • 00:32:36
    esquelético, una célula del músculo
  • 00:32:38
    estriado esquelético y una célula del
  • 00:32:41
    tejido
  • 00:32:42
    nervioso. Imaginemos que para un intrón
  • 00:32:46
    particular, aquí representado en
  • 00:32:48
    amarillo, posee secuencias fuertes de
  • 00:32:51
    splicing, es decir, que por sí misma
  • 00:32:55
    puede reclutar de manera efectiva al
  • 00:32:57
    spliciosoma.
  • 00:32:59
    Si en el primer tejido no hay ninguna
  • 00:33:02
    proteína adicional que bloquee el
  • 00:33:05
    reconocimiento de estos sitios fuertes
  • 00:33:07
    de splicin, el splicosoma removerá el
  • 00:33:10
    intron y este intrón se comportará como
  • 00:33:12
    tal y no estará representado en el
  • 00:33:15
    transcripto maduro. Pero si en un
  • 00:33:17
    segundo tejido en donde este mismo gen
  • 00:33:20
    se está expresando está presente una
  • 00:33:23
    proteína que se une a uno de los sitios
  • 00:33:25
    consensos del splicing,
  • 00:33:27
    ocultándolo de su reconocimiento por el
  • 00:33:30
    spliciosoma, este intrón no podrá ser
  • 00:33:33
    removido y pasará a comportarse como un
  • 00:33:36
    exón, es decir, estará presente en el
  • 00:33:39
    transcripto primario final.
  • 00:33:43
    Algo similar pero complementario,
  • 00:33:45
    podemos pensar en otro ejemplo en donde
  • 00:33:47
    tenemos un intron con secuencias débiles
  • 00:33:50
    de splicing. Habíamos dicho que si hay
  • 00:33:53
    secuencias con senso
  • 00:33:55
    débiles, ellas mismas no pueden reclutar
  • 00:33:58
    por sí mismas a la maquinaria de
  • 00:33:59
    splicing y en ausencia en un tejido
  • 00:34:02
    particular de proteínas adicionales que
  • 00:34:04
    ayuden a este reclutamiento, este
  • 00:34:06
    intrón no será removido y se comportará
  • 00:34:09
    como un exón. estará presente en el
  • 00:34:11
    transcripto maduro. En tanto que en un
  • 00:34:14
    segundo tejido que contenga estas
  • 00:34:15
    proteínas activadoras que permitan
  • 00:34:18
    reclutar al espliciosoma, efectivamente
  • 00:34:21
    se producirá el splicing. Hm. En otras
  • 00:34:25
    palabras, la existencia del splicing
  • 00:34:28
    alternativo se debe a que distintas
  • 00:34:30
    células de distintos tejidos o en
  • 00:34:33
    distintos momentos del desarrollo, el
  • 00:34:35
    repertorio de proteínas reguladoras del
  • 00:34:38
    splicing que hay en cada uno de estos
  • 00:34:40
    tipos celulares difiere entre sí.
  • 00:34:47
    Entonces, como consecuencia de estos
  • 00:34:50
    tres pasos de procesamiento, la
  • 00:34:53
    modificación del extremo 3 prima, del
  • 00:34:55
    extremo 5 prima y el corte y empalme de
  • 00:34:59
    exones, las secuencias que quedan
  • 00:35:02
    presentes en el ARN mensajero maduro son
  • 00:35:05
    las siguientes. En el extremo cinco
  • 00:35:08
    prima estará el CAP o la
  • 00:35:10
    caperusa, pero el primer
  • 00:35:13
    nucleótido luego de la Caperusa, no es
  • 00:35:17
    el nucleótido en donde la traducción va
  • 00:35:21
    a comenzar, sino que hay una secuencia
  • 00:35:23
    de nucleótidos previas al inicio de la
  • 00:35:26
    traducción y a ese segmento que está
  • 00:35:29
    presente en el ARN maduro y por
  • 00:35:31
    endexónico se lo denomina región cinco
  • 00:35:35
    prima no traducida.
  • 00:35:37
    por sus siglas en inglés, región 5 prima
  • 00:35:40
    UTR, untranslated
  • 00:35:44
    region. Luego del codón que inicia la
  • 00:35:48
    traducción, que es el codón AUG, que
  • 00:35:51
    codifica para meteonina, está la
  • 00:35:54
    secuencia codificante, la secuencia de
  • 00:35:56
    codones que serán efectivamente
  • 00:35:58
    traducidos hasta llegar a un codón stop.
  • 00:36:03
    Pero luego del codon stop, el ARN
  • 00:36:05
    mensajero maduro continúa y hay una
  • 00:36:08
    secuencia no traducida, pero en el otro
  • 00:36:11
    extremo que se que se la denomina región
  • 00:36:15
    3 prima
  • 00:36:16
    UTR y que es previa al agregado de la
  • 00:36:19
    cola de polía que fue producto de uno de
  • 00:36:22
    los pasos de procesamiento. Son entonces
  • 00:36:25
    estas secuencias las que están presentes
  • 00:36:27
    en el ARN maduro. Y déjenme adelantarles
  • 00:36:30
    que las regiones 5 prima UTR y 3 prima
  • 00:36:34
    UTR cumplirán un rol fundamental en
  • 00:36:38
    regular la estabilidad del transcripto
  • 00:36:43
    primario. Sin
  • 00:36:44
    embargo, esta representación idealizada
  • 00:36:48
    del transcripto lineal no es lo que
  • 00:36:50
    ocurre en el interior de las células,
  • 00:36:53
    porque como hemos podido ver, los ARN se
  • 00:36:56
    encuentran relacionados con una
  • 00:36:58
    multiplicidad de proteínas que han ido
  • 00:37:01
    adquiriendo a lo largo de su maduración.
  • 00:37:05
    No solo tenemos a las proteínas de unión
  • 00:37:07
    al CAP, el CAP Binding Complex por un
  • 00:37:11
    lado y las proteínas de unión a la poli
  • 00:37:14
    por el otro, sino que también tenemos
  • 00:37:17
    otro repertorio de proteínas nucleares,
  • 00:37:19
    entre ellas los complejos de unión
  • 00:37:21
    exones en todos los puntos en donde se
  • 00:37:24
    produjo un sitio de splicing. Todas
  • 00:37:26
    estas conjunto de proteínas son
  • 00:37:30
    necesarias para que se produzca la
  • 00:37:32
    correcta exportación.
  • 00:37:35
    del ARN mensajero maduro desde el núcleo
  • 00:37:39
    en donde se produjo hacia el citosol a
  • 00:37:42
    través de los poros nucleares en donde
  • 00:37:44
    va a producirse el proceso de la
  • 00:37:45
    traducción.
  • 00:37:48
    También estas proteínas son necesarias
  • 00:37:51
    para que se produzca la interacción con
  • 00:37:55
    proteínas denominadas factores de
  • 00:37:59
    iniciación de la traducción eucariotas H
  • 00:38:02
    y que van a permitir el comienzo de la
  • 00:38:05
    traducción del
  • 00:38:07
    transco. En
  • 00:38:09
    particular, aquí observamos a dos
  • 00:38:12
    proteínas, dos factores del inicio de la
  • 00:38:15
    traducción.
  • 00:38:17
    que interactúan por un lado con el
  • 00:38:20
    complejo de unión al CAP y por otro lado
  • 00:38:23
    con las proteínas de unión a la cola de
  • 00:38:26
    poli de modo tal que la
  • 00:38:29
    configuración que permite la traducción
  • 00:38:32
    del ARN mensajero es esta configuración
  • 00:38:35
    circular.
  • 00:38:39
    Esto, este aspecto particular, esta
  • 00:38:41
    configuración particular de proteínas de
  • 00:38:44
    unión a la RN que van a permitir su
  • 00:38:46
    correcta exportación y
  • 00:38:48
    traducción funciona en términos
  • 00:38:50
    moleculares como un control de calidad
  • 00:38:54
    de la expresión génica, ya que evita
  • 00:38:57
    que, por ejemplo, si un ARN mensajero se
  • 00:39:01
    rompe por un accidente molecular, se
  • 00:39:03
    trunca, evita que esa región truncada
  • 00:39:06
    sea exportada y traducida. Hm. Y este es
  • 00:39:10
    otro sentido entonces en el que podemos
  • 00:39:13
    pensar la regulación de la expresión
  • 00:39:16
    génica, regulando el funcionando como un
  • 00:39:20
    control de calidad de estos productos
  • 00:39:22
    génicos.
  • 00:39:25
    Una vez en el citosol, el ARN mensajero
  • 00:39:28
    en esta configuración
  • 00:39:30
    circular que está determinada por la
  • 00:39:33
    interacción entre las proteínas que se
  • 00:39:35
    unen a sus extremos y los factores del
  • 00:39:37
    inicio de la traducción,
  • 00:39:39
    permiten el ensamblaje de las
  • 00:39:41
    subunidades de los ribosomas sobre el
  • 00:39:44
    mensajero y la correcta traducción del
  • 00:39:47
    mismo. En esta imagen, lo que puede
  • 00:39:50
    observarse es algo frecuente en los ARN
  • 00:39:53
    mensajeros maduros que han sido
  • 00:39:55
    exportados correctamente, que comienzan
  • 00:39:57
    a ser traducidos de manera simultánea
  • 00:40:00
    por muchos
  • 00:40:02
    ribosomas. Por supuesto, todos se
  • 00:40:06
    ensamblan alrededor del codón de inicio
  • 00:40:09
    de la traducción y luego avanzan. Hm. En
  • 00:40:11
    donde uno puede ver de manera
  • 00:40:13
    esquemática cómo va generándose la
  • 00:40:15
    proteína. Hm. Cada vez más larga.
  • 00:40:19
    A medida que los ribosomas avanzan el
  • 00:40:21
    proceso de traducción.
  • 00:40:27
    Un aspecto a considerar que forma parte
  • 00:40:30
    de los mecanismos de control de calidad
  • 00:40:32
    es el hecho de que cuando por una
  • 00:40:37
    mutación, por ejemplo, aparece un codón
  • 00:40:40
    stop prematuro en una proteína, esos
  • 00:40:44
    ARNs son efectivamente degradados, no
  • 00:40:47
    son traducidos generando una proteína
  • 00:40:50
    más corta. Y para comprender el
  • 00:40:52
    mecanismo por el cual se detectan los
  • 00:40:56
    codones stop
  • 00:40:58
    prematuros, vamos a analizar a un
  • 00:41:01
    proceso
  • 00:41:02
    denominado degradación de RN mensajero
  • 00:41:05
    por secuencias de terminación prematura.
  • 00:41:08
    Esto comúnmente se conoce, eh se lo
  • 00:41:11
    nombra en inglés como nonsense mediated
  • 00:41:13
    decay.
  • 00:41:16
    Para comprender cómo funciona este
  • 00:41:18
    mecanismo, debemos
  • 00:41:21
    recordar, comparemos a un a la
  • 00:41:24
    traducción pionera, es decir,
  • 00:41:27
    al primer proceso de traducción cuando
  • 00:41:30
    pase el primer ribosoma que va a
  • 00:41:31
    traducir este
  • 00:41:33
    RN en presencia o en ausencia de este
  • 00:41:36
    codón stop adicional. Para que
  • 00:41:38
    comprendamos esta representación,
  • 00:41:40
    tenemos en la izquierda un transcripto
  • 00:41:43
    normal en donde no se está representando
  • 00:41:45
    su configuración circular para hacerlo
  • 00:41:48
    más simple a la representación y en
  • 00:41:51
    donde aquí en el último de los exones
  • 00:41:55
    antes de la cola de polía se representa
  • 00:41:57
    con este pequeña esfera el codón stop.
  • 00:42:04
    Aquí
  • 00:42:08
    tenemos en en el en un transcripto que
  • 00:42:11
    ha adquirido por una mutación un codón
  • 00:42:14
    stop prematuro, el codón stop natural y
  • 00:42:17
    el codón stop extra producto de esa
  • 00:42:21
    mutación.
  • 00:42:22
    Como les decía, aquí está representado
  • 00:42:25
    el ribosoma con sus subunidades 60s y
  • 00:42:28
    40s. Lo que ocurre en condiciones
  • 00:42:30
    fisiológicas es que cuando se produce la
  • 00:42:34
    primera rueda de traducción, el ribosoma
  • 00:42:37
    al pasar por el complejo de un exones,
  • 00:42:40
    ¿recuerdan que era ese complejo que
  • 00:42:42
    quedaba unido en los empalmes entre dos
  • 00:42:45
    sexones
  • 00:42:48
    adyacentes,
  • 00:42:50
    esto mantiene la estabilidad del
  • 00:42:53
    transcript? Hm.
  • 00:42:56
    En cambio, por ejemplo, cuando hay un
  • 00:42:58
    codón stop temprano, el ribosoma va a
  • 00:43:01
    despegarse al encontrarse un primer
  • 00:43:04
    codón stop y no
  • 00:43:06
    modificará a los complejos de unión
  • 00:43:09
    exones que están en un punto posterior.
  • 00:43:12
    Estos complejos de unión exones no
  • 00:43:14
    modificados por esta primera rueda de
  • 00:43:18
    traducción que tiene el transcripto,
  • 00:43:22
    reclutarán exonucleas que van a inducir
  • 00:43:25
    la degradación temprana del transcripto.
  • 00:43:28
    Dicho de otro modo, usualmente se
  • 00:43:31
    observa que codones stop tempranos,
  • 00:43:34
    frecuentemente en exones previos al
  • 00:43:37
    último, inducen este mecanismo de
  • 00:43:39
    degradación temprana y esto conduce a
  • 00:43:42
    que la célula no produzca proteínas
  • 00:43:45
    truncas ni utilice recursos de
  • 00:43:47
    traducción en proteínas no
  • 00:43:51
    funcionales. Analicemos a continuación
  • 00:43:53
    los mecanismos moleculares que regulan
  • 00:43:56
    la estabilidad de los ARN mensajeros. en
  • 00:43:58
    condiciones fisiológicas, es decir, en
  • 00:44:01
    condiciones de ausencia de mutación.
  • 00:44:07
    Ha podido determinarse experimentalmente
  • 00:44:09
    que no todos los ARN
  • 00:44:12
    mensajeros dentro de una célula tienen
  • 00:44:14
    la misma duración en el tiempo. Algunos
  • 00:44:17
    se degradan más rápido y otros se
  • 00:44:19
    degradan más lento. Es decir, sus vidas
  • 00:44:22
    medias, el término molecular que se
  • 00:44:24
    utiliza para definir
  • 00:44:26
    esto, puede ser un tiempo muy corto,
  • 00:44:29
    durar solo unos pocos minutos. Y en ese
  • 00:44:32
    caso diremos que esos ARNs mensajeros
  • 00:44:34
    son
  • 00:44:35
    inestables, en tanto que hay otros
  • 00:44:38
    debidas medias muy largas que son muy
  • 00:44:39
    estables. Por ejemplo, los ARNs
  • 00:44:43
    mensajeros eh de proteínas que codifican
  • 00:44:46
    proteínas que controlan el ciclo celular
  • 00:44:48
    suelen ser ARN inestables. Tanto que los
  • 00:44:51
    ARN mensajeros de proteínas abundantes
  • 00:44:54
    que tienen importancia funcional,
  • 00:44:56
    proteínas estructurales, por ejemplo,
  • 00:44:59
    suelen tener vidas medias mucho más
  • 00:45:02
    prolongadas. Esto permitió
  • 00:45:05
    advertir que existen mecanismos dentro
  • 00:45:08
    de las células que regulan de manera
  • 00:45:11
    diferencial la degradación de algunos
  • 00:45:15
    ARN versus otros. en particular pueden
  • 00:45:18
    proteger a un subconjunto de ARN
  • 00:45:20
    mensajeros de la acción de
  • 00:45:22
    exodiendonucleas o exponer a otros a las
  • 00:45:25
    mismas y regular así de manera
  • 00:45:28
    diferencial estas vidas medias.
  • 00:45:32
    Parte de los mecanismos moleculares que
  • 00:45:35
    regulan esta estabilidad suelen ser
  • 00:45:37
    generales. Por ejemplo, la existencia,
  • 00:45:40
    como ya hemos visto, de complejos de
  • 00:45:43
    unión a la caperusa o de proteínas de
  • 00:45:46
    unión a la cola de polia. Pero también
  • 00:45:48
    hay mecanismos que actúan de manera
  • 00:45:50
    diferencial sobre los distintos
  • 00:45:52
    transcriptos. Por ejemplo, pueden unirse
  • 00:45:55
    a ellos, dependiendo de la forma
  • 00:45:57
    tridimensional que adopten estos
  • 00:45:59
    transcriptos, diferentes proteínas de
  • 00:46:02
    unión
  • 00:46:04
    ARN, RBPs, por sus siglas en inglés, RNA
  • 00:46:08
    binding proteins. Y estas proteínas de
  • 00:46:11
    unión a la RN pueden conferirle
  • 00:46:14
    estabilidad o inestabilidad, ya sea si
  • 00:46:17
    protejan o recluten al sitio del AN
  • 00:46:21
    mensajero a las exoyendonucleasas.
  • 00:46:25
    Vamos a analizar con cierto detalle a
  • 00:46:27
    continuación un mecanismo particular de
  • 00:46:31
    regulación de la estabilidad de los ARN
  • 00:46:34
    que está mediado por una familia de
  • 00:46:37
    pequeños ARNs no codificantes que
  • 00:46:41
    funcionan como reguladores
  • 00:46:43
    posttranscripcionales de la expresión
  • 00:46:45
    génica. se denominan
  • 00:46:48
    micros. Estas moléculas están
  • 00:46:51
    codificadas por el genoma y generan
  • 00:46:54
    cuando adoptan su forma madura,
  • 00:46:57
    pequeños eh oligonucleótidos de RN de
  • 00:47:01
    aproximadamente 21 nucleótidos de
  • 00:47:03
    longitud.
  • 00:47:06
    Estos nucleótidos en el citosol se unen
  • 00:47:09
    a un
  • 00:47:10
    complejo proteico denominado risk por
  • 00:47:14
    sus siglas en inglés, que se traduce
  • 00:47:17
    como complejo efector, complejo
  • 00:47:19
    silenciador eh de RNA.
  • 00:47:24
    Y lo que hace el micro RN es
  • 00:47:28
    guiar es por el complementariedad de
  • 00:47:31
    bases a este complejo efector
  • 00:47:35
    un usualmente a un segmento localizado
  • 00:47:38
    en el extremo tres prima no traducido
  • 00:47:41
    del ARN
  • 00:47:42
    mensajero. Entonces, dependiendo de la
  • 00:47:45
    complementariedad o no que existe entre
  • 00:47:47
    el micro RN y el ARN mensajero en
  • 00:47:51
    cuestión, esto guiará o no al complejo
  • 00:47:55
    efector de
  • 00:47:56
    silenciamiento. Una vez que este
  • 00:47:58
    complejo proteico compuesto por diversas
  • 00:48:00
    proteínas, una de ellas son las
  • 00:48:02
    proteínas de la familia argonautas, aquí
  • 00:48:04
    representadas con la sigla
  • 00:48:07
    ago, se desencadenan una serie de
  • 00:48:09
    procesos que van a reprimir la
  • 00:48:12
    traducción de este mensajero y también
  • 00:48:15
    van a inducir la degradación de la RN
  • 00:48:18
    mensajero. Es decir, los microarrenes al
  • 00:48:20
    unirse al transcripto maduro en el
  • 00:48:23
    citosol disminuyen la vida media del
  • 00:48:26
    transcripto y evitan que se siga
  • 00:48:29
    traduciendo. El genoma humano posee
  • 00:48:31
    alrededor de 2,300 genes para diferentes
  • 00:48:34
    micro RDNs y un mismo una misma
  • 00:48:38
    secuencia de micro RNES tiene distintos
  • 00:48:40
    blancos moleculares, ya que regulará a
  • 00:48:44
    todos aquellos transcriptos maduros que
  • 00:48:46
    tengan secuencias complementarias.
  • 00:48:49
    a la secuencia del micro
  • 00:48:53
    RN. Estos micro RNs entonces participan
  • 00:48:56
    de la regulación fina de los niveles de
  • 00:48:58
    expresión. Hm. A diferencia de los
  • 00:49:02
    controles
  • 00:49:04
    pretranscripcionales y controles del
  • 00:49:06
    inicio de la transcripción que vimos en
  • 00:49:08
    la clase pasada, que funcionaban como
  • 00:49:10
    una especie de interruptor, todo o nada
  • 00:49:13
    de la expresión de un gen, los
  • 00:49:15
    microenes funcionarán como
  • 00:49:18
    ecualizadores, regulando a nivel fino
  • 00:49:21
    los niveles de expresión.
  • 00:49:24
    Este mecanismo muy novedoso cuando se lo
  • 00:49:26
    descubrió en la década de los 90, que
  • 00:49:29
    permitió identificar una familia de RN
  • 00:49:31
    que interfería con la expresión de
  • 00:49:34
    otros, se lo denominó en forma general
  • 00:49:37
    fenómeno de interferencia de ARN. Y su
  • 00:49:41
    descubrimiento permitió, por ejemplo,
  • 00:49:44
    diseñar ARNs pequeños artificiales que
  • 00:49:47
    pueden utilizarse como fármacos, ya que
  • 00:49:50
    pueden introducirse dentro de las
  • 00:49:51
    células.
  • 00:49:53
    para regular negativamente algunos
  • 00:49:55
    transcriptos que están teniendo efectos
  • 00:49:57
    negativos en ciertos
  • 00:50:00
    contextos. Veamos por último la
  • 00:50:03
    regulación de la estabilidad y la
  • 00:50:05
    actividad de las proteínas.
  • 00:50:08
    Una vez que las proteínas se producen,
  • 00:50:11
    es decir, culmina la traducción en el
  • 00:50:14
    citosol, algunos productos proteicos no
  • 00:50:17
    son necesariamente activos, sino que
  • 00:50:20
    solo se activan bajo condiciones
  • 00:50:22
    particulares. Por ejemplo, muchas
  • 00:50:25
    modificaciones covalentes como la
  • 00:50:27
    fosforilación cambian el estado de
  • 00:50:29
    actividad de las proteínas o la unión de
  • 00:50:32
    un ligando particular puede transformar
  • 00:50:34
    a una proteína de un estado inactivo a
  • 00:50:36
    un activo. Por ejemplo, la unión de
  • 00:50:40
    hormonas esteroideas que ingresan al
  • 00:50:42
    interior
  • 00:50:43
    celular, encuentran a receptores
  • 00:50:46
    intracelulares proteicos que solo a
  • 00:50:49
    posterior desunión con su ligando pueden
  • 00:50:51
    migrar al núcleo y cumplir la función de
  • 00:50:54
    ser factores específicos de la
  • 00:50:56
    transcripción. O muchos ejemplos de
  • 00:50:58
    proteínas que participan en la
  • 00:51:00
    regulación del ciclo celular que solo
  • 00:51:03
    cuando son fosforiladas se vuelven
  • 00:51:06
    activas. Por
  • 00:51:07
    ejemplo, las elicas que al ser fosfor
  • 00:51:11
    que están localizadas en los orígenes de
  • 00:51:13
    replicación de la células, pero que solo
  • 00:51:17
    se vuelven activas cuando son
  • 00:51:18
    fosforilados por los complejos CDCI
  • 00:51:20
    clinas característicos de la fase F.
  • 00:51:25
    Algo importante de identificar de esta
  • 00:51:28
    regulación postraduccional es que suelen
  • 00:51:31
    tener efectos en el muy corto plazo, es
  • 00:51:35
    decir, las modificaciones funcionales se
  • 00:51:38
    ejecutan en las células en el lapso de
  • 00:51:40
    entre segundos y minutos. Y esto
  • 00:51:42
    contrasta con modificaciones más lentas
  • 00:51:45
    que se dan en el transcurso de horas,
  • 00:51:47
    como son las que se requieren eh las que
  • 00:51:51
    usualmente involucran los mecanismos de
  • 00:51:54
    regulación del acceso a la cromatina,
  • 00:51:57
    tal como vimos en la clase pasada. En
  • 00:52:00
    otras palabras, la temporalidad de los
  • 00:52:02
    distintos mecanismos que regulan la
  • 00:52:05
    expresión génica son
  • 00:52:08
    diferentes. Por último, la vida media de
  • 00:52:12
    las
  • 00:52:13
    proteínas también está regulada
  • 00:52:16
    activamente por las células, por un
  • 00:52:18
    sistema que se denomina ubiquitina
  • 00:52:21
    proteasoma.
  • 00:52:23
    La ubiquitina es una pequeña proteína
  • 00:52:25
    aquí representada con una pequeña esfera
  • 00:52:28
    verde que puede ser unida, conjugada a
  • 00:52:32
    distintos sustratos
  • 00:52:34
    proteicos. Mediante la unión de varias
  • 00:52:37
    proteínas de ubiquitina, hablamos de una
  • 00:52:39
    reacción de de
  • 00:52:41
    poliubiquitinación. Esta reacción de
  • 00:52:44
    conjugación de ubiquitina a distintos
  • 00:52:46
    sustratos está llevada a cabo por un
  • 00:52:49
    conjunto de enzimas denominadas
  • 00:52:51
    ubiquitín ligas. Hm. Hay tres clases
  • 00:52:55
    diferentes de ubiquitín ligas porque la
  • 00:52:58
    reacción requiere tres pasos. Una
  • 00:53:00
    primera enzima activadora de tipo E1 a
  • 00:53:04
    la que activa mediante la
  • 00:53:07
    desfosforilación de un ATP a la
  • 00:53:09
    ubiquitina.
  • 00:53:11
    Esta luego
  • 00:53:14
    transmitirá, sí, pasará mediante la
  • 00:53:17
    conjugación de la ubiquitina a una
  • 00:53:19
    segunda enzima, una enzima E2 y esta
  • 00:53:21
    finalmente se la pasará a una enzima E3.
  • 00:53:25
    Y las E3 ubiquitín ligazas son las que
  • 00:53:29
    van a reconocer específicamente a
  • 00:53:32
    distintos sustratos a los cuales
  • 00:53:33
    conjugar esta
  • 00:53:36
    poliubiquitina. Hay distintas clases de
  • 00:53:39
    tres ligas. en distintos tipos celulares
  • 00:53:41
    que reconocerán distintos sustratos y
  • 00:53:43
    esto es lo que le confiere la
  • 00:53:45
    especificidad a la reacción de
  • 00:53:47
    poliubiquitinación.
  • 00:53:49
    Además, pensemos que las etesligazas
  • 00:53:52
    pueden estar en estados inactivos o
  • 00:53:54
    activos, por ejemplo, mediante
  • 00:53:56
    fosforilaciones. O sea, que solo bajo
  • 00:53:58
    ciertas condiciones particulares de la
  • 00:54:00
    célula, esta reacción de
  • 00:54:02
    polioviquitinación de ciertos sustratos
  • 00:54:05
    va a llevarse adelante. ¿Cuál es el
  • 00:54:07
    efecto final sobre una proteína al
  • 00:54:11
    agregársele esta cadena de
  • 00:54:13
    poliubiquitinas? El resultado es su
  • 00:54:16
    degradación por parte de un complejo
  • 00:54:18
    proteico que tiene actividad de proteasa
  • 00:54:21
    y que es muy abundante en las células,
  • 00:54:24
    pero que solo reconoce como sustratos a
  • 00:54:27
    proteínas que están extensamente
  • 00:54:29
    polipubiquitinadas.
  • 00:54:33
    Un ejemplo frecuente que hemos visto ya
  • 00:54:36
    en eh ustedes en otras clases es la
  • 00:54:39
    degradación de las cisclinas que regulan
  • 00:54:41
    la actividad de las quinazas
  • 00:54:43
    dependientes de ciclinas en la
  • 00:54:46
    regulación de la progresión del ciclo
  • 00:54:49
    celular. La cantidad de moléculas de
  • 00:54:52
    ciclina varía a lo largo del ciclo
  • 00:54:54
    justamente porque ante determinadas
  • 00:54:56
    señales intracelulares se activan las C3
  • 00:54:58
    ligazas que unen poliubiquitinas. a las
  • 00:55:02
    moléculas de ciclina y conducen a su
  • 00:55:04
    degradación por el
  • 00:55:08
    proteasoma. A modo de conclusión de esta
  • 00:55:11
    clase, me gustaría reflexionar con
  • 00:55:14
    ustedes las distintas manifestaciones de
  • 00:55:17
    la regulación de la expresión génica que
  • 00:55:19
    hemos visto en la clase anterior y en
  • 00:55:22
    esta.
  • 00:55:23
    Un primer aspecto para comprender a que
  • 00:55:26
    denominamos regulación de la expresión
  • 00:55:28
    génica es el conjunto de mecanismos que
  • 00:55:31
    regulan el nivel, es decir, la cantidad
  • 00:55:33
    de un determinado producto
  • 00:55:36
    génico. La regulación
  • 00:55:37
    prestranscripcional y del inicio de la
  • 00:55:39
    transcripción que analizamos la clase
  • 00:55:41
    pasada o el efecto de los micro RNs
  • 00:55:46
    terminan regulando si hay o no producto
  • 00:55:49
    génico y la cantidad de los mismos. son
  • 00:55:52
    ejemplos de esta aspecto de la
  • 00:55:55
    regulación de la expresión gémica, pero
  • 00:55:58
    otros mecanismos
  • 00:56:00
    regulan el nivel de actividad del
  • 00:56:02
    producto génico como los mecanismos
  • 00:56:04
    posttraduccionales de proteínas, ¿no? La
  • 00:56:06
    fosforilación de una proteína puede
  • 00:56:08
    transformarla de activa a inactiva. Y
  • 00:56:12
    aquí tenemos una modificación que regula
  • 00:56:14
    la actividad de un producto
  • 00:56:16
    génico. También analizamos mecanismos
  • 00:56:20
    que regulan ya no la cantidad, sino la
  • 00:56:23
    calidad del producto
  • 00:56:25
    génico. Cuando analizamos el splicing
  • 00:56:28
    alternativo, observamos que estos
  • 00:56:30
    procesos regulatorios permitían generar
  • 00:56:34
    isoformas proteicas distintas a partir
  • 00:56:36
    de un procesamiento diferencial de un
  • 00:56:38
    mismo transcripto primario. Y por último
  • 00:56:42
    también vimos mecanismos moleculares que
  • 00:56:45
    cumplen la función de controlar la
  • 00:56:48
    calidad de un producto génico cuando
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    analizamos los efectos que tienen las
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    modificaciones en los extremos 5 prima y
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    3 prima de la RN o los mecanismos de
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    nonsense mediated decay que degradaban a
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    un transcripto cuando tenían un codrano
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    son ejemplos de este último tipo de
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    regulación del expresión génica.
Tag
  • expresión génica
  • ARN mensajero
  • splicing alternativo
  • ubiquitina
  • microARNs
  • capping
  • poliadenilación
  • regulación postranscripcional
  • estabilidad del ARN
  • proteínas