Métodos de recuento microbiano

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https://www.youtube.com/watch?v=oOVcbloehn8

Sintesi

TLDRO vídeo detalha o processo de recuenta de microrganismos em amostras, essencial para garantir a qualidade e segurança de produtos químicos como alimentos e água. O recuento pode ser direto, utilizando cultivos, ou indireto, medindo propriedades relacionadas ao crescimento de microrganismos. A PCR em tempo real é citada como uma técnica moderna que quantifica tanto microrganismos cultiváveis quanto não cultiváveis. O vídeo explica a preparação das amostras, incluindo diluições em série necessárias para obter uma contagem precisa. Para a análise, a temperatura de incubação e o número adequado de colônias na placa de Petri são fundamentais. Além disso, discute-se a aplicação de métodos probabilísticos quando a contagem direta não é possível.

Punti di forza

  • 🔬 O recuento de microrganismos é vital para a segurança alimentar.
  • 🧪 Técnica de diluição é fundamental para obter colônias contáveis.
  • 🌡️ Incubação a 35°C é ideal para bactérias.
  • 📊 UFC representa unidades formadoras de colônia viáveis.
  • 📉 Colônias entre 30 e 300 são as mais apropriadas para contagem.
  • ⚗️ PCR em tempo real permite contabilizar microrganismos não cultiváveis.
  • 📉 Métodos probabilísticos são usados quando a contagem não é viável.

Linea temporale

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    Os recuentos de microrganismos são essenciais para avaliar a qualidade e segurança de água, alimentos e práticas de produção. As técnicas de contagem podem ser diretas, dependentes de cultivo, ou indiretas, utilizando métodos como PCR em tempo real, que contabilizam tanto organismos cultiváveis quanto não cultiváveis. As contagens diretas, como em placas de Petri, ajudam a determinar o número de células viáveis, que se multiplicam formando colônias, sendo reportadas em Unidades Formadoras de Colônia (UFC). Para obter resultados precisos, é vital realizar diluições seriadas adequadas antes da semeadura. Para amostras sólidas, o procedimento envolve pesar e diluir a amostra, enquanto para amostras líquidas, a agitação e diluição também são necessárias. Após a incubação das placas, as colônias são contadas, e os resultados são ajustados de acordo com o volume de semeadura e a diluição aplicada. Métodos probabilísticos como o Número Mais Provável são aplicáveis quando a contagem individual não é viável, oferecendo estimativas da população bacteriana com alta probabilidade estatística.

Mappa mentale

Video Domande e Risposte

  • Qual é o objetivo dos recuentos de microrganismos?

    Determinar o número de microrganismos em amostras para verificar a qualidade e segurança de produtos.

  • Quais são as técnicas de recuento de microrganismos?

    As técnicas incluem contagem direta (cultivo) e indireta (análise de propriedades físicas ou químicas).

  • Como é feita a diluição de amostras sólidas?

    Pesando 10 gramas da amostra e adicionando 90 ml de água de diluição.

  • Qual é a temperatura ideal para incubar as placas?

    35 graus Celsius para bactérias e temperatura ambiente para bolores.

  • O que é a unidade formadora de colônia (UFC)?

    É uma medida usada para reportar o número de microrganismos viáveis encontradas.

  • Como são contadas as colônias em placas de Petri?

    Seleciona-se placas com 30 a 300 colônias para contagem e aplicação de fórmulas para estimar a concentração.

  • O que fazer se não houver crescimento nas amostras?

    Reportar resultados como menor a uma UFC, dependendo da diluição.

  • Quando utilizar o método de número mais provável?

    Quando a contagem quantitativa de células individuais não for viável.

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    los recuentos micro órganos son usados
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    microorganismos en diferentes matrices
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    de análisis hacerlo permite comprobar la
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    calidad la seguridad sanitaria y buenas
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    prácticas de producción y manufactura de
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    productos de interés como el agua y los
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    alimentos oa nivel ambiental permite
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    conocer la diversidad y composición
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    microbiana de una matriz
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    las técnicas de recuento pueden ser
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    directas o indirectas las directas
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    generalmente son dependientes de cultivo
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    y por ende los microorganismos no
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    cultivables no podrán ser contabilizados
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    técnicas de biología molecular como la
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    pcr en tiempo real
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    han ganado relevancia en la actualidad
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    debido a que permiten contabilizar
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    microorganismos cultivables y no
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    cultivamos por otro lado las técnicas de
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    recuento indirectas son mediante la
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    determinación de analitos o de
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    propiedades físicas o químicas que se
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    pueden relacionar con el crecimiento o
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    la concentración de determinados
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    microorganismos dos de las técnicas de
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    recuento más utilizadas en un
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    laboratorio de microbiología son
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    recuento en placas por superficie y
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    recuento por placa vertida ambos
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    determinan el número de microorganismos
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    viables en una muestra cada célula
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    viable crece y se divide para producir
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    unas colonias por lo tanto el número de
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    colonias es directamente proporcional al
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    número de células por esta razón los
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    resultados son reportados como unidades
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    formadoras de colonia v
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    antes de realizar una siembra con el
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    objetivo de hacer un conteo de la
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    mayoría de veces realizar de ilusiones
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    seriadas en base 10 con el fin de
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    obtener un número de colonias que puedan
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    ser contadas
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    la mayoría de métodos de referencia
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    recomiendan hacer conteos de cajas de
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    petri que tengan entre 30 y 300 de
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    fisión para realizar un conteo en placas
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    por superficie se debe
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    homogenizar la muestra en el recipiente
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    que la contiene
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    para muestras sólidas pesar 10 gramos en
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    un frasco o elsa plástica estéril que
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    pueda contener mínimo 100 mililitros de
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    volumen y agregar 90 mililitros de agua
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    de dilución
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    esta es la ilusión 10 a la menos 1
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    agitar vigorosamente por lo menos 5
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    minutos
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    para muestras líquidas agitar
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    fuertemente durante un minuto
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    tomar 10 mililitros y agregar un frasco
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    esta es la ilusión 10 a la menos 1
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    agitar vigorosamente por lo menos 5
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    y definir las ilusiones a trabajar en el
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    análisis dependiendo del nivel de
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    tomar con una pipeta un mililitro de la
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    ilusión de sal a -1 y transferirla a 9
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    mililitros de agua de ilusión y mezclar
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    esta es la ilusión 10 a la menos 2 de
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    esta ilusión tomar un mililitro y
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    transferirla a 9 mililitros de agua de
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    ilusión esta será la dilución 10 al am
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    en usted y así sucesivamente hasta
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    llegar a la dilución deseada
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    con una pipeta estéril o micro pipeta
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    tomar punto mililitros o 100 microlitros
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    de muestra volumen que normalmente se
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    usa y adicional sobre la caja de petri
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    con el haga respectivo que puede ser r2
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    o play camp para el recuento de peritos
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    o sauro para recuento de moss y
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    levaduras
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    con enlace de vidrio estéril distribuir
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    uniformemente la muestra
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    dejar las cajas de petri reposar durante
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    unos minutos con el fin de que la
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    muestra se seque luego éstas se
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    invierten y se colocan en la incubadora
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    de 24 a 48 horas a 35 grados celsius
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    para bacterias y a temperatura ambiente
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    para móviles
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    para realizar un conteo por placa
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    vertida se repiten los pasos del 1 al 4
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    anteriormente escritos luego adicionar
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    un mililitro de muestra a la base de una
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    caja de petri stetix agregar el medio de
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    cultivo fundido a una temperatura
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    alrededor de 45 grados celsius
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    homogenizar tal y como se muestra en
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    nuestro vídeo de métodos de siembra
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    dejar que se solidifique el medio e
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    incubar las cajas invertidas de 24 a 48
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    después del periodo de incubación para
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    realizar el conteo se deben seleccionar
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    cajas de petri con colonias entre 30 y
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    300
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    efe sin contar las colonias de cada caja
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    promedia los valores y se tienen
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    resultados de muestras duplicado y
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    multiplicar por el inverso de la
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    dilución en el recuento final se
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    informan dos dígitos si en la caja de
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    petri no se observa crecimiento y es una
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    muestra que se siembra sin dilución
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    el resultado será menor a una ufc pero
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    si no se observa crecimiento en la
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    ilusión de sal a menos 1 el resultado se
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    reporta como menor a 10 ufc y así
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    sucesivamente no olvide indicar el
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    volumen de siembra en el resultado si
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    por centímetro cuadrado hay menos de 10
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    colonias contar 3 de cuadrados
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    representativos siete consecutivos
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    horizontales y seis verticales que
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    forman ángulos rectos multiplicar la
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    suma de los 13 por 5 si por centímetro
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    cuadrado hay más de 10 colonias contar
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    cuatro cuadrados representativos sacar
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    el promedio y multiplicarlo por 65 si la
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    caja de petri es de vidrio
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    si la caja de es plástica a
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    multiplicar por 57 sí por centímetro
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    cuadrado y más de 100 colonias reportar
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    como demasiado numeroso para contar de
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    npc o mayor a 6500 ufc
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    también existen métodos probabilísticos
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    como número más probable que se utiliza
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    cuando no es posible realizar una
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    determinación cuantitativa de células
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    individuales para esto es necesario
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    visualizar y reconocer fácilmente la
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    característica del microorganismo que
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    crecimiento el resultado obtenido es una
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    afirmación de que hay un 95 por ciento
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    de probabilidad de que la población
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    bacteriana está en el rango calculado y
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    que este es el número más probable
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    estadísticamente
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