PREPARO DA LÂMINA HISTOLÓGICA

00:14:33
https://www.youtube.com/watch?v=-CJ3jw2lyf0

摘要

TLDRThe video outlines the histopathology process, detailing the steps from macroscopic analysis of biopsy samples to the preparation of histological slides. It emphasizes the importance of accurate patient identification, the use of specific tools, and the meticulous procedures involved in tissue processing, including dehydration, clearing, and embedding in paraffin. The video also covers the cutting of tissue sections, staining techniques, and the final assembly of slides for microscopic examination, highlighting the significance of each step in achieving accurate diagnostic results.

心得

  • 🔍 Histopathology begins with macroscopic analysis of tissue samples.
  • 🧪 Accurate patient identification is crucial for diagnosis.
  • ✂️ Tissue processing involves dehydration, clearing, and embedding.
  • 🌡️ Proper temperature is essential for paraffin infiltration.
  • 📏 Tissue sections should be 4-6 micrometers thick for microscopy.
  • 🎨 Staining enhances visibility of cellular structures.
  • 🧬 Different stains highlight various cellular components.
  • 🧊 Avoid air bubbles when sealing slides for better visualization.
  • 🔬 Microtomes are essential for cutting thin tissue sections.
  • 📋 Each step in the process is vital for accurate diagnosis.

时间轴

  • 00:00:00 - 00:05:00

    The histopathological analysis begins with the macroscopic examination of the tissue, ensuring patient data accuracy. The biopsy piece is assessed for its characteristics, such as size and texture, before being cut longitudinally for further processing. The pieces are then placed in cassettes for identification and must be stored properly if not processed immediately.

  • 00:05:00 - 00:14:33

    The processing of the tissue involves dehydration, clearing, and infiltration with paraffin. Dehydration removes water from the tissue using ethanol, followed by clearing with a substance compatible with paraffin. Finally, the tissue is infiltrated with paraffin to provide rigidity for thin slicing. The paraffin block is then prepared for microtomy, ensuring proper positioning to avoid air bubbles during the cutting process.

思维导图

视频问答

  • What is the first step in histopathology analysis?

    The first step is the macroscopic analysis of the tissue, checking patient details and noting characteristics.

  • What materials are used in the histopathology process?

    Materials include tweezers, a ruler, a microtome knife, and cassettes for sample storage.

  • What is the purpose of dehydration in tissue processing?

    Dehydration removes water from the tissue to allow paraffin to penetrate.

  • What is the role of paraffin in histopathology?

    Paraffin is used to embed the tissue, providing support for thin slicing.

  • How thick should the tissue sections be for microscopic examination?

    Sections should typically be 4 to 6 micrometers thick.

  • What is the purpose of staining in histopathology?

    Staining enhances the visibility of cellular structures under a microscope.

  • What is the final step in preparing a histological slide?

    The final step is sealing the slide with a cover glass to prevent air bubbles.

  • What is the significance of using a microtome?

    A microtome is used to cut very thin sections of embedded tissue for microscopic analysis.

  • What is the importance of proper temperature during paraffin embedding?

    Proper temperature ensures effective infiltration of paraffin into the tissue.

  • What is the function of the staining process?

    Staining helps to differentiate various cellular components for better visualization.

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    dentro da análise do material para
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    histopatologia o primeiro passo é a
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    marcos copia onde fazemos a análise
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    microscópica do tecido analisando e
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    anotando suas características
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    então a primeira coisa é conferir no
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    frasco o nome do paciente se coincide
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    com os dados anotados na ficha para ver
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    se corresponde e aqui podemos meios
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    materiais que serão utilizados a pinça a
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    régua a navalha de microeconomia ea
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    bandeja onde será colocada a peça
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    biopsiado é retirada da peça a qual será
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    colocada no cassete que possui os dados
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    correspondentes sendo estes o número do
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    caso
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    e o homem é importante observar as
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    características macroscópicas da peça
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    biopsia da as quais serão todas
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    devidamente registradas pois elas irão
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    ajudar no diagnóstico final somando se
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    ao exame histopatológico o material
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    recebido consta de um fragmento de
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    tecido mole possui um formato irregular
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    superfície rugosa consistência borracha
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    de cor esbranquiçada possuindo 6
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    milímetros de comprimento 5 milímetros
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    de largura e 3 milímetros de altura
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    agora partimos para a parte de secção da
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    peça o corte precisa ser o único para
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    evitar que a má se ela é então
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    seccionada ao meio no sentido
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    longitudinal
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    além disso ele deve ser feito de forma
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    que possa ser visualizado a área de
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    tecido conjuntivo mais interna ea região
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    das bordas onde se encontra o epitélio
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    finalizado o corte
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    as peças são colocadas nos cassetes
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    identificados e seguem para o
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    processamento
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    mas atenção se o processamento não foi
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    realizado no momento
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    as peças devem ser armazenadas informou
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    10%
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    o
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    [Música]
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    o processamento pode ser feito
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    manualmente ou por meio de equipamentos
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    como processador o qual é programado e
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    banho material em cada recipiente com as
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    substâncias automaticamente esse
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    processo tem o objetivo principal de
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    tornar o tecido mais resistente para ser
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    cortado em dimensões mínimas e possui
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    três etapas
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    a desidratação a diabolização ou
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    clarificação e a impregnação
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    desidratação
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    o material biológico mesmo após a
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    fixação ainda retém cerca de 85 por
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    cento de água e seu interior e começado
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    a parafina é um produto derivado do
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    petróleo portanto insolúvel em água
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    desta forma para que ela consiga
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    penetrar no ter sido processado é
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    necessário que a água presente seja
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    retirada
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    diversas substâncias hidratantes são
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    eficazes variando apenas o tempo de
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    desidratação
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    porém continuamente é o álcool etílico o
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    produto mais utilizado para esse fim
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    durante o processo pode se observar que
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    a peça recupera sua cor natural e
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    diminui de tamanho visto que no espaço
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    onde havia água agora não há mágica
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    aconselha se que a desidratação do
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    tecido seja feita de forma progressiva
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    quanto à graduação alcoólica e não
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    diretamente com algo absoluto já que a
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    finalidade do álcool é retirar a água
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    dos tecidos
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    essa água que sai é também responsável
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    pela diminuição do agente desidratante
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    em questão de a organização o
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    clarificação a parafina é insolúvel em
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    água e muito pouco em algo
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    desta maneira faz se necessário que o
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    álcool presente nas peças após o
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    processo de desidratação seja
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    substituído por um produto com o qual a
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    parafina tem afinidade no processamento
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    histológico de rotina como dia
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    finalizador cochilou é o mais utilizado
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    e conforme vai penetrando na peça em
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    substituição ao álcool
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    a peça vai se tornando mais claro o
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    motivo pelo qual a etapa pode também ser
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    chamada de claro fica
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    os dias organizadores são insolúveis em
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    água e solúveis em algo portanto tem
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    densidade maior que a do auto-emprego
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    nação
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    nessa etapa as peças são infiltrados por
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    algumas substâncias de consistência
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    firme para que adquiram rigidez
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    suficiente e seja possível a realização
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    de cortes finos são vários os materiais
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    utilizados para esse fim
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    porém o mais utilizado é a parafina
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    seja qual for a substância utilizada é
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    necessário que ela tenha afinidade com o
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    dia finalizador utilizado anteriormente
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    e que se solidifique de maneira
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    controlada sendo fluida o suficiente
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    para penetrar nos espaços internos do
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    tecido e depois de endurecer para formar
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    o bloco para que os tecidos sejam
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    infiltrados pela fina é preciso que se
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    atinja seu ponto de fusão
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    aproximadamente 60 graus
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    hoje ela se mantém sólida à temperatura
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    ambiente
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    alguns fatores podem influenciar na
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    qualidade da integração como
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    temperaturas muito elevadas pois podem
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    causar danos ao tecido tornando as peças
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    muito retraídos e com rigidez exagerado
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    por outro lado se a temperatura estiver
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    abaixo do ponto de fusão da parafina não
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    se torna possível a impregnação da peça
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    [Música]
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    enquanto na etapa anterior
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    a parafina penetra nos tecidos ocupando
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    os espaços anteriormente preenchidos por
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    agricultura na inclusão a parafina
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    envolve o exterior da peça e após
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    esfriar endurecer forma um bloco que
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    será submetido posteriormente a
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    microeconomia
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    é importante estar atento à posição em
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    que as peças serão colocadas no molde
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    visto que isso determinará a incidência
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    de corte que será realizada o cassete
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    com tecido então retirada do processador
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    e em seguida as peças impregnados são
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    colocadas com a superfície a ser
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    seccionada mais plana voltada para baixo
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    em um molde normalmente metálico o
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    posicionamento das peças no molde
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    deverão ser realizados com o auxílio de
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    uma pinça com delicadeza e sem a
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    formação de bolhas de ar que
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    posteriormente serão observadas como
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    artefatos nas lâminas
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    logo após é derramada a parafina líquida
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    sobre o molde e em seguida
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    espera-se e criar e solidificar após
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    alguns minutos pode se conferir se a
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    solidificação foi concluída
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    colocando o molde sobre a pele
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    averiguando se a temperatura interna
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    realmente diminuiu
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    por fim é só retirar o bloco do molde
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    com cuidado
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    mas atenção se houver alguma imperfeição
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    que possa dificultar ou inviabilizar o
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    processo de micro tomiya ou da
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    microscopia
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    o processo deve ser repetido
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    [Música]
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    para que seja possível analisar um
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    tecido e microscópio óptico é necessário
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    que esteja disposta na lâmina uma sessão
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    bem fina rotineiramente nos laboratórios
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    recomenda-se a espessura de 4 a 6
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    micrômetros que a espessura ideal para a
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    passagem de luz e evidencia a ação do
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    tecido em microscópio
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    o primeiro passo é regular o microcosmo
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    ajustando suas alavancas e angulações em
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    seguida é selecionada lâmina que será
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    utilizada geralmente é utilizada uma
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    lâmina desgastada para fazer um desbaste
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    processo esse onde se retira o excesso
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    de parafina até atingir o tecido
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    lembrando sempre de colocar o acessório
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    de segurança da lâmina para evitar se
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    machucar durante distrações quando não
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    estiver utilizando em seguida o bloco de
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    parafina é posicionada no preto e dor de
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    cassetes e as alavancas são novamente
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    ajustadas
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    feito isso posição na se comporta
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    navalhas o mais próximo possível do
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    bloco e ele passa a ser desgastado
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    nesse exemplo foram utilizados cortes de
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    6 micrômetros
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    para o corte definitivo é utilizado três
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    micrômetros de espessura e uma lâmina
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    nova e bem afiada
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    [Música]
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    as fitas que vão sendo produzidas devem
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    ser levadas com o auxílio de uma pinça e
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    com delicadeza ao banho maria a
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    temperatura aproximada de 50 graus para
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    que ela se destina sobre a água evitando
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    a formação de dobras
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    com os cortes e devidamente prontos é
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    feita pesca dos tecidos colombinas
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    previamente limpas e identificadas
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    [Música]
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    após a pesca
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    as lâminas são encaminhadas à estufa a
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    60 graus
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    [Música]
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    a combinação be crônica considerada
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    coração universal em histologia e
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    citopatologia é aí uma toxina ea usina
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    se as lâminas apresentar em qualquer
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    tipo de sujeira ou gordura impregnados
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    elas são limpas em uma solução de álcool
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    e ácido clorídrico como após a
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    microeconomia os cofres dos tecidos nas
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    lâminas estão envoltas em para fins ea
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    maioria dos corantes são solúveis em
  • 00:11:22
    água
  • 00:11:22
    utiliza-se o xilitol para disparar a
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    finalização é a hidratação é feita
  • 00:11:34
    passando assim em álcool é seqüência de
  • 00:11:37
    crescente de graduação para que o meio
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    de já apto a receber os corantes
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    solúveis em água ea partir daí ficam
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    prontas para serem expostas ao
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    comandante lembrando que as lâminas são
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    agitadas em torno de 20 vezes em cada
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    frasco com as substâncias
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    [Música]
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    após terem passado em concentrações de
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    crescente de algo é retirado seu excesso
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    em água corrente
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    em seguida a superfície da ema toxina é
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    limpa de vida sendo informados
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    precipitado de alumínio componente deste
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    durante a posse são as lâminas são
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    deixadas cerca de 35 minutos na uma
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    toxina aí uma toxina o corante natural
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    oriundo de fontes vegetal tem
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    propriedade decorar os lucros das
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    células ricos em substâncias ácidas como
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    os ácidos nucleicos de roxo isolado
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    devido ao seu caráter básico
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    então é retirar o excesso em água
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    corrente mas não diretamente sobre a
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    marcha em seguida é deixada da usina
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    também cerca de 35 minutos
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    a usina atraída pelos elementos básicos
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    das proteínas citoplasmáticas confere
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    uma coloração rosa avermelhado ao
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    citoplasma sendo o corante mas o físico
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    o processo tem continuidade com a
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    desidratação inserem alcoólica crescente
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    ea qualificação e chillon
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    [Música]
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    [Música]
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    por fim se faz a selagem ou montagem da
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    lâmina que consiste em cobrir o tecido
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    corado com uma lâmina de vidro
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    nesse momento deve se prestar a atenção
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    para evitar a formação de bolhas pois
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    poderão atrapalhar a visualização ao
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    microscópio para finalizar
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    espera-se a cola secar e alumínio a ser
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    fixada na lâmina e o processo da
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    preparação da lana histológica então
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    finalizado
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    [Música]
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