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o Olá pessoal então vamos Começando Aqui
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a nossa aula da semana 7 na semana 7 a
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gente vai tratar sobre os RN assim
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interferência também chamados de RNA tão
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Nobel de medicina ou fisiologia de 2006
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ele contemplou a descoberta de mecanismo
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que permite silenciar atividade de gene
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específico e controlar o fluxo de
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informação genética na célula a
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interferência de RNA ou simplesmente RNA
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e foi descoberta pelos norte-americanos
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and on Fire da Universidade de Stanford
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e cremelo Universidade de Massachusetts
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ambas nos Estados Unidos os dois então
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dividiram o prêmio de cerca de 1,3
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milhões de dólares
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e o mecanismo descoberto pela dupla
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ocorre naturalmente nas células de
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plantas e animais especula-se que ele
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tenha sido desenvolvido há cerca de
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milhões de anos como uma forma de
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proteção das células em plantas e
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animais invertebrados a interferência de
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RNA é uma defesa importante contra
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ataques de vírus a maior parte da
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informação genética dos seres vivos
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eucarióticos está contida no DNA
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armazenado no núcleo da célula essa
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informação é usada para comandar a
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síntese de proteínas que ocorrem no
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citoplasma fora do núcleo o transporte
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dessa informação para o citoplasma é
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feito com auxílio do chamado RNA
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mensageiro a gente já tinha falar um
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pouco na última aula
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com a descoberta de Fairy Melo as duas
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mostrar que a função do RNA na célula
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vai muito além de simplesmente
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transportar as informações do DNA para o
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citoplasma da célula como se acreditou
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durante várias décadas a importância do
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mecanismo da RNA de interferência é que
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ele permite a degradação do RNA
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mensageiro ou de um gene específico E
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com isso o silenciamento de sua
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expressão mostrando-se um processo
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fundamental na regulação da informação
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genética a interferência de RNA se dá
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pela presença de moléculas de RNA de
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dupla fita o RNA mensageiro é uma
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molécula de fita simples formada a
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imagem de um dos braços ou fitas da
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dupla hélice do DNA
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bom então interferência de RNA ela se dá
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pela presença da molécula de RNA de
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dupla fita mais à frente a gente vai
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falar um pouco sobre isso o rma de dupla
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fita Ele ativa as estruturas
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responsáveis pela degradação do RNA
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mensageiro com isso a proteína que seria
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sintetizada a partir da informação
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daquele RNA mensageiro Deixa de ser
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produzida e o gene em questão fica
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silenciado Então pessoal a explicar o
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funcionamento da RNA de interferência
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resolvi colocar aqui no pente com vocês
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pra gente poder desenhar algumas coisas
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que ficar mais fácil a compreensão então
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para entender como é que o processo da
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RNA de interferência funciona para a
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gente precisa de novo relembrar processo
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de produção de uma proteína
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O que ocorre nesse lado no DNA vai
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acontecer a transcrição o Daniel vai ser
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transcrito em RNA com pingo exons e
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introns que acontece o processo de paz
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onde são removidos íntrons ficando
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apenas dos exons formando então o RNA
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mensageiro para a gente a gente vai usar
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como você será que que eu coloquei aqui
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no lado tá então esse RNA mensageiro ele
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vai para o citoplasma da célula lá no
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que possamos ele é traduzida na cadeira
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para formar uma proteína que vai tá mais
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a proteína de proteína C
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e aqui então a gente tem o nosso RNA
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mensageiro vamos supor que a gente
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conheça ele né no caso para gente fazer
00:03:31
uma reagir interferência para produzir
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um remédio interface laboratório de
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precisa conhecer a sequência do RNA
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mensageiro primeiramente porque a gente
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vai produzir uma sequência que seja
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complementar a essa então lá no
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laboratório vai produzir com RH de
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interferência de dupla fita é conhecido
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Então como DS RNA ou double-stranded RNA
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URL dupla fita vai produzir ele com base
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no que a gente quer silenciar o gene que
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a gente quer se então por exemplo eu
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sabendo que o gene o RNA mensageiro aqui
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ó RNA mensageiro
00:04:11
o que produz a proteína Eu gostaria de
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silenciar é esse tão logo ia lá no
00:04:19
laboratório e a produzir RMS dupla fita
00:04:21
que você complementar a ele ou perante
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pega uma igual né
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a alcinha e que embaixo vai ficar
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e o cima Vocês entenderam né mas fica
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complementares aqui tá ficando feio mas
00:04:40
é só para vocês conseguir entender
00:04:44
pronto é produzir Então esse RNA dupla
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fita esse aqui o nosso r a produzir o
00:04:51
nosso DS RN a
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e o DSR na então ele é inserido lá no
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núcleo núcleo no citoplasma da célula e
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inserido na célula que acontece uma
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proteína sem cliva o nosso bsr na uma
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parte dele é destruída pela célula
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constante significa que uma parte da
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vida pela célula a outra parte dele
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forma um complexo com uma proteína Então
00:05:25
a gente vai ter uma proteína isso
00:05:28
complexo Risk como está ali na imagem
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ó e Aqui nós temos o nosso fragmento Dr
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aqui reduzido você consegue perceber que
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esse fragmento de DNA é complementar ao
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RNA mensageiro que a gente tem lá na
00:05:45
célula ele é complementar aqui logo esse
00:05:50
complexo consegue se ligar ao RNA
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mensageiro por complementaridade de
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bases e cliva o RNA mensageiro sem
00:06:00
arrendar mensageiro a gente não tem o
00:06:02
que produção proteína logo a proteína
00:06:05
não é produzir então basicamente o RH de
00:06:10
interferência ele se liga o RNA
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mensageiro E cliva então aí mensageiro
00:06:15
destruindo ele não produzir uma proteína
00:06:18
ou seja o gene é silenciado o gene que
00:06:22
produz uma proteína X no caso a nossa
00:06:24
proteína é x não vai ser produzida
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é basicamente é isso pessoal essa imagem
00:06:30
explicar de uma forma mais simples aqui
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pra vocês então agora eu vou falar um
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pouco sobre Os experimentos chave e
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foram feitos por Melo e Fairy que
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comprovaram que seria Necessário colocar
00:06:42
uma fita dupla de RNA SD Sr na
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hoje na célula para que haja o efeito na
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distanciamento do gene
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bom então ele está investigando a
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regulação e expressão gênica de um verme
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nematoide você é legans que é um
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organismo modelo muito usado em estudos
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de biologia de desenvolvimento então a
00:07:04
injetar nas células esse verme o RNA
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mensageiro responsável por comandar a
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síntese de Proteína muscular eles
00:07:10
notaram eles não notaram qualquer efeito
00:07:12
Eles foram lá por exemplo existe uma
00:07:14
proteína
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e aqui aumenta a massa muscular ou que
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comanda sentir muscular foi injetar
00:07:21
então apenas RNA mensageiro que não
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produziu o efeito ao injetar a mesma
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sequência de RNA mensageiro com suas
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bases genéticas dispostas no sentido
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inverso Ou seja a fita antisenso também
00:07:34
não observar em uma mudança no
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comportamento do animal no entanto eles
00:07:38
investigaram que quando eles injetaram
00:07:40
ambas as formas a fita senso e antisenso
00:07:43
juntas o velho passou exibe movimentos
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peculiares o movimento diferença
00:07:48
observados apenas em animais que não
00:07:50
tinham o gene responsável por codificar
00:07:52
aquela proteína muscular ou seja
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os animais que não tem aquela proteína
00:07:58
se mexem de uma forma quando eles
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inseriram uma dupla fita de RNA esse
00:08:04
animal começou a se mover igual animal
00:08:06
que não tinha aquela proteína em sua
00:08:08
indicativo de que aquela proteína não
00:08:10
estava mais sendo produzida pelo animal
00:08:12
ao se espalharem os RNA senso e antes
00:08:16
senso se ligam um ao outro e formam
00:08:19
hérnia de dupla fita parem Melo
00:08:21
formularam então a hipótese de que esse
00:08:23
RNA de dupla fita poderia estar ligado
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ao silenciamento do Gene que tem a mesma
00:08:28
sequência daquele RNA para testar Então
00:08:31
essa hipótese a dupla injetou RNA de
00:08:33
dupla fita contendo sequências
00:08:35
responsáveis por comandar a síntese de
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diversas outras proteínas naqueles e
00:08:40
elegância eles notaram que o método
00:08:43
levava sistematicamente ao silenciamento
00:08:45
do Gene que tinha a mesma sequência do
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RNA e com isso a proteína associada
00:08:50
aquele Gene deixava de ser produzida
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bom então agora nessa parte da aula vou
00:08:56
falar sobre como os RNA de interferência
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são utilizados no estratégias contra
00:09:01
pragas e vírus para melhorias de plantas
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então aqui eu vou tá colocando a matéria
00:09:07
né o feijão transgênico desenvolvido
00:09:09
pela Embrapa é aprovado no Brasil então
00:09:13
eu vou explicar o porquê que foi
00:09:14
necessário fazer esse feijão transgênico
00:09:16
e como que que foi feito através da
00:09:20
técnica aí de RNA de interferência então
00:09:24
vou falar um pouco sobre o vírus é o
00:09:26
mosaico Dourado ele é a principal virose
00:09:29
na cultura do feijoeiro ela é causada
00:09:32
pelo vírus Bean Golden mosaic virus o
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bgmv esse vírus pertence ao grupo do
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begomovírus que tem um Genoma bipartido
00:09:42
ou seja são dois componentes de DNA
00:09:44
circular o DNA e o DNA b então aqui a
00:09:48
gente tem um vírus de DNA comumente a
00:09:51
gente é costume encontrar vírus de RNA
00:09:53
nesse caso
00:09:54
nós temos um vírus de DNA e esse vírus
00:09:57
Ele é muito prejudicial a planta que
00:09:59
produz o feijão ele pode causar cerca de
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cem porcento da perda da lavoura caso
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uma Lavoura de feijão fica contaminada
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com esse vírus é possível sim que toda a
00:10:11
lavoura seja perdida Então por conta
00:10:13
disso da destruição causada por esse
00:10:16
vírus nas células vegetais
00:10:18
se for necessário então que Embrapa
00:10:20
desenvolvesse de alguma forma uma
00:10:22
resistência a esse vírus e isso eu vou
00:10:25
explicar agora de novo aqui no parente
00:10:27
para que vocês possam entender de uma
00:10:29
forma mais simples então a gente aqui em
00:10:32
que está novamente no bem diferente
00:10:35
poder explicar
00:10:36
a procura explicar um pouco sobre como é
00:10:39
que funciona esse processo de tornar uma
00:10:43
planta a um certo o vírus Então
00:10:46
primeiramente vai falar sobre o processo
00:10:47
de invasão de aplicação de um vírus uma
00:10:51
forma normal tá porque eu peguei uma
00:10:53
figura primeiro vírus ele chega na
00:10:55
célula até se adesão depois acontece a
00:10:58
fusão o vírus então introduz o seu
00:11:00
material genético na célula nesse caso
00:11:02
aqui dessa imagem acontece a transcrição
00:11:04
reversa Mas como eu falei o vírus que
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causam ao mosaico Dourado ele é que
00:11:10
tenia a já é de DNA transcrição reversa
00:11:15
serve para que transformar RNA em DNA
00:11:17
então aqui É desnecessário tá pode
00:11:19
esquecer sua porta então o DNA do vírus
00:11:21
Ele vai entrar lá no núcleo da célula
00:11:23
vai acontecer uma integração o DNA do
00:11:26
vírus se integra ao DNA daquela célula e
00:11:29
a partir daí eu que acontece a própria
00:11:32
célula começa a produzir partículas
00:11:35
virais ou seja
00:11:36
o DNA do vírus e são produzidas as
00:11:40
proteínas virais
00:11:42
e as proteínas virais que vão produzir
00:11:45
também entrar aqui no envelope para
00:11:48
fazer novos vírus
00:11:50
bom então dessa forma acontece o mesmo
00:11:53
processo aqui ó opirus ele precisa o RNA
00:11:59
mensageiro
00:12:01
o enviar mensageiro esse RNA mensageiro
00:12:05
vai público somos lá no ribossomos ele
00:12:08
traduzido em uma proteína a gente vai
00:12:10
ter a proteína viral traduzida lá no
00:12:13
ribossoma
00:12:14
E se a gente pegasse o nosso PS RNA é
00:12:18
aquele nosso RNA de dupla fita
00:12:22
inserir-se ele nessa célula e acontecerá
00:12:26
mesmo processo né ele ia se ligar lá com
00:12:30
Mr na e não ia produzir essa proteína
00:12:33
aqui do vírus logo não ia ter proteínas
00:12:37
dentro do envelope viral e o vírus não
00:12:40
ia ser inútil eu ia funcionar mas o
00:12:42
vírus para outras ela não ia ter as
00:12:45
proteínas que ele precisa e acabou o
00:12:47
vírus
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é só que nesse caso de uma planta
00:12:51
transgênica o Genoma da planta ou seja o
00:12:54
DNA da planta é multiplicado para que
00:12:56
ela mesmo Produza os dsrm as ou seja o
00:13:01
DNA da planta é alterado e ela vai estar
00:13:03
produzindo já aqui já vai estar no
00:13:06
citoplasma os dsrh ser em nada porque o
00:13:14
RNA ele vem do DNA Então pessoal dessa
00:13:20
forma em vez de se utilizar um
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agrotóxico na plantação vai causar na
00:13:26
morte lá da mosca que transmite esse
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vírus é mais fácil e muito melhor para o
00:13:32
meio ambiente se a gente plantar as por
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exemplo de feijão transgênico e foi
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geneticamente modificada para resistir
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ao vírus que aquela mosca carrega logo
00:13:43
não precisaria para colocar agrotóxico
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lá na plantação nenhuma
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e a música jacobinos que ela possui
00:13:50
agora em abril e todo mundo sai ganhando
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no final das contas bom como o material
00:13:57
genético do feijão ele alterado Então
00:14:00
são feitos testes para avaliar o risco
00:14:03
né se essa se esses RNA de interferência
00:14:06
eles vão causar um risco para o ser
00:14:09
humano que se alimentar daquele feijão
00:14:11
então aqui foi feito um esquema né que
00:14:14
diz que vamos por ele tem um caminho de
00:14:17
sim ou não se o feijão ele produz os de
00:14:21
srn as ou Sr na se ele não produz não
00:14:25
tem nenhum dano para pessoa que que que
00:14:28
se alimenta né com ele
00:14:31
bom então feijão ele produz da Sra ou Sr
00:14:35
na Tá bom eu até tinha esquecido de
00:14:38
comentar essa nomenclatura o DSR na é a
00:14:42
molécula gatilho né a dupla fita de RNA
00:14:46
ali inteira depois que ela é privada ela
00:14:51
então chamada de Sr na ou esmalte quer
00:14:54
sangue RNA o R1 pequeno RNA de
00:14:59
interferência depois que ela já está
00:15:02
crivada ali em duas e uma metade dela
00:15:04
destruída EA outra metade é incorporada
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no complexo né
00:15:09
Tá bom então se o feijão ele produz
00:15:11
essas moléculas a gente precisa avaliar
00:15:13
uma quantidade significativa é produzida
00:15:17
e pode ser detectada no grão cozido
00:15:19
senão não tem dano para quem tá se
00:15:22
alimentando é o feijão vai ser cozido e
00:15:25
não tem nenhum problema caso Sim esses é
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reagir dupla fita ou pequenos RNA eles
00:15:33
podem atingir o interior das células
00:15:34
humanas e permanecer lá em impactos
00:15:37
senão não tem nenhum dano vai conseguir
00:15:41
suprir nenhuma produção de uma proteína
00:15:43
humana caso esses DNA senão não cheguem
00:15:46
até a célula
00:15:48
o caso sim na sequência desse RNA tem
00:15:52
homologia com genes humanos porque para
00:15:54
um DNA de interferência ele interferir
00:15:58
em um gene ele precisa ter
00:16:00
complementaridade de bases então se não
00:16:02
tenho complementaridade de bases não tem
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como causar dano não tem como suprir
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nenhuma proteína humana então se não Não
00:16:10
andamos caso Sim a gente vai para outra
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última etapa ali e há evidências em vivo
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de regulação prejudicial do modelo
00:16:18
animal
00:16:18
e se não não tem dano caso alguém faça
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um um teste lá com animal se alimentando
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de um feijão e mostra um dano
00:16:28
prejudicial então a gente pode confirmar
00:16:31
que sim temos danos à saúde causados por
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um alimento transgênico né então a gente
00:16:38
tem que passar aí por diversas etapas de
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testes para poder dizer que um alimento
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transgênico né Ela é perigoso ou nocivo
00:16:48
à saúde humana e no caso desse feijão
00:16:51
ele não é porque ele foi aprovado então
00:16:54
ele passou nesses testes todos essas
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etapas foram concluídas com sucesso
00:16:57
mostrando que ele é seguro para ingestão
00:17:00
ingestão humana bom pessoal agora vou
00:17:03
falar então como os RN a termo
00:17:05
transferência eles são utilizados em
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estratégia contra doenças já falamos
00:17:10
sobre a saúde humana
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bom então aqui eu vou falar sobre o
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medicamento que era utilizada para
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terapia de rma o partes Irã é o primeiro
00:17:20
medicamento eficaz para a amiloidose que
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ela me deu idosa é uma doença genética
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que ela produz umas versões anormais de
00:17:28
uma proteína que a pros te Regina ou TTR
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como pode ser chamada também e essa
00:17:34
proteína Então defeituosa ela se
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acumulam nos tecidos Especialmente nos
00:17:40
nervos periféricos e no coração e isso é
00:17:43
uma doença degenerativa né que tem uma
00:17:45
progressão muito legal então vou
00:17:48
explicar um pouco sobre como é que
00:17:49
funciona essa doença amiloidose e como é
00:17:53
que funciona também o medicamento com
00:17:55
base em RN as interferências
00:17:58
bom então basicamente aqui a gente tem
00:18:01
de novo figura mostrando o processo de
00:18:03
produção de uma proteína e aqui a gente
00:18:06
vai falar primeiro sobre leque uma
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pessoa saudável né normal poderia dizer
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saudável acontece DNA transcrição RNA
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RNA mensageiro daquele que a gente já
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viu é produzir então a proteína a TTR e
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ela faz a sua função normal no corpo já
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uma pessoa que possui a amiloidose ela
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já vai ter o seguinte mutação no Gene
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para o seu DNA Então essa mutação vai
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gerar numa proteína não funcional ou não
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funciona essa proteína não funcional se
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acumula vários órgãos do corpo incluindo
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nervos oração e também no gastro
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intestinal ou seja as pessoas vão
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começar a ter um acúmulo de proteína não
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funcional nesses órgãos O que leva
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a obra Então como é que o medicamento
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atua o conhecendo o gênio né a gente
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conhece qual é o gênero e qual é o
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problema que a gente tem aqui no entanto
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a gente vai conhecer o RNA mensageiro
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vai produzir nosso DS RNA e é o nosso
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rma e Dupla fita vai ter uma dupla fita
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ó e aqui na Isso aqui vai ser inserida
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na célula
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e novamente lá na célula Acontece uma
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clivagem É nesse dsn RNA e ele passa a
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se chamar então esse i.r. na ou esmalte
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RNA o pequeno RNA de interferência é que
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aí são aqueles fragmentos de DNA e vão
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tão se for um aquele complexo Risk
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o complexo whisky
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o que se chama arrisque assim por RNA
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dos silencing Complex um complexo de
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silenciamento induzido por RNA Essa é a
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tradução desse complexo aqui esse Enia
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que vai ser complementar ao é passageiro
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e produz a proteína não funcional então
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ele vai se ligar aqui com RNA mensageiro
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Vai privar esse aqui na mensageiro não
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vai girar a proteína não é funcional e
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ela não se acumula mais tá os tecidos o
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nervo no coração e nem no gás intestinal
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em outros tecidos esse medicamento ele
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já tem este medicamento já foi aprovado
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e basicamente é esse o funcionamento
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dele não causa alterações no DNA de
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nenhuma maneira você pode ver
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medicamento ele não atua o DNA da pessoa
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ele atua em cima do RNA mensageiro que
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e o citoplasma o citoplasma não tem
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alteração genética nenhuma DNA daquela
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pessoa ou seja se não vai passar para a
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próxima geração do Auris opção estão com
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isso a gente encerra aqui a nossa aula
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dna5 preferência qualquer dúvida que
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vocês tiverem vocês podem colocar aqui
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no fórum e também eu gostaria que vocês
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avaliassem esse novo formato de aula Se
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vocês gostaram dos desenhos ficou um
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pouco mais fácil para vocês entenderem
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ou se só complicou ainda mais a vida de
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vocês qualquer coisa dúvidas pelo
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WhatsApp ou pelo fórum nos vemos na
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próxima aula
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E aí
00:21:58
[Aplausos]
00:22:00
E aí
00:22:02
[Música]
