Molecular diagnosis course: Chapter 2 Analysis and Characterization of Nucleic Acids (part I)

00:45:39
https://www.youtube.com/watch?v=Uo5xesmY9rY

Resumo

TLDRThe video elaborates on the second chapter of a book about restriction enzymes, focusing on their types, mechanisms, and applications in genetic research. It explains how restriction enzymes, particularly nucleases, function to cut DNA and the protective methylation mechanisms in bacteria. The chapter categorizes restriction enzymes into Type I, II, and III, detailing their characteristics and laboratory uses. It emphasizes the importance of these enzymes in genetic engineering, cloning, and gene editing, and discusses the melting temperature of DNA and its relation to GC content.

Conclusões

  • 🔬 Understanding restriction enzymes is crucial for genetic engineering.
  • 🧬 Type I enzymes have both cutting and methylation activities.
  • ✂️ Type II enzymes cut DNA at their binding site, making them widely used in labs.
  • 🛡️ Bacteria protect their DNA from restriction enzymes through methylation.
  • 📊 The melting temperature of DNA is influenced by GC content.
  • 🔗 Ligase is essential for joining DNA fragments after cutting.
  • 🧪 Techniques like Southern blotting are used to analyze DNA.
  • 📈 Higher GC content leads to a higher melting temperature.
  • 🧪 PCR is a key technique for amplifying DNA.
  • 🔍 Sticky ends facilitate the joining of DNA fragments.

Linha do tempo

  • 00:00:00 - 00:05:00

    The chapter begins with an introduction to restriction enzymes, specifically focusing on their role in cutting DNA. It highlights the importance of understanding the different types of restriction enzymes and their applications in genetic research.

  • 00:05:00 - 00:10:00

    The concept of nucleases is introduced, explaining how they cut DNA and their presence in bacteria. The discussion emphasizes the protective mechanisms bacteria have to prevent their DNA from being cut by their own nucleases.

  • 00:10:00 - 00:15:00

    The first type of restriction enzyme, Type 1, is discussed, detailing its structure and function. It is noted that Type 1 enzymes have both nuclease and methylase activities, allowing them to cut DNA and recognize specific sites.

  • 00:15:00 - 00:20:00

    The summary continues with an explanation of the recognition sites for Type 1 restriction enzymes, including the distance between the recognition site and the cutting site, which is crucial for understanding their function in genetic manipulation.

  • 00:20:00 - 00:25:00

    Type 2 restriction enzymes are introduced, which are more commonly used in laboratories. The key difference is that Type 2 enzymes do not require methylation for activity, and their cutting site is the same as their recognition site, making them easier to work with.

  • 00:25:00 - 00:30:00

    The discussion shifts to Type 3 restriction enzymes, which do not require palindromic sequences for recognition. Their cutting sites are located a certain distance from the recognition site, which is important for their application in genetic research.

  • 00:30:00 - 00:35:00

    The chapter also covers various restriction enzymes available online, emphasizing the importance of understanding their properties and how they can be utilized in laboratory settings for genetic engineering.

  • 00:35:00 - 00:40:00

    The concept of cohesive ends and blunt ends is introduced, explaining how different restriction enzymes create different types of DNA ends, which is crucial for cloning and genetic manipulation.

  • 00:40:00 - 00:45:39

    Finally, the chapter concludes with a discussion on the applications of restriction enzymes in techniques such as cloning, PCR, and various blotting techniques, highlighting their significance in molecular biology.

Mostrar mais

Mapa mental

Vídeo de perguntas e respostas

  • What are restriction enzymes?

    Restriction enzymes are proteins that cut DNA at specific sequences.

  • How do Type I restriction enzymes work?

    Type I restriction enzymes cut DNA and also have methylation activity.

  • What is the difference between Type II and Type III restriction enzymes?

    Type II enzymes cut at the same site they bind, while Type III enzymes cut at a distance from their binding site.

  • What is the significance of methylation in bacteria?

    Methylation protects bacterial DNA from being cut by its own restriction enzymes.

  • What is the role of restriction enzymes in genetic engineering?

    They are used to cut DNA for cloning and gene editing.

  • What is a 'sticky end' in DNA?

    A sticky end is a single-stranded end of a DNA fragment that can easily bond with complementary DNA.

  • What is the purpose of ligase in DNA manipulation?

    Ligase is an enzyme that joins DNA fragments together by forming phosphodiester bonds.

  • What is the melting temperature (Tm) of DNA?

    Tm is the temperature at which half of the DNA strands are in the double-helix state and half are in the single-strand state.

  • How does the GC content affect the melting temperature of DNA?

    Higher GC content increases the melting temperature due to the stronger triple hydrogen bonds between G and C.

  • What techniques are used to analyze DNA?

    Techniques include Southern blotting, Northern blotting, and PCR.

Ver mais resumos de vídeos

Obtenha acesso instantâneo a resumos gratuitos de vídeos do YouTube com tecnologia de IA!
Legendas
ar
Rolagem automática:
  • 00:00:02
    بسم الله الرحمن الرحيم اليوم نبدا ان شاء
  • 00:00:05
    الله في الشبتر الثاني هو شبتر خاص بالان
  • 00:00:12
    كتشن اسد بروتين وخلال الشابتر ان شاء
  • 00:00:18
    الله حتعرف على عده محاور واهمها حنتكلم
  • 00:00:23
    عن الكشن انم بتفاصيله الكامله زائد انزام
  • 00:00:31
    مابين بما يخص ايضا اليشن تكنيك والبرو
  • 00:00:36
    بانواعها والانواع المتعلقه
  • 00:00:40
    بالبيشن والظروف اللي بتساعد في البريزي
  • 00:00:44
    شن وحنتكلم عن ان شاء الله في عندي كمان
  • 00:00:47
    خاصيه الاري اللي هي الجينوم ار والسا
  • 00:00:52
    والست وانواع البلوتين بشكل عام
  • 00:00:55
    زائد اليشن والمحاليل المستعمله في اليب
  • 00:01:00
    هذا ما يتعلق بالابتر هذا الشابتر يعتبر
  • 00:01:02
    شابتر رقم س من الكتاب اللي اقرته عليكم
  • 00:01:06
    وخبرتكم عنه في اللقاء
  • 00:01:10
    الماضي بدايه ما هو النيوكليز
  • 00:01:14
    او ريستركشن
  • 00:01:17
    نيوكليز ريستركشن
  • 00:01:19
    نيوكليز هي عباره عن انزيمات لها خاصيه
  • 00:01:27
    بقص الدي ان ايه النيوكليز من اسمها
  • 00:01:30
    نيوكليس ونكلس اذابه الانويه واذابه الحمض
  • 00:01:35
    النووي طبعا ها الميزه هي عباره عن ميزه
  • 00:01:39
    موجوده في البكتيريا وبتستعمل في انواع مش
  • 00:01:41
    كل انواع البكتيريا طبعا في الجلوكو فيج
  • 00:01:45
    البكتيريا لما بتهاجم الفيروسات بتعمل على
  • 00:01:48
    تقطيع الدي ان ايه الموجود لعنده وبالتالي
  • 00:01:52
    احنا استغلينا هذه الميزه اللي موجوده في
  • 00:01:54
    البكتيريا ها على اساس
  • 00:01:56
    نستغل خاصيه الانزيم اللي عنده امكانيه
  • 00:02:01
    قطع الدي ان ايه الان هي الخاصيه طالما
  • 00:02:05
    احنا بنقول موجوده عند البكتيريا
  • 00:02:07
    والبكتيريا ننا بقول ايضا انه عندها دي ان
  • 00:02:09
    ايه فالمفروض هذا
  • 00:02:11
    النيوكليز تقطع الدي ان ايه الموجود في
  • 00:02:13
    البكتيريا ولكن هذا الكلام ما بيسمع ليش
  • 00:02:18
    يعني البكتيريا صحيح انه هي ذكيه انه هي
  • 00:02:21
    عندها نيوكليز وانه هي عندها اليه لقطع
  • 00:02:23
    الدي ان ايه تبع الفيروس اللي بتهجم عليه
  • 00:02:26
    لكن مش غبيه بالدرجه انه هي تقطع الدي ان
  • 00:02:28
    ايه تبعها و
  • 00:02:30
    تالي قامت بحمايه نفسها من خلال اضافه
  • 00:02:33
    المثلي شن اللي هي
  • 00:02:36
    عمليه اضافه ميثيل جروب على الدي ان اي
  • 00:02:39
    تبع البكتيريا الخاص فيها في الجينوم
  • 00:02:41
    تبعها فالجين بكتيريا سف
  • 00:02:46
    بثين اوف اين ري تمام اذا هذا المبدا انه
  • 00:02:52
    ليش البكتيريا لها قدره على انها تقطع
  • 00:02:54
    الدي ان تبع الفيروس بينما ما بتقطع نفسها
  • 00:02:58
    نتيجه لوجود
  • 00:03:00
    طيب
  • 00:03:04
    الان الان النوع الاول من الريسكشن انزايم
  • 00:03:09
    ها الانواع اللي احنا تكلمنا فيها هو
  • 00:03:12
    التايب 1 ريستركشن انزايم الكشن
  • 00:03:16
    انزايم انواع النوع الاول له خاصيه بسموها
  • 00:03:21
    نيوكليز
  • 00:03:22
    ومييز اكتيفيتي يعني لها قدره على قص الدي
  • 00:03:26
    ان ايه زائد على انه تقطع ايضا الميث جروب
  • 00:03:30
    هي الريسكشن انزايم التايب 1 في منها تو
  • 00:03:33
    سب يونت بتكون وحدتين متركبين على بعضهم
  • 00:03:36
    عشان يشكلوا ان هذا ريستركشن انزايم اللي
  • 00:03:38
    هو القطعه لازم تمسك على الدي ان ايه
  • 00:03:41
    والقطعه الثانيه اللي هي مسؤوله عن عمليه
  • 00:03:43
    القطع الريسكشن سايت ايش الريسكشن سايت
  • 00:03:46
    ريستركشن سايت هي المنطقه التي يقوم فيها
  • 00:03:50
    الريسكشن سايت بالتعرف على مكان الارتباط
  • 00:03:54
    المكان اللي بيرتبط فيه هو عباره عن 4 على
  • 00:03:57
    س بيس بير المنطقه اللي بيرتبط عليها زائد
  • 00:04:01
    ثمانيه لسته بيس بير او ست لثمانيه بيس
  • 00:04:03
    بير بكون المنفصلات بثمانيه بيس بير ايش
  • 00:04:06
    يعني زي ما نحن شايفين بالصوره يا جماعه
  • 00:04:08
    الخير انه هي مكان دومين ريستركشن انزايم
  • 00:04:12
    بيجي بيرتبط عليه تمام المكان اللي نحنا
  • 00:04:15
    شايفينه بيرتبط على جزئين ومنفصلين بالنص
  • 00:04:19
    يعني في من سته لثمانيه بيس بير في النص
  • 00:04:22
    هي هذ ما بتهمني كثير لكن مكان التعرف هو
  • 00:04:26
    الا a والسي زائد التي والسي والسي والجي
  • 00:04:30
    اللي هي المنطقه في هذه المنطقه يعني
  • 00:04:32
    الريسكشن انزايم عباره عن مكان في في نصه
  • 00:04:38
    6 لثم بيز بير انا مش عارفهم وكانه هدول
  • 00:04:41
    هم اللي بده يكون فيهم مكان
  • 00:04:43
    القطع تمام
  • 00:04:46
    عموما الريسكشن انزايم هذا بده يرتبط على
  • 00:04:50
    موقع بده يكون عباره عن سته لاربعه و يعني
  • 00:04:55
    اربعه سته ا اربعه لسته بيس بير منفصل بست
  • 00:04:59
    الثمانيه في النص بيز بير تمام والشرط
  • 00:05:04
    الاساسي الثاني انه المنطقه اللي بده
  • 00:05:06
    يتعرف عليها اللي هي باللون الاحمر الا a
  • 00:05:09
    والسي بتكون
  • 00:05:10
    ميتد تمام هي الفكره لكن بينما مكان القطع
  • 00:05:15
    ط هذا المكان اللي بتعرف عليه هذا كنا
  • 00:05:17
    المكان بقول فيه انه في ست لثمانيه زبر في
  • 00:05:20
    النص وفي عندي مثيلين جروب على الطرفين
  • 00:05:22
    اللي بتعرف عليه اذا هو هون مسك لكن هل هو
  • 00:05:25
    مكان القطع لا مكان القطع يبعد عن هذا كان
  • 00:05:30
    ب 1000 بيس بير تمام فهذه المنطقه اللي
  • 00:05:34
    برتبط فيها مكان القطع هو 1000 بيس بير
  • 00:05:38
    بعيد عن مكان الارتباط طيب هل هذا بيفيدني
  • 00:05:42
    اتوقع انه في الابحاث لا ليش لانه انا
  • 00:05:47
    ال000 بيس بير مش حاقدر اتوقع وين مكان
  • 00:05:50
    القطع طب انا بيهمني اعرف وين مكان القطع
  • 00:05:52
    زي ما احنا حنشوف في خلال المحاضره الان
  • 00:05:56
    الريسكشن انزايم تايب 2 هو النوع الثاني
  • 00:05:59
    والي بيستخدم اكثر شهره وارتباطا مع
  • 00:06:03
    المختبرات طب
  • 00:06:05
    ليش اولا لانه ما فيش عندي مث جروب
  • 00:06:08
    اكتيفيتي يعني المكان ارتباط مش شرط انه
  • 00:06:11
    في زي زي ريشن انزم تايب 1 مش لازم يكون
  • 00:06:14
    في ميشن عشان يرتبط او يعمل ميثك زي الاول
  • 00:06:19
    زائد انه النقطه الاهم والثانيه انه الكشن
  • 00:06:23
    سيت وال سيت في نفس المكان يعني مكان
  • 00:06:28
    القطع ومكان الطباط نفسه وصلت فهذا المهم
  • 00:06:32
    جدا يعني الان لوس لو مسك لنفرض انه مسك
  • 00:06:35
    الريسكشن انزايم في هذه المنطقه حنلاقي
  • 00:06:38
    انه مكان القص
  • 00:06:39
    هان هذا هذا الشي المهم انا هيك بقدر ادرس
  • 00:06:43
    الصفه اللي ح على سبيل المثال سنب سينجل
  • 00:06:47
    نيوكليد بورزم لما بكون في زي ما احنا
  • 00:06:51
    اكيد عارفين ايش هي السينجل نيوكليد بورزم
  • 00:06:53
    هو الدي ان ايه المختلف باختلاف عن بعضه
  • 00:06:58
    بختلف في نيكل حده احنا بنقدر نكشف عن هذ
  • 00:07:01
    الكلي الوحده من خلال تقنيه مثلا على س
  • 00:07:05
    المثال ركشن انزام في السنب نرجع للسب
  • 00:07:09
    اللي هو التايب تكشن انزايم المكان
  • 00:07:13
    الارتباط رتبط على قطعه من الدي ان ايه و
  • 00:07:15
    بنسميها بنومك ايش يعني بالدرك يعني زي ما
  • 00:07:19
    احنا شايفين الدي ان ايه لو احنا قراناه
  • 00:07:22
    من هذا الاتجاه من اليسار لليمين هو نفسه
  • 00:07:25
    نفسه الدي ان اي لو انا قراته من اليمين
  • 00:07:28
    الى يسار هذا المصطلح بنسميه بايش بنسميه
  • 00:07:33
    بنومك
  • 00:07:36
    بدرك فشرط اساسي في الن انزام تايب 2 لازم
  • 00:07:40
    يكون بنومك عشان يرتبط عليه ومكان القطع
  • 00:07:44
    زي ما قلنا في نفس المكان اللي بكون فييه
  • 00:07:48
    ارتبط الدي ان ايه دايركت ات ين سيت في
  • 00:07:53
    نفس اليند سايت بنلاقي ايه مكان القطع فد
  • 00:07:57
    برتبل سايز رو فهنا احنا بنقدر نتن من
  • 00:08:02
    خلال مكان القطع هذا بقدر نتن قديش حجم
  • 00:08:05
    الامبون اللي حينت معي ومكان القطع
  • 00:08:09
    الريسكشن انزايم تايب 3 هو عباره عن النوع
  • 00:08:11
    الثالث من الريسكشن انزايم واللي هذا
  • 00:08:15
    الموضوع ما بيتطلب يكون بنومك يعني لو
  • 00:08:19
    قرانا هنا من اليسار في سي جي اي لكن لو
  • 00:08:24
    قرانا من الشقه الثانيه اي تي تي فهذا مش
  • 00:08:27
    بنومك وهذا عشان هيك مش شرط فحنا بنسميه
  • 00:08:30
    احنا الكشن سايت سمتري يعني مش بدرك لكن
  • 00:08:36
    الموقع
  • 00:08:37
    القطع قديش بعيد عن اليند ساي بعد ب 24 ال
  • 00:08:43
    26 من تجاه الثلاثه برايم اند فاحنا هي
  • 00:08:48
    مكان برايم اند
  • 00:08:51
    تمام بعد هذا
  • 00:08:54
    الكشن 24 بيز بير حنلاقي مكان القطع في
  • 00:08:59
    منطقه بعيده من ث برايم ان تمام هل له
  • 00:09:04
    قدره انه يقطع مثيز اكتيفيتي اه لانه يبل
  • 00:09:08
    تثيت ان يكت او للدي ان ايه مش مهم طبعا
  • 00:09:14
    في عندي انواع كبيره وعدد كبير جدا من
  • 00:09:17
    الكشن انزايم على الانترنت صارت موجوده
  • 00:09:20
    ومتاحه وهذا الكشن انزام لها خواص معروفه
  • 00:09:25
    بدنا نتعرف على اليه القطع الان الان لما
  • 00:09:29
    هوشن انزم بشكل عام وانا بدي اهتم زي ما
  • 00:09:32
    اتفقنا في المختبرات بنهتم بالتاب 2 ليش
  • 00:09:35
    بنهتم بالتاب 2 لان حكينا ان التايب 2 هو
  • 00:09:38
    اللي بكون مكان القطع هو نفسه مكان
  • 00:09:40
    الارتباط وانا هذا اللي بيهمني في المختبر
  • 00:09:43
    اقدر اتنبا ما هو مكان القطع تعالوا نشوف
  • 00:09:46
    هنا في ريستركشن انزايم اسمه ايكو ار 1
  • 00:09:51
    ايكو ار 1 عشان احنا قلنا في اول محاضره
  • 00:09:55
    انه ريستركشن انزايم بنخلص من اسماء
  • 00:09:58
    البكتيريا اللي احنا بنحصل عليها فهذه
  • 00:10:01
    ايكو اختصار لاش كولاي ار اختصارا
  • 00:10:07
    سترين والنمبر و انه ممكن تكون البكتيريا
  • 00:10:10
    بنست خص منها عدد معين من ركشن انزايم فكو
  • 00:10:15
    ار 1 بصير ار 1 وار 2 وار 3 وهكذا الان
  • 00:10:19
    بالنسبه
  • 00:10:21
    ليكو ار 1 هذا لما بيجي بيمسك الدي ان ايه
  • 00:10:26
    قد احنا بدنا نربط كلامنا كله على الايكو
  • 00:10:29
    ا انا بدي اعطيكم امثله على كذا انزيم
  • 00:10:31
    وكيف بقصه وانواع القطع فايكو ار 1 هنا
  • 00:10:35
    لما انقطع الدي ان ايه عمللي حاجه اسمها
  • 00:10:39
    فايف برايم اوفر هانج او سمى كوسف ان ايش
  • 00:10:44
    يعني كوسف اند واش يعني اوفر هان 5 برايم
  • 00:10:47
    طبعا في ف برايم وفي كمان شوي حنشوف ثلاثه
  • 00:10:50
    برايم ف مهم نعرف ايش الخمس برايم والثلا
  • 00:10:54
    برايم طبعا احنا عارفين ضمنيا انه اي دي
  • 00:10:57
    ان ايه اي دي ان ايه في ال
  • 00:10:59
    لو انا بدي ارسم لو انت شفت دي ان ايه
  • 00:11:02
    مرسوم على ورقه تلقائي بدك تعرف انه
  • 00:11:05
    الفايف برايم دائما على اليسار فوق زي ما
  • 00:11:10
    نحن شايفين اي دي ان ايه مرسوم في اي مكان
  • 00:11:12
    بده يكون فايف برايم بده يبدا في اليسار
  • 00:11:16
    فوق والفايف برايم طبيعي حتنتهي بثلاث
  • 00:11:19
    برايم فهنا لو فايف برايم هذه المنطقه من
  • 00:11:22
    بعد ما تنقص هذا المنطقه بتلاقي هذه اسمها
  • 00:11:24
    اسمها ايش 3 برايم زائد ه ايش بتصير هان
  • 00:11:28
    فايف برايم
  • 00:11:29
    فصار هنا برايم وه بترجع برايم هنا ف
  • 00:11:33
    برايم لا برايم بعدين ف برايم ثانيه بعد
  • 00:11:38
    القطع بترجع برايم انا معني بهذ المفاهيم
  • 00:11:40
    عشان احنا نكون متفقين ايش برايم وث برايم
  • 00:11:44
    اوفر هان نرجع للصوره الاولى بوللي الايكو
  • 00:11:48
    ار 1 لما بيجي بيقطع بيعملي
  • 00:11:51
    كوف او
  • 00:11:53
    بعملي برام اوفر اطلعوا انه اليه القص كيف
  • 00:11:58
    انقص الدي ان ايه من هان زائد الطرف
  • 00:12:01
    الثاني عمل لي اياه طويل وقص الطرف الثاني
  • 00:12:04
    من هذه الجهه طيب مين الجهه اللي طويله
  • 00:12:06
    الان الجهه الطويله اصبحت فايف برايم ولا
  • 00:12:10
    3 برايم تعالوا نتطلع في الجهه هذه طبيعي
  • 00:12:13
    حيكون ثلاثه فهذه الجهه ايش فايف برايم
  • 00:12:17
    فعشان هيك سميناها انه الجهه الطويله
  • 00:12:20
    الجهه الطويله في الدي ان ايه هي عباره عن
  • 00:12:23
    الفايف برايم اوفر هان فايف برايم اوفر
  • 00:12:26
    هان على النقي تعال عشان نصيرنا فاهمين ف
  • 00:12:29
    برايم اوفر هان تعال نفهم الثلاث برايم
  • 00:12:31
    اوفر هان الان الدي ان اي هنا الاصبع وين
  • 00:12:34
    حيكون لو احنا بدنا نرسمها هي حنجي مكان
  • 00:12:36
    القطع من هان وبيجي بعملي الجهه الطويله
  • 00:12:40
    الجهه الطويله اللي هي هاي ايش حتكون
  • 00:12:43
    بتنتهي بفا برايم ولا 3 برايم طال انا
  • 00:12:45
    عندي ف برايم اذا في عندي هنا ايه لاه
  • 00:12:48
    برايم اوفر هان فراس الاصبع الطويل او
  • 00:12:52
    الراس الطرف الطويل هو عباره عن 3 برايم
  • 00:12:56
    عشان هيك سميناها لا برايم اوفر هان طيب
  • 00:13:00
    نيجي ل سميات ايش يعني كوف كوف بالانجليزي
  • 00:13:05
    يعنيك او كوسف يعني طرف واحد طويل والثاني
  • 00:13:10
    قصير فسواء الفا برايم او لا برايم اوفر
  • 00:13:13
    هان على الجهتين حيكون كوسف وهذا الكوف
  • 00:13:17
    يعني ستكي ان او بلزق وهذه الخاصيه
  • 00:13:20
    بتفيدني لو انا بدي اجيب مصدرين من الدي
  • 00:13:23
    ان مختلفات وانا بدي
  • 00:13:25
    اعمله استنساخ واني بدي ادخل صفه في قلب
  • 00:13:29
    صفه يعني لو انا بدي اجيب صفه لون العين
  • 00:13:31
    من بني ادم وبدي
  • 00:13:33
    اجيب شجر الشعر مثلا من بني ادم ثاني
  • 00:13:36
    واحطهم في نفس البني ادم بتلاقيني على
  • 00:13:39
    سبيل المثال بدي استخدم ريستركشن انزايم
  • 00:13:41
    من الانواع الكويف اند عشان نقدر دي ان
  • 00:13:45
    ايه الطرف اللي هنا طبعا لازم يكون مكمل
  • 00:13:49
    للطرف اللي هنا عشان يرتبطوا مع بعض
  • 00:13:52
    ويدخلن في بعض ويصير عندي اخذ للصفه اللي
  • 00:13:55
    انا بدي اياها النوع اللي في النص هذا
  • 00:13:58
    اللي هو السمال او بسموه بلانت اند
  • 00:14:01
    البلانت اند انه الدي ان بينقص بشكل عرضي
  • 00:14:05
    هيك بدون اي ما يعمل اوفر هان وما بيعملي
  • 00:14:10
    كوف تمام فنا
  • 00:14:14
    اوفر الان انا بدي تعرفوا انه انواع القطع
  • 00:14:18
    واليات القطع مش نحفظ انه الايكو ار 1 اه
  • 00:14:22
    بيعمل كوف ما بيعملي مثلا لا مش ه المقصد
  • 00:14:26
    انا المقصد اعرفوه ان زايم بقص باليه
  • 00:14:30
    معينه مع همتنا نعرف ايش هي الاليه اللي
  • 00:14:33
    بقص فيها وانواع الاليات عشان نعرف نستغل
  • 00:14:36
    في المختبر في المختبر بكره لما ننا بكون
  • 00:14:38
    بشتغل في مختبرات الجينتكس ما حدش بيفرض
  • 00:14:41
    علي استعمل هذا وما استعمل هذاك انا الغرض
  • 00:14:44
    تبعي ايش هو هو اللي بيحكم علي ايش استعمل
  • 00:14:48
    الريسكشن انزايم تايب 2 بالمجمل ففي هنا
  • 00:14:51
    واحد الحين ننا طبيعي بدنا نكون شايفين
  • 00:14:53
    الطرف هذا اذا في هنا فايف برايم اوفر
  • 00:14:56
    هانج خمسه برايم اند عفوا فهذه المنطقه
  • 00:15:00
    حتكون انقصت هيك هيك هيك صح هي متفقين اذا
  • 00:15:05
    هنا حيكون في عندي ثلاثه والثلاثه برايم
  • 00:15:08
    هنا وهنا حتكون ايش فايف برايم اوفر هانج
  • 00:15:12
    وهذا اللي بسميه البام اتش 1 البام اتش 1
  • 00:15:16
    عرفنا انه حتى لو انه مش مكتوب خمسه برايم
  • 00:15:19
    وثلاثه برايم نا نعرف ليش فايف برايم اوفر
  • 00:15:22
    هانج تمام في عندي البي جي ال 2 وعطاني
  • 00:15:27
    ايضا فايف برايم اوفر هان هذا مثال ثاني
  • 00:15:29
    ريستركشن انزايم ايضا بيعمل على قطع بيعمل
  • 00:15:33
    لي اوفر هانج وبيعمل لي كوسف اند
  • 00:15:38
    [موسيقى]
  • 00:15:39
    تمام الان ال بدي اياكم تلاحظو مش بس انه
  • 00:15:44
    نتعرف على الريسكشن انزايم تعالوا نتطلع
  • 00:15:47
    انه الجزئيه ها طبعا الفايف برايم الثانيه
  • 00:15:51
    ايش مهم ملاحظين شايفين الجي هاي خلينا
  • 00:15:55
    ناخذ لون ثاني عشان تكونوا انتم عارفين
  • 00:15:57
    ايش اللي انا بدي اياه
  • 00:15:59
    اطلعوا انه الجي برايم الجي نيوكليوتيد
  • 00:16:02
    هذا حتقدر ترتبط ل لو لفت لورا حتيجي
  • 00:16:06
    ترتبط بالضبط كانه هنا يعني الجي هاي ح
  • 00:16:11
    ترتبط مقابلها سي اللي
  • 00:16:14
    هنا تمام
  • 00:16:16
    واي مرتباط لها هيك مع التي والتي هاي ح
  • 00:16:21
    ترتبط مع ال a واخر واحده السي هترتبط مع
  • 00:16:26
    الجي وكانه هذا الجزء اللي في
  • 00:16:31
    هاي الجزء هان مكمل للجزء هذا وهدول
  • 00:16:35
    الاثنين مع بعض بنقدر نستعملهم في
  • 00:16:40
    الاستنساخ
  • 00:16:43
    تمام وعشان هيك هدول الكشن انزايم طالما
  • 00:16:47
    انه هدول الاثنين الانزيمين قصوا كل واحد
  • 00:16:50
    مصدر مختلف واعطوني جزء مكمل للجزء
  • 00:16:54
    المقابل للاوفر هانج سميناه كومبل كوف
  • 00:17:01
    احنا قبل كنا نقول انه انه بقص باليه
  • 00:17:05
    الكوف
  • 00:17:07
    هف صار كبل انه جاهز لانه يعمللي ايش
  • 00:17:11
    خاصيه الارتباط والاستنساخ وادخال الصفتين
  • 00:17:15
    مع بعضهما البعض طيب بالنسبه
  • 00:17:21
    لمنطقه المثال الثاني في عندي بي اس اس اس
  • 00:17:24
    اي ه اعطاني ب رنا
  • 00:17:26
    فاهمين مش نقول يعني كيف اجت الفايف برايم
  • 00:17:31
    وثري برايم اوفر هانج هنا الدي ان ايه في
  • 00:17:34
    المصدرين هذول نون بلندر ميك نون بلندر
  • 00:17:37
    ميك ايش يعني ن بلندر ميك يعني اللي ما
  • 00:17:40
    يقرا من اليمين مش نفس اللي بيقرا من
  • 00:17:43
    الشمال يعني تعال نطلع من هذه الجهه في
  • 00:17:46
    عندي بتبدا بسي تي لكن لو بدي ارجع من
  • 00:17:49
    الشقه الثانيه في جي اي اذا هذه نون بومك
  • 00:17:51
    هذه الميزه الاولى زائد الميزه الثانيه
  • 00:17:54
    انه عمل لي فايف برايم اوفر هانج وفايف
  • 00:17:58
    برايم اوفر هانج
  • 00:17:59
    المنطقه اللي في النص بتكون قد تكون طويله
  • 00:18:02
    طبعا عشان تكون في الصوره في عندي ح حرف
  • 00:18:04
    ان ال ان هو انه نيوكليد مش شرط تكون اي
  • 00:18:09
    او تي او سي او جي يعني يعني قصده يقوللك
  • 00:18:12
    انه ما بيهمني ايش هي نوعيه الاني
  • 00:18:15
    النيوكليد الموجوده
  • 00:18:18
    ف احنا عارفين انه السي والجي والاي والتي
  • 00:18:22
    هدول هم عباره عن الاربع نيوكليدات
  • 00:18:24
    الموجوده في الدي ان ايه والان ان هو حاجه
  • 00:18:26
    انا بدي اتق شو هي مش فهم كثير يعني
  • 00:18:32
    تمام طيب في حاجه الان
  • 00:18:37
    اسمها السمال
  • 00:18:41
    و
  • 00:18:43
    [موسيقى]
  • 00:18:52
    [موسيقى]
  • 00:18:56
    تمام في حاجه مصطلح بنسم الاكيو شزز هذا
  • 00:19:01
    عباره
  • 00:19:02
    عن دي ان ايه زي ما احنا شايفين انه هذا
  • 00:19:05
    الدي ان ايه اللي في هذا ال في هذه
  • 00:19:08
    الجزئيه هو نفسه الدي ان ايه اللي في هذه
  • 00:19:11
    الصوره متفقين لانه هو هذ سي من هنا سي سي
  • 00:19:16
    سي جي جي جي وهنا سي سي سي جي جي جي فنفسه
  • 00:19:22
    بالضبط لكن السمال او الاسم اي 1 قطعوا
  • 00:19:27
    باليه بلانت اند والاكس ام اي قطع نفسه
  • 00:19:33
    لكن مش بلانت اند قطعه ب هنا حتكون خمسه
  • 00:19:38
    اذا هنا ثلاثه اذا هنا خمسه حتكون هذه
  • 00:19:40
    فايف برايم اوفر هانج صح طيب ايش بنسمي
  • 00:19:45
    المصطلح اللي بيطلق
  • 00:19:47
    على الريسكشن انزايم المختلف اللي بيقص
  • 00:19:51
    نفس الدي ان ايه باليتين مختلفتين سميناها
  • 00:19:55
    اكيز زرز كمان مره انه السمال و والاكس ام
  • 00:19:59
    اي قصوا نفس السورس اوف دي ان ايه نفس
  • 00:20:02
    الدي ان ايه هنا وهنا بس كل واحد قصه
  • 00:20:04
    بطريقه مختلفه سميناه بكيز شزر تمام النوع
  • 00:20:09
    الرابع هنا في عندي مثيز سيفيت انزايم
  • 00:20:13
    شايفين هذ الادينين الادينين هذه اللي بده
  • 00:20:17
    يقص عندها الدي ان ايه يشترط انها تكون
  • 00:20:20
    ميتد طالما انه يشترط انها تكون ميث ليتد
  • 00:20:23
    فهنا
  • 00:20:25
    الانزيم لازم يكون
  • 00:20:29
    ميشن
  • 00:20:31
    س فانه لازم يكون ير للمش عشان يصير عمليه
  • 00:20:37
    الص طش بصير لو ما كان
  • 00:20:43
    عنديش النوع الثاني ا هذا عباره عن هذا
  • 00:20:48
    نوع اني مش س لشن هذا
  • 00:20:53
    بصير تمام يعني لو كانت الس زينا شايفين
  • 00:20:57
    ه هتمنع هذا الريسكشن انزايم من القص طب
  • 00:21:01
    اناش استفدت من القصه هذه مره بتقص ومره
  • 00:21:04
    بقص ومره بقص انت بدك تجونا لا مازنكو انا
  • 00:21:07
    بس انا بدي استفيد من هذه الميزه انه انا
  • 00:21:10
    ممكن الطفره تكون جاي عندي في هذه السي
  • 00:21:13
    على سبيل المثال وهذه الطفره بتكون مش انه
  • 00:21:17
    انقلبت السي لجي لا بكون السي صار عليها
  • 00:21:20
    مثلي ششن فانا كيف بدي اكشف عن هذه المثلي
  • 00:21:23
    شن بستعمل في هذا الحال على في هذا الموقع
  • 00:21:26
    انا هذا الريسكشن انزايم حيكون مفيد جدا
  • 00:21:28
    جدا انه يكشف لي عن هذه المثلي شن ويقدر
  • 00:21:32
    يكشف لي عن هذه الطفره لهذا المرض ولهذا
  • 00:21:35
    الشخص فالفكر انه هذه عباره عن انواع
  • 00:21:40
    مختلفه واليات مختلفه من القص انا ممكن
  • 00:21:43
    استعمل كل حده منها على حدا حسب التكنيك
  • 00:21:46
    اللي انا ببحث عنه وحسب الاليه اللي انا
  • 00:21:48
    ببحث فيها تمام طيب احنا عرفنا كل كلامنا
  • 00:21:53
    من الاول ان ساعه بنقول قص طيب مين بدي
  • 00:21:57
    يلزق في حاجه اسمها دي ان ايه لاي جيز
  • 00:22:00
    اللاي جيز هو ال بيعمل لي حاجه اسمها
  • 00:22:05
    ارتباط او تكوين للفوسفو داي استير بوند
  • 00:22:09
    احن عارفين انه الدي ان ايه لما بيرتبط ما
  • 00:22:11
    بين الا a والتي في بين اي نيوكليت دتين
  • 00:22:14
    هنا ما بين الاي والتي والتي والي والي
  • 00:22:17
    والتي هذه بسموها فوسفو داي استر بوند
  • 00:22:20
    بينما انه التي واي بكون رابطتين من
  • 00:22:23
    الهيدروجين بوند بينما السي والجي ثلاث
  • 00:22:27
    روابط من الهيدروجين بوند هذه الثلاث
  • 00:22:29
    روابط من الهيدروجين
  • 00:22:34
    بوند بتختلف عن الفوسفو داستر بوند فلاجز
  • 00:22:38
    هو عباره عن انزيم بقدر يربط من مين التي
  • 00:22:41
    مع الجي والي مع السي من خلال ارتباط
  • 00:22:44
    للفوسفو استر طب لو كان عندي كوسف اند
  • 00:22:47
    برضه بعملي فوسفو استر بوند من الجهه
  • 00:22:50
    الثانيه جيد وهكذا بالنسبه للثالث من خلال
  • 00:22:54
    انه بيعمل لي فوسفو بوند الجز هو عباره عن
  • 00:22:59
    انزيم بيعمل عكس
  • 00:23:01
    مين النيوكليز النيوكليز بقص الجز بربط
  • 00:23:06
    طبعا هذا الكلام كله كان علم قديم الان
  • 00:23:10
    اصبح العلم اوسع واكبر من هيك انه صار
  • 00:23:13
    عندي على الدي ان ايه على على الانترنت
  • 00:23:16
    ممكن انا على موقع اسمه زي بب مد احنا
  • 00:23:19
    بنروح بنحط عليه بنعمل ريسيرش وبندخل
  • 00:23:22
    على الموقع الالكتروني ومن خلاله ما علينا
  • 00:23:26
    الا انه نضيف كيف يتم ذلك على الانترنت
  • 00:23:32
    بشكل مباشر هنا بنكتب مثلا على س المثال
  • 00:23:35
    اسم الجين الجين اللي انا بدي اياه وببحث
  • 00:23:38
    عنه انترنت سيرش بروح
  • 00:23:41
    بيعطيني الدي ان ايه بيجيب لي الشريط الدي
  • 00:23:44
    ان اي كامل بالكامل بجبلي زي نسخ لص انا
  • 00:23:48
    بكون عاد بدي ابحث عن عن مثلا طفره معينه
  • 00:23:52
    او شيء معين مثلا بدي اعطيه مثلا من عند
  • 00:23:54
    هذا الموقع واقول له نسخ لعند على سبيل
  • 00:23:58
    المثال عندي ه مثلا انا ش بكون استفدت بعط
  • 00:24:02
    الدي بعمله نسخ وبروح على جست سايت اسمه
  • 00:24:07
    ويب كتر و كتر هذا بروح
  • 00:24:09
    بعطيه الدي ان اي سورس تمام بدخله اياه او
  • 00:24:14
    بكتب لله كتاب حطكم اللينك للي حابب يعني
  • 00:24:18
    يستضيف اكثر في المعلومات بيعطيك الدي ان
  • 00:24:21
    اي اللي انا نسخته اياه هي موجود هي وحده
  • 00:24:25
    وهاي الثانيه والثالثه الان بيجي بقول لي
  • 00:24:29
    ما هي الانزيمات اللي بامكانها تقص هذا
  • 00:24:33
    الدي ان ايه ما هي الانزيمات اللي ممكن
  • 00:24:36
    تقص في هذا الدي ان ايه فهو على زمل هي
  • 00:24:38
    جايب لي مثلا الاي تي 1 ققص مرتين
  • 00:24:41
    والمواقع اللي بقص فيها من 775 لعند
  • 00:24:45
    1593 طبعا هذه الارقام وين موجوده اللي هي
  • 00:24:49
    مناطق السترك شن سايت اللي حقص طبعا احنا
  • 00:24:52
    عارفين في هذا الكلام انه شايفين ننا هنا
  • 00:24:55
    الدي ان ايه من هنا هي هذا تعتبر الا a
  • 00:24:57
    رقم واحد
  • 00:24:58
    ا لاه وهكذا سبعه لعند هنا من واحد ل 75
  • 00:25:04
    ببير كمل تكميل هيهم عننا يا ايمن عننا
  • 00:25:07
    راحوا ان شاء الله
  • 00:25:10
    اي واحد لعند 75 هدول عباره عن اول 75 بيس
  • 00:25:15
    بير بعدين كمل تكميل من 76 ل 150 من 151 ل
  • 00:25:19
    152 وهكذا لعند 300 فهنا بنكون عدد مناطق
  • 00:25:24
    كل انزيم اكم مره بقص زائد عدد ال
  • 00:25:30
    البوزيشن للوشن سايت اللي بقص فيه تمام
  • 00:25:33
    الان على سبيل المثال لو انا اخذت هذا
  • 00:25:36
    الريسكشن انزايم اللي اسمه بام ملون لي
  • 00:25:39
    ايا هي بالاحمر وماكن القطع تبعته كم مره
  • 00:25:41
    بقص اربع مرات والبوز شن اللي بيعمل لي
  • 00:25:44
    اياها او الاحجام الدي ان ايه اللي بيعمل
  • 00:25:47
    لي اياها بيعطيني 97 و 224 هذا اليكشن ساي
  • 00:25:52
    تعال نشوف هي ملوها بالاحمر هي البام
  • 00:25:55
    اتش1 هي البام اتش بقص قلنا كم مره اربع
  • 00:26:00
    مرات الاول اياهم بالاحمر واحد وهي اثنين
  • 00:26:05
    هي اثنتين وهي كمان هنا ثلاثه تمام اربعه
  • 00:26:11
    عموما ريكشن سايت ها بيعطيني اياها بحجم
  • 00:26:15
    انا يعني مش بدي تعمقوا كثير لكن بس بدي
  • 00:26:17
    على الاقل تكونوا فاهمين ايش يعني ريكشن
  • 00:26:20
    سايت وايش يعني ريكشن انزايم وكيف بقص
  • 00:26:22
    وليش بقص بدي اياكم الان تبدا ندخل مع بعض
  • 00:26:26
    في جزء
  • 00:26:30
    البشن
  • 00:26:35
    [موسيقى]
  • 00:26:49
    تكنيك
  • 00:26:53
    طيب يا جماعه الخير تعالوا نفهم مع بعض او
  • 00:26:58
    او خلينا يعني قبل ما ننطلق بدي نتكلم
  • 00:27:01
    بشكل سريع ايش اهميه الكشن انزايم هذا
  • 00:27:05
    وليش الكشن انزام عملناه يعني ايش استفدنا
  • 00:27:11
    منه ايش استفدنا من الكشن
  • 00:27:20
    انزم في شي بسموه الكشن انم ماب هذه جزئيه
  • 00:27:26
    اضافيه ان شاء الله حشرح لكم اياها بشكل
  • 00:27:29
    منفصل لحالها او بدي ا صرنا واصلين لعندها
  • 00:27:34
    مره واحده ببقى اقول لكم اياها الكشن
  • 00:27:36
    انزايم
  • 00:27:38
    مابين ممكن من خلال الريسكشن انزايم مش بس
  • 00:27:41
    وظيفته احنا هيك حتى الان فهمنا انه
  • 00:27:43
    ريستركشن انزايم بقص او بصش وكيف انواع
  • 00:27:47
    القص واليه القص حسب استخدامنا
  • 00:27:52
    لتكنيك قبل ما ندخل لمرحله او عنوان اللي
  • 00:27:56
    هو البرشن تكنيك
  • 00:27:58
    بدي
  • 00:28:01
    منكم تعرفوا لي حاجه اسمها الكشن انزم
  • 00:28:08
    مابين نشاط انا بعتبره بالنسبه للي ح بعتو
  • 00:28:11
    لي اياه في الاجابه
  • 00:28:14
    على
  • 00:28:16
    التليجرام الكشن انزام مابين كيف بنستفيد
  • 00:28:21
    من عمليه الكشن انزم
  • 00:28:25
    فيكشن انزم مابين
  • 00:28:29
    جيد وان شاء الله ببقى
  • 00:28:32
    اعطيكم الاجابه لما ان شاء الله هيك في
  • 00:28:37
    المستقبل البشن تكنيك اليشن لما نسمع
  • 00:28:43
    مصطلح اسمه
  • 00:28:44
    يشن مهم تعرفوا انه في عندي مصدرين من
  • 00:28:48
    الدي ان ايه دخل مع بعضهن عمل
  • 00:28:52
    هاش يعني مصدرين من الدي ان ايه ارتبط مع
  • 00:28:56
    بعض كان كتري هذا شي اسمه يشن يشن انواعه
  • 00:29:01
    ممكن يكون سا بلوت نور بوت وست بلوت وساو
  • 00:29:07
    وسترن
  • 00:29:09
    بلوت ساوث بلوت هذا مشهور جدا للدي ان ايه
  • 00:29:14
    ومن خلال البروب تبعه اللي بده يرتبط عليه
  • 00:29:18
    هو عباره عن نيوكل اسد دي ان ايه زيه الار
  • 00:29:22
    ان
  • 00:29:25
    بستعملو فلو واحد سالني قالش بستعمله اقول
  • 00:29:28
    له احنا بنكشف من خلاله على ار ان اي
  • 00:29:31
    بواسطه بروب بيرتبط على هذا الار ان ايه
  • 00:29:34
    هذا البروب مصنوع من نيوكل اسد ولكن ار ان
  • 00:29:38
    ايه لازم يكون اذا الدي ان ايه حيرت بط
  • 00:29:40
    عليه دي ان ايه واذا ار ان ايه حيرت بط
  • 00:29:42
    عليه ار ان ايه طب انا اذا بدي ابحث عن دي
  • 00:29:44
    ان ايه اذا انا طبيعي في هذا الشغل حاكون
  • 00:29:47
    بكشف عن مين عن جين ستركتشر ببحث عن دي ان
  • 00:29:51
    ايه لكن في ار ان ايه لما بكون في النور
  • 00:29:54
    بلوت ببحث ف عن اذا انا بدرس ترانسكربشن
  • 00:29:56
    ستركشر او بدرس في جين اكسبريشن زي بروتين
  • 00:30:00
    زي انزيم زي الى ما
  • 00:30:03
    اخره الوسترن بلود هو عباره عن اليه ثالثه
  • 00:30:06
    بنكشف فيها عن البروتين والسا ويست طبعا
  • 00:30:10
    هذه تقنيات قديمه شويه لكن الوسترن بلو
  • 00:30:14
    انا شخصيا اشتغلتها بايدي في دراس الستير
  • 00:30:17
    كانت في دراستنا
  • 00:30:18
    للبروتين المسؤوله عن الابتوس في عمليه
  • 00:30:23
    الكانسر في الجينات لما نحن بندرس انها
  • 00:30:26
    ماتت او ماتتش كنا نبحث عن البروتينات
  • 00:30:28
    المسؤوله عن موت الخليه زي بروتينات مثلا
  • 00:30:33
    البي 53 او البارب او بيزز احنا بندرس
  • 00:30:38
    بروتين فاحنا في هذه الحاله بدنا نستعمل
  • 00:30:40
    تقنيه الوسترن بلوت
  • 00:30:45
    تمام كيف بنعمل الساوث ن بلوت طبعا نسيت
  • 00:30:49
    اخبركم صحيح بالنسبه ل ساوثرن بلوت اه
  • 00:30:54
    الساوث ن بلوت كتقني اللي هي بتستعمل في
  • 00:30:57
    دراسه الدي ان ايه اصبحت سموها على اسم
  • 00:31:01
    العالم تبعها والنورتن بلوت اللي هي
  • 00:31:04
    بتستعمل للار ان ايه اصبحت طريقه قديمه
  • 00:31:07
    جدا وبطلوا يستعملوها كثير لانه صار في
  • 00:31:09
    عندي افضل منها واسرع منها بكثير اللي هي
  • 00:31:12
    النورث بلوت زي تقنيه البي سي ار على سبيل
  • 00:31:16
    المثال البي سي ار ما هو اصلا احنا يمكن
  • 00:31:19
    سبق شرحت لكم قبل هيك انه البي سي ار هو
  • 00:31:22
    عباره عن دي ان ايه بصير له امبلي كيشن من
  • 00:31:25
    خلال بروب انا اذا بدي اعمل امبلي لار اي
  • 00:31:28
    بحط له برايمر البرايمر بيرتبط عليه
  • 00:31:30
    وبيعمل
  • 00:31:31
    لي استنساخ واستكثر وبنكر كميته فطالما
  • 00:31:35
    احنا بنتكلم عن نورثرن بلوت اذا ننا
  • 00:31:37
    بنتكلم على دايزي
  • 00:31:41
    شن كيف الان اليه البريزي شن كيف يحدث هذا
  • 00:31:45
    البريزي شن زي ما احنا اتفقنا هذا البريزي
  • 00:31:47
    شن من خلال العالم اللي او اللي اكتشفه من
  • 00:31:51
    خلال او طوره من
  • 00:31:53
    خلال الا دواين ساوثرن وسمينا الطريق على
  • 00:31:57
    اسمه ساوثرن بلوت ساوثرن بلوت بتبدا
  • 00:32:01
    العمليه من خلال داجن للدي ان ايه بعمل
  • 00:32:05
    معالجه الدي ان ايه وبنفرد
  • 00:32:07
    على زي ما نحنا شايفين على اجروز جل هذا
  • 00:32:12
    الاجاروز جل بدنا نفصله من خلال
  • 00:32:15
    الكتروفوريسيس فالجل الكتروفوريسيس هو ب
  • 00:32:20
    عمليه مصطلح
  • 00:32:22
    بيسمى فصل الدي ان ايه عن بعضه تبعا لحجم
  • 00:32:28
    ولا وكل ما كان الحجم اقل فبش اسرع زي ما
  • 00:32:32
    نحن شايفين في عندي
  • 00:32:35
    هنا الويلز هذه الويل اللي بنحط فيها الدي
  • 00:32:39
    ان ايه احنا بنحط في هذه الشحنه عارفين ان
  • 00:32:41
    الدي ان ايه شحنته سالب فنحنا بنحط هنا في
  • 00:32:44
    التيار الكهربائي هنا الشحنه الموجبه وهنا
  • 00:32:47
    الشحنه السالبه فبالتالي انه الدي ان ايه
  • 00:32:49
    بينتقل من السالب الى الموجب بهذا الاتجاه
  • 00:32:52
    ثم الحجم لما بكون احجام مختلفه من الدي
  • 00:32:56
    ان ايه في نفس السامبل الفصل بم بناء على
  • 00:33:00
    السايز وبناء على التارج في نفس الوقت
  • 00:33:04
    فساي الاصغر هو اللي بيمشي اسرع والسايز
  • 00:33:07
    الاقل او الاكبر بضل في المناطق الاوليه
  • 00:33:10
    وهكذا احنا بنقدر نفصل الدي ان اي سورس
  • 00:33:13
    المختلف تبعا لل
  • 00:33:16
    السيز تمام
  • 00:33:19
    الان المرحله عندي بكون عندي
  • 00:33:24
    الكلاشن مساله البلوت ايش يعني بلوتو يعني
  • 00:33:28
    طباعه عشان تكون بالصوره بلوت كبلت مصطلح
  • 00:33:31
    بلوت يعني طباعه طيب طباعه ايش الان انا
  • 00:33:33
    الدي ان اي لما انا فصلته فصلته فيجيل ظله
  • 00:33:36
    في طبقه هلاميه من الاجاروز جيل هذا
  • 00:33:39
    الاجاروز جيل ما بينفع نخليه في اجروز جيل
  • 00:33:42
    لفتره طويله بتحملش يعني دول ساعات
  • 00:33:44
    بينشفوا خلص والدي ان ايه اللي فصلته بروح
  • 00:33:47
    مره واحده فانا مهمتي الان هذا الباند
  • 00:33:51
    اللي موجوده في الجلد بدي انقلها على شي
  • 00:33:54
    اسمه نيتروسليلوز ممبرين هذا البيبر عباره
  • 00:33:57
    عن
  • 00:33:59
    والبيبر فوق هذه عباره عن ورقه بسموها بوت
  • 00:34:02
    بيبر بتساعد في شفط الدي ان ايه من الجل
  • 00:34:07
    للنز ممبرين والنيترو هذا زي ورق زي ورق
  • 00:34:11
    الفتر يعني ورق متماسك وقوي وصلب ونوز
  • 00:34:17
    ممبرين حتفظ على الدي ان بتجفف فيه وبضل
  • 00:34:20
    احنا محتفظين بشكل الدي ان ايه في هذا
  • 00:34:23
    النوز
  • 00:34:24
    فلتر تمام
  • 00:34:28
    بعد هيك ما احنا بنحط المرحله الاولى قلنا
  • 00:34:31
    حطينا الدي ان ايه فصلناه وبعدين عملناه
  • 00:34:34
    في الج الكترو فييسس خليناه يفصل في الدي
  • 00:34:37
    ان ايه وبعدين نقلناه من الجل للنترو سوز
  • 00:34:40
    ممبرين الان بصير معالجتنا كلها على
  • 00:34:43
    النيتروز ممبرين خلص الجل بنرميه وبناخذ
  • 00:34:45
    النيتروز ممبرين اللي هو الورقه الصفراء
  • 00:34:47
    ها بنحطها هنا وبنبدا نعمل دراسه الجين
  • 00:34:52
    اللي انا ببحث عنه من خلال بعد ما صار
  • 00:34:55
    الدي ان ايه مفصول زي ما احنا شايفين
  • 00:35:00
    زي ما احنا شايفين انا عندي القطعه
  • 00:35:02
    الحمراء ها عباره عن السينجل ستران دي ان
  • 00:35:04
    ايه بروب طبعا البروب احنا اتفقنا اذا كان
  • 00:35:07
    الدي ان ايه انا ببحث عن دي ان ايه لازم
  • 00:35:10
    يكون البروب ايضا دي ان ايه لانه الدي ان
  • 00:35:12
    ايه مش هيرتبط على الار ان اي لانه احنا
  • 00:35:15
    عارفين في الدي ان اي الا a بترتبط مع تي
  • 00:35:18
    بينما الار ان اي الا a بترتبط
  • 00:35:21
    مع عفوا التي بترتبط مع اليو بدلا من الاي
  • 00:35:28
    السؤال اللي بقول الان الدي ان ايه لما
  • 00:35:31
    انا بدي اتعرف عليه ب اجي احط انا هنا
  • 00:35:34
    البروب فانا بعد ما اجيب النيتو سز ممبرين
  • 00:35:36
    بدي اضيف عليه البروب على اساس يبحث عن
  • 00:35:39
    الهدف تبعه ويرتبط عليه طيب متى ما ارتبط
  • 00:35:43
    البروب انا لازم اعمل عمليات اخرى خاصه
  • 00:35:46
    بالوش للمنطقه اللي البروب اللي م ارتبط
  • 00:35:49
    طبعا اناط البروب وبعدين بعمل وش عشان ي
  • 00:35:54
    يعمل ازاله
  • 00:35:55
    للاكسس بروب عشان ما يعملي ارتيفاكت وبعد
  • 00:35:59
    هيك بروح بناخذ النيتو سز ممبرين بعد ما
  • 00:36:02
    نعمله بناخذ النيترو سز ممبرين بعرضه لويف
  • 00:36:07
    لينث او بعرضه لاشعه الراديو لانه هذا زي
  • 00:36:10
    زي الفيلم الافلام يعني الافلام ايام زمان
  • 00:36:14
    كانت الصوره تطلع ابيض واسود نتيجه انه في
  • 00:36:16
    فيلم اذا بتتذكرو يمكن مر عليكم
  • 00:36:19
    اي الفيلم بيكون عباره عن راديو اكتف
  • 00:36:22
    ماتيريال وبتعرض مجرد ما انه يتعوض للضوء
  • 00:36:25
    بنحرق ففي مكان حرق هي مكان اللي بينتج
  • 00:36:28
    بكون من هذا
  • 00:36:31
    البروم هنا في الدي
  • 00:36:34
    انور انواع مبرين هو ع هو عباره عن احد
  • 00:36:39
    انواع
  • 00:36:42
    الكت هيدروفوبيك ايش يعني هيدروك
  • 00:36:45
    هيدروفوبيك يعني محب لمين للشحنات
  • 00:36:49
    الكهربائيه هذا الروز ممبرين في شحنات
  • 00:36:53
    موجبه في تركيبته بتساعد على ارتباط
  • 00:36:56
    المركبات اللي بتحمل شحنه سالبه
  • 00:37:01
    فكون هذا نيترو سلولوز زائد انه ريفيوز
  • 00:37:04
    يترو سلولوز وانواع ايضا النيلون
  • 00:37:08
    الكتروستاتيك تمام اللي هي مش هيدروفوبيك
  • 00:37:11
    الكتروستاتيك فقط بتكون موديلي
  • 00:37:14
    تشارج نترون نايلون وبتكون بوزيتيف لي
  • 00:37:18
    تشارج
  • 00:37:19
    نايلون طبعا سواء كانت نيتروسليلوز او
  • 00:37:22
    نيلون او الى ما اخره كلهن الهدف هو واحد
  • 00:37:26
    انه نطبع الدي ان ايه
  • 00:37:28
    من الجل لنتوز مبرين الان انا بدي اقوللكم
  • 00:37:32
    بعض التكنيك مستعمله في نقل الدي ان ايه
  • 00:37:35
    من الجل للنسز مبرين هذه الطريقه بسموها
  • 00:37:39
    كبيل ترانسفير وهذه الطريقه سهله وبسيطه
  • 00:37:43
    لكن بتاخذ وقت تعالوا نفكر مع بعض كيف
  • 00:37:46
    يمكننا نقل الدي ان ايه من الجل
  • 00:37:49
    للنز ومهم جدا نكون عارفين الترتيب تبع
  • 00:37:52
    الاشياء اللي موجوده هنا لنفرض انه في
  • 00:37:55
    عندي هنا محلول اللي هو البفر وهذا المبحل
  • 00:37:58
    حطيت فيه اوراق زي
  • 00:38:01
    تقريبا ورق ورق عادي يعني بس هذا يعني
  • 00:38:04
    الهدف منه انه قعد الجل عليه فوقه بعدين
  • 00:38:07
    احط النيترو سليلوز فوقهم ثم اضيف اخر
  • 00:38:11
    حاجه كمان مجموعه ثانيه من الورق عشان
  • 00:38:12
    تعمل لي كومبري تعمل لي بريشر على الجل
  • 00:38:16
    وتفرض على الدي ان ايه انه يلزق منيح منيح
  • 00:38:19
    بالنيت سز ممبرين الحين ه لزقنا بالضغط
  • 00:38:22
    لكن ايش اللي ح يجبر الدي ان ايه ينتقل
  • 00:38:24
    لفوق انه البفر بالطريقه الازمات بالازم
  • 00:38:29
    لاريه بينتقل بالشعيرات الصغيره اللي
  • 00:38:32
    موجوده بالبيبر وخاصيه الاسموزيه حينت قل
  • 00:38:36
    بالاتجاه الاعلى الان النيترو سلاز ممبرين
  • 00:38:39
    فوق الجل فالجل طبيعي الدي ان ايه وهو
  • 00:38:41
    طالع لفوق حخبي في النيتروز ممبرين فكل
  • 00:38:44
    مكان حيجي قباله الطبعه للباند فمجرد ما
  • 00:38:49
    نرفع النيتروز ممبرين حنلاقي الدي ان طباع
  • 00:38:52
    نسخ لصق عن ما هو منسوخا على
  • 00:38:56
    الجل طيب الطريقه الثانيه بسموها الكترو
  • 00:38:59
    فيليك ترانسفير يعني حدخل فيها كهرباء من
  • 00:39:02
    خطر الكترو فهي الكترو فيليك ترانسفير في
  • 00:39:05
    انا عندي اي جاي في عندي سوليد سبورت ماشي
  • 00:39:09
    في القاعده بعدين في انا عندي هنا قطعه من
  • 00:39:12
    الجلاس بليت يعني بعدين في عندي شحنه مصدر
  • 00:39:18
    تيار حيروح للسالب وفي عندي فوق على اخر
  • 00:39:21
    مصدر للتيار الموجب لكن نفس المساله اللي
  • 00:39:25
    في الاول حطينا هنا قطعه الجل ه زي ما نحن
  • 00:39:27
    شايفينها وفوقها النيترو سلوز ممبرين بس
  • 00:39:31
    نحن زي ما نحن متفقين هنا ممنوع نقلب
  • 00:39:33
    الاقطاب الموجب بالسالب لازم نعرف انه
  • 00:39:35
    الدي ان ايه سالب صح فلازم يكون فوق هو
  • 00:39:38
    الموجب هييه راح الموجب وهذا المهم والا
  • 00:39:41
    الدي ان ايه مش حيطلع مستحيل الدي ان ايه
  • 00:39:44
    يطلع من الجل للنترو سوز مبرين اذا كان
  • 00:39:47
    اللي فوق سالب لانه يصير الدي ان ايه سالب
  • 00:39:51
    والقطب اللي فوق سالب حيصير تنافر فبدل ما
  • 00:39:53
    يطلع الد لفوق بينزل لتحت فما استفدنا اي
  • 00:39:55
    حاجه مطلقا هنا احنا اجبرنا على الدي ان
  • 00:39:59
    ايه يطلع من الجل لل نيتروسليلوز ولكن مش
  • 00:40:01
    بطريقه الكبليري بطريقه الشحنات
  • 00:40:04
    الكهربائيه
  • 00:40:10
    بالالكترونات عفوا بسموها الفاكيوم
  • 00:40:13
    ترانسفير ايش يعني فاكيوم ترانسفير طالما
  • 00:40:16
    انه انا بدي الفاكيوم شفط حاجه شفط لتحت
  • 00:40:21
    بخلي السوائل تيجي من فوق لتحت فهذه المره
  • 00:40:25
    كل م ننا كنا نحط ال الجل والنيترو سلوز
  • 00:40:29
    فوق هذه المره العكس ليش لانه الدي ان ايه
  • 00:40:31
    بده ينزل من الجل لتحت فلازم احط
  • 00:40:34
    النيتروسليلوز تحت الجل وهكذا انا بكون
  • 00:40:37
    نقلت الدي ان ايه من الجل للنترو سليلوز
  • 00:40:40
    ممبرين طيب نيجي لعنوان اللي هو الكليك
  • 00:40:45
    اسد هايبري ازي شن عمليه الهايبري ازي ششن
  • 00:40:47
    هي عباره عن العمليه اللي بتكون فيها زي
  • 00:40:52
    ما اتفقنا ارتباط الدي ان ايه بالدي ان
  • 00:40:54
    ايه او الار ان ايه بالار ان ايه او ار ان
  • 00:40:57
    اي بالدي ان ايه طيب حنتكلم في تفاصيلها
  • 00:41:00
    طبعا كل هذه عباره عن ريشن زي ما اتفقنا
  • 00:41:03
    ولازم يكون فيها البروب سينل ستران نيكل
  • 00:41:07
    اسد مكي كان بي دبل
  • 00:41:09
    سترد او
  • 00:41:11
    داز ذ ذا تو سينجل ستراند نيكل اسد الدي
  • 00:41:16
    ان مع الدي ان وار وهكذا لازم يشترط
  • 00:41:19
    اشتراط اساسي على اساس يصير
  • 00:41:22
    عمليه اليشن شرط مهم جدا يكون عندي الدي
  • 00:41:27
    ان اي كنتري ايش يعني كنتري يعني متطابق
  • 00:41:31
    او متكامل يعني لازم الا يكون قبلها تي
  • 00:41:35
    والسي قبالها ج والا مش حيصير في ارتباط
  • 00:41:38
    ومش حيصير عمليه يشن فالشرط الاساسي لحدوث
  • 00:41:42
    البشن يكون الدي ان كت زي ما احنا شايفين
  • 00:41:46
    عندي دي ان
  • 00:41:49
    من وفي
  • 00:41:51
    عندي ان الثاني وهكذا انا الان في عندي ه
  • 00:41:56
    اله انه بيعمل عمليه فك للدي ان ايه يعني
  • 00:42:01
    الدي ان ايه بيفتح عن بعضه بدل ما ه
  • 00:42:03
    سلسلتين دبل ستران حيصير السلسلتين سينجل
  • 00:42:06
    ستراند فال السلسلتين عملنا لهم حاجه
  • 00:42:09
    اسمها ديوريشن
  • 00:42:12
    عمليه ديتشن ها اليشن لو انا بدي ارجعهم
  • 00:42:16
    يربطهم ثاني بسموها العمليه عمليه النيلين
  • 00:42:20
    تمام اليلين هي عمليه عكس اليشن اليشن فك
  • 00:42:25
    للدي ان ايه والانين ارتباط لدي ان اي
  • 00:42:28
    والعامل المساعد هو عباره عن حراره حراره
  • 00:42:31
    مع مين مع اوش الاش شحنته سالب فهو بساعد
  • 00:42:36
    على انه الدي ان ايه
  • 00:42:38
    يصير يفك يصير ديشن فهي عمليه الريش
  • 00:42:44
    بعطيها بعض العوامل المساعده برجع الدي ان
  • 00:42:47
    لدبل ران والهدف من السلايد نفهم الفرق ما
  • 00:42:51
    بينشن مع الين
  • 00:43:00
    الحراره الملازمه اللي لازمه لتحويل الدي
  • 00:43:03
    ان ايه
  • 00:43:08
    منيور مصطلح ح نطلق عليه اسم الملت تبر
  • 00:43:13
    المب هي درجه الحراره الملائمه واللي
  • 00:43:17
    لازمه لتخلي الدي ان ايه من دبل ستر لسل ر
  • 00:43:22
    يعني في البدايه ان
  • 00:43:24
    بكون مع الحراره ما نزود الحراره بنلاقي
  • 00:43:29
    انه الدي ان ايه بطل ديبل ستراند فصار
  • 00:43:31
    يتحول لسنجل ستراند سنجل ستراند لحد في
  • 00:43:34
    اخر حاجه حيصير كل الدي ان ايه سنجل
  • 00:43:37
    ستراند ففي عندي درجه حراره في النص
  • 00:43:39
    بنسميها الملتين تمبرتشر تي ام هي الحراره
  • 00:43:42
    اللي عندها 50% من الدي ان ايه دبل ستراند
  • 00:43:47
    و 50% سنجل ستراند يعني لو واحد قال لي ما
  • 00:43:51
    هو تعريف الملتين تمبرتشر او هي عباره عن
  • 00:43:55
    الحراره اللي بتخلي عندها 50% من النيكل
  • 00:43:59
    اسد هايبدا هابيز ونصه كومبنت ستراند ايش
  • 00:44:03
    يعني نصه هايبدا يعني نص دبل ستراند
  • 00:44:06
    ونصه سينجل
  • 00:44:13
    [موسيقى]
  • 00:44:14
    ستراند ما هو الملتين تمبرتشر والبزي شن
  • 00:44:18
    طبعا في عندي عوامل بتساعد على الملتين
  • 00:44:21
    تمبرتشر وحدوث هذه عمليه البريزي شن
  • 00:44:25
    الملتين تمبرتشر عشان نحسب في عندي رقم
  • 00:44:28
    ثابت اسمه
  • 00:44:29
    69.3 درجه مئويه زائد
  • 00:44:34
    1.4 ضرب الجي والسي كونتنت عشان انا احسب
  • 00:44:40
    التي ام لاي دي ان اي بيهمني اعرف حاجه
  • 00:44:45
    اسمها السي والجي كونتنت بيرسنج وهذا كانه
  • 00:44:49
    بيعني لي
  • 00:44:50
    انه كلما
  • 00:44:53
    زاد نسبه السي والجي برسنتج في الدي ان اي
  • 00:44:57
    اللي انا ببحث فيه قاعد كلما زادت الملتين
  • 00:45:01
    تمبرتشر زادت درجه الحراره الكافيه لفك
  • 00:45:05
    هذا الدي ان ايه عن بعضه طب ليش ننا
  • 00:45:07
    عارفين انه السي والجي في بينهم ثلاث
  • 00:45:10
    روابط هيدروجين بوند بينما الاي والتي
  • 00:45:13
    رابطتين هيدروجين التين تمام فكلما زادت
  • 00:45:16
    العلاقه طبعا هذا الكلام في المعادله هنا
  • 00:45:19
    ثابت اذا وفقط اذا اذا كان الدي ان ايه
  • 00:45:22
    موجود وذاوت سولت يعني محلول ما فيش في
  • 00:45:27
    املاح فيش فيه املاح يعني كان بفر مثلا زي
  • 00:45:31
    الست وتر على سبيل المثال اللي بعيد عن اي
  • 00:45:35
    مصدر من مصادر الاملاح
Etiquetas
  • restriction enzymes
  • nucleases
  • DNA cutting
  • genetic engineering
  • Type I enzymes
  • Type II enzymes
  • Type III enzymes
  • methylation
  • cloning
  • melting temperature