Desinfección de explantes para el cultivo in vitro

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https://www.youtube.com/watch?v=uDYfr-Gu33w

Resumo

TLDREl video explica un protocolo básico para la desinfección de explantes destinados al cultivo in vitro. Para iniciar, se debe seleccionar la muestra vegetal que podría ser hojas, tallos, semillas, frutos, yemas o meristemos. La elección del explante depende del objetivo que se busque, siendo organogénesis, proliferación de brotes o embriogénesis somática. Como parte del procedimiento, se retiran las hojas del tallo y se realiza un corte en secciones para facilitar la desinfección profunda. En el proceso se emplea agua corriente mezclada con detergente comercial para eliminar sólidos. Posteriormente, se utilizan soluciones de etanol al 70% y de hipoclorito de sodio en concentraciones del 1% al 3%. Además, pueden añadirse agentes tensoactivos como Twin 20 o Triton para mejorar la eficacia. Finalmente, el explante se lava con agua destilada estéril varias veces para eliminar residuos de los desinfectantes, resultando en un material listo para el cultivo in vitro.

Conclusões

  • 🌿 El video se centra en la desinfección de explantes para cultivo in vitro.
  • 🧼 Se utiliza agua y detergente para limpiar los explantes.
  • 🍶 El etanol al 70% es clave en el proceso de desinfección.
  • 🧴 El hipoclorito de sodio se utiliza después del etanol.
  • 🔬 Agentes tensoactivos como Twin 20 mejoran la desinfección.
  • 🚿 Se realizan lavados con agua destilada tras cada solución química.
  • 📋 La elección del explante depende del objetivo del cultivo.
  • 💡 Se recomiendan antibióticos solo en casos excepcionales.
  • 🧪 Protocolo varía según tamaño y origen del explante.
  • ✅ Explantes desinfectados están listos para el cultivo.

Linha do tempo

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    Este video explica cómo desinfectar explantes para el cultivo in vitro. Comienza describiendo que los explantes pueden ser hojas, tallos, semillas, frutos o meristemos, dependiendo del objetivo: organogénesis, proliferación de brotes o embriogénesis somática. Luego, presenta un protocolo básico, comenzando con la eliminación de hojas y corte en secciones del tallo, seguido por el lavado con agua. Se usa detergente al 1% de 10 a 30 minutos y se realizan tres lavados con agua destilada estéril entre cada cambio de solución desinfectante. También se utilizan etanol al 70% y hipoclorito de sodio (1-3%). En casos excepcionales, se pueden añadir sustancias antibióticas y/o antimicóticas. Tensoactivos como Twin 20 o tritón también son recomendados. Finalmente, los explantes quedan listos para el cultivo in vitro.

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Perguntas frequentes

  • ¿Qué es un explante en el contexto de cultivo in vitro?

    Un explante es una muestra vegetal como hojas, tallos, semillas, frutos, yemas o meristemos utilizada en el cultivo in vitro.

  • ¿Para qué se utiliza el protocolo de desinfección?

    El protocolo de desinfección se utiliza para preparar los explantes antes del cultivo in vitro, eliminando tierra y microorganismos.

  • ¿Qué papel juega el detergente comercial en el protocolo de desinfección?

    El detergente comercial ayuda a eliminar la tierra o sólidos presentes en el explante durante la desinfección.

  • ¿Qué concentración de etanol se utiliza en el protocolo de desinfección?

    Se utiliza una concentración de etanol al 70% durante 20 a 60 segundos.

  • ¿Cuál es el uso del hipoclorito de sodio en la desinfección de explantes?

    El hipoclorito de sodio, en concentraciones del 1 al 3%, se utiliza para desinfectar explantes eliminando microorganismos.

  • ¿Qué son los agentes tensoactivos mencionados en el video?

    Son compuestos químicos usados para mejorar la eficacia de desinfectantes, como el Twin 20 o Triton.

  • ¿Por qué es necesario realizar lavados con agua destilada después de usar productos químicos?

    Para eliminar los restos de productos químicos del explante, asegurando su pureza antes del cultivo.

  • ¿Qué precaución se debe tomar al usar soluciones con antibióticos y/o antimicóticos?

    Deben usarse solo en casos excepcionales ya que pueden alterar la composición de los medios de cultivo.

  • ¿Cuál es el último paso del proceso de desinfección de explantes?

    El último paso es asegurarse de que los explantes estén completamente desinfectados y listos para usarse en el cultivo in vitro.

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