P4. Kimia Analisis II (Jenis dan Analisis Kromatografi) 2024

00:24:03
https://www.youtube.com/watch?v=PjtNai8IJDM

Summary

TLDRThis lecture is about advanced chromatography techniques, detailing the types and analysis methods of chromatography. It focuses on gas and liquid chromatography and their respective stationary and mobile phases. Gas chromatography is used primarily for volatile substances that can be detected in the gas phase with either solid or liquid stationary phases. Liquid chromatography, on the other hand, is more widely applicable, particularly for non-volatile analytes, and it's divided further into adsorption, partition, ion-exchange, size-exclusion, and affinity chromatography based on different separation principles. The session also covers various chromatographic setups based on column types (packed bed, capillary, and planar) and phases (normal and reversed), and discusses the impacts of mobile phase composition, column type, pH, and temperature on chromatographic results. Additionally, it explains different approaches for qualitative and quantitative analysis, like using retention data, spiking with standards, and spectrophotometry for identification and measurement of analyte concentrations.

Takeaways

  • 🧪 Chromatography can be divided into gas and liquid types, each with specific uses.
  • 🌡️ Temperature and pH influence the effectiveness of chromatographic separations.
  • ⚗️ Different stationary phases are used depending on the type of chromatography.
  • 💧 Liquid chromatography is versatile for non-volatile analytes.
  • 🔌 Ion exchange chromatography separates based on molecular charge.
  • 📏 Size exclusion relies on molecule size differences for separation.
  • 🗂️ Various column types affect the separation efficiency and resolution.
  • 📊 Qualitative analysis can use retention data and spiking methods.
  • 📈 Quantitative chromatography requires precise calibration and standardization.
  • 🧫 Affinity chromatography is ideal for biomolecular separations.

Timeline

  • 00:00:00 - 00:05:00

    The speaker introduces the topic of continuation of chromatography basics focusing on the types and analysis. Chromatography is divided based on the mobile phase into two main types: gas chromatography and liquid chromatography, and the stationary phase material can be solid or liquid. Gas chromatography uses gas as a mobile phase, suitable for volatile analytes, and can be subdivided into gas solid and gas liquid chromatography. Liquid chromatography uses liquid as a mobile phase, applicable for non-volatile analytes, and can further be categorized by its stationary phase into adsorption, partition, ion-exchange, size-exclusion, and affinity chromatography.

  • 00:05:00 - 00:10:00

    Chromatography is classified based on supporting material which includes packed columns or capillary columns. Different stationary phases are used in chromatography such as cellulose paper for paper chromatography or silica gel for TLC. Normal phase utilizes polar stationary phase while reverse phase uses nonpolar stationary phase, guiding the choice of chromatographic method. Ion exchange chromatography separates molecules based on charge. Gel permeation or size-exclusion chromatography separates compounds based on molecular size, allowing larger molecules to elute first compared to smaller ones that enter pores in the stationary phase.

  • 00:10:00 - 00:15:00

    Chromatography efficiency is influenced by several factors like carrier phase, column type, pH, and temperature. Changing the mobile phase composition can improve separation effectiveness, illustrated by using different concentrations of acetonitrile resulting in variations in the chromatograms. Isocratic and gradient elution modes are explained, where the former maintains a constant mobile phase composition and the latter varies it. Additionally, the choice of column affects separation efficiency, evidenced by comparing chromatograms of different columns under various conditions. Slight pH changes can drastically impact separation quality.

  • 00:15:00 - 00:24:03

    The speaker explains that chromatography's qualitative analysis includes retention data comparison, spiking known compounds for identification, and mass spectrometry combination for unmatched analytes. Quantitatively, separation completion, availability of pure standards, and calibration procedures are crucial. Several quantification methods such as peak height, peak area, external standard, internal standard, and internal normalization are detailed. Peak height is straightforward but requires linearity with concentration while peak area covers the area under the curve. External and internal standards help compare and adjust for consistency, whereas internal normalization calculates the relative percentage component in complex mixtures without external references.

Show more

Mind Map

Mind Map

Faqs

  • What is gas chromatography used for?

    Gas chromatography is used for volatile analytes that can be detected in the gas phase.

  • What are the main types of chromatography mentioned?

    The main types are gas chromatography and liquid chromatography.

  • How is gas chromatography classified based on stationary phases?

    Gas chromatography is classified into gas-solid chromatography and gas-liquid chromatography.

  • What is liquid chromatography suited for?

    Liquid chromatography is suited for non-volatile analytes and can be applied more broadly.

  • What is the principle of ion exchange chromatography?

    Ion exchange chromatography separates molecules based on their charge using charged stationary phases.

  • How does temperature affect chromatographic separation?

    Higher temperatures generally speed up separation by increasing diffusion rates.

  • What is the effect of pH on chromatographic results?

    pH can affect the ionization of the analytes, impacting their interaction with the stationary phase and thus the separation.

  • How is chromatography useful for qualitative analysis?

    Chromatography uses retention data, spiking, and mass spectrometry to identify compounds qualitatively.

  • What is size exclusion chromatography based on?

    Size exclusion chromatography separates based on molecular size, with smaller molecules moving slower through the pores of the stationary phase.

  • What factors affect chromatography separation?

    Factors include the mobile phase, type of column, pH, and temperature, all affecting the efficiency and resolution of the separation.

View more video summaries

Get instant access to free YouTube video summaries powered by AI!
Subtitles
id
Auto Scroll:
  • 00:00:01
    asalamualaikum warahmatullahi
  • 00:00:02
    wabarakatuh Eh kepada adik-adik
  • 00:00:05
    mahasiswa Pada kesempatan kali ini saya
  • 00:00:08
    akan memberikan eh materi mengenai
  • 00:00:11
    kelanjutan dasar-dasar
  • 00:00:13
    kromatografi yaitu khususnya mengenai
  • 00:00:15
    jenis dan analisis kromatografi
  • 00:00:18
    eh materi ini merupakan materi pelengkap
  • 00:00:21
    dari pertemuan kita e terkait materi
  • 00:00:26
    kromatografi jadi ee berdasarkan jenis
  • 00:00:29
    Fa gerak digunakan maka kromatografi
  • 00:00:32
    dapat terbagi menjadi dua tipe utama
  • 00:00:35
    pertama adalah gas kromatografi atau
  • 00:00:37
    kromatografi gas pada metode ini ee
  • 00:00:40
    menggunakan Gas sebagai fase geraknya
  • 00:00:42
    untuk dapat membawa analit dalam
  • 00:00:44
    melewati fase diam umumnya gas
  • 00:00:47
    kromatografi ini digunakan untuk
  • 00:00:49
    analit-analit yang mudah muuap atau
  • 00:00:51
    dapat dideteksi pada fase gas kemudian
  • 00:00:54
    eh jenis yang kedua adalah Liquid
  • 00:00:57
    kromatografi atau kromatografi cair pada
  • 00:01:00
    metode ini menggunakan cairan sebagai
  • 00:01:02
    fase geraknya dan dapat diaplikasikan
  • 00:01:04
    lebih luas biasanya untuk analit-analit
  • 00:01:06
    yang tidak mudah menguap ini berdasarkan
  • 00:01:09
    jenis fase geraknya kemudian eh
  • 00:01:13
    kromatografi juga dapat dibagi lagi
  • 00:01:15
    berdasarkan tipe fase diamnya yaitu
  • 00:01:18
    material yang tidak bergerak dan
  • 00:01:20
    berinteraksi dengan analit secara
  • 00:01:21
    langsung fase diam ini bisa berupa
  • 00:01:24
    padatan atau cairan tergantung pada
  • 00:01:27
    kebutuhan analisis biasanya nya pada
  • 00:01:30
    jenis gas kromatografi ee fase geraknya
  • 00:01:33
    dapat berupa padatan ataupun cairan
  • 00:01:35
    sementara pada Liquid kromatografi fase
  • 00:01:39
    diamnya adalah berupa
  • 00:01:43
    padatan kemudian gas kromatografi ini
  • 00:01:46
    dapat terbagi menjadi dua jenis yaitu
  • 00:01:49
    gas Solid kromatografi dan gas Liquid
  • 00:01:53
    kromatografi pada gasolid kromatografi
  • 00:01:56
    menggunakan fased diam berupa padatan di
  • 00:01:59
    mana analit akan diadsorsi ke permukaan
  • 00:02:01
    padatan tersebut biasanya digunakan
  • 00:02:04
    untuk komponen-komponen yang lebih tidak
  • 00:02:06
    mudah kemudian yang jenis yang kedua
  • 00:02:09
    adalah gas Liquid kromatografi atau glc
  • 00:02:12
    di sini menggunakan lapisan cair eh yang
  • 00:02:16
    di e lapisan padat kemudian dilapisi
  • 00:02:18
    oleh permukaan yang cair di mana analit
  • 00:02:21
    larut dalam fase cair tersebut nah
  • 00:02:23
    metode ini cocok untuk Komponen yang
  • 00:02:25
    lebih mudah menguap adik-adik mungkin
  • 00:02:27
    bisa dilihat di slide ini adalah kurang
  • 00:02:30
    lebih
  • 00:02:32
    ee bagian-bagian dari gas kromatografi
  • 00:02:36
    di mana di sini awal mulanya adalah eh
  • 00:02:39
    gas itu dialirkan dari cararier gas
  • 00:02:42
    supply kemudian masuk ke injection port
  • 00:02:45
    kemudian baru mengalir di kolomnya
  • 00:02:48
    kolomnya kurang lebih bentuknya seperti
  • 00:02:49
    ini jadi nanti akan terjadi pemisahan
  • 00:02:52
    pada saat gas itu yang membawa yang
  • 00:02:55
    membawa sampel kita melewati kolom
  • 00:02:58
    kemudian dibaca oleh detektor dan
  • 00:03:00
    selanjutnya terakhir adalah dihasilkan
  • 00:03:02
    eh pikpik berupa kromatogram yang
  • 00:03:05
    merupakan hasil dari pemisahan
  • 00:03:10
    kromatografi Nah kalau tadi itu gas
  • 00:03:13
    kromatografi sementara yang sekarang
  • 00:03:14
    adalah Liquid kromatografi Liquid
  • 00:03:16
    kromatografi dapat kita bagi lagi
  • 00:03:19
    menjadi beberapa bagian pertama adalah
  • 00:03:22
    adsorption chromatografi Eh di mana di
  • 00:03:25
    sini menggunakan pasediam berupa padatan
  • 00:03:27
    di mana analit eh terabsorb
  • 00:03:30
    kep permukaan padatan tersebut Kemudian
  • 00:03:33
    yang kedua itu ada partisi formati
  • 00:03:36
    partisi di mana fase diam itu berupa
  • 00:03:40
    cairan di mana analit berpindah dari
  • 00:03:41
    fase gerak cair ke fase diam cair
  • 00:03:44
    umumnya berbasis prinsip partisi antara
  • 00:03:46
    dua F cair yang tidak saling
  • 00:03:49
    bercampur kemudian yang ketiga ada ion
  • 00:03:51
    exchange chromatographi di sini
  • 00:03:53
    menggunakan fase diam yang memiliki
  • 00:03:55
    muatan untuk memisahkan molekul
  • 00:03:57
    berdasarkan muatannya biasanya digunakan
  • 00:04:00
    untuk pemisahan ion dan molekul yang
  • 00:04:02
    bermuatan kemudian yang keempat ada size
  • 00:04:05
    exclusion size exclusion crromatografi
  • 00:04:08
    ini berdasarkan perbedaan Ukuran molekul
  • 00:04:11
    Jadi biasanya
  • 00:04:12
    eh fase diam pada kromatografinya itu
  • 00:04:16
    berupa pori-pori jadi memiliki pori
  • 00:04:19
    molekul yang lebih kecil ukurannya akan
  • 00:04:21
    memasuki pori-pori tersebut dan
  • 00:04:23
    bergeraknya lebih lambat sementara untuk
  • 00:04:25
    molekul yang ukurannya lebih besar maka
  • 00:04:27
    dapat melewati fase diamnya lebih cepat
  • 00:04:30
    kemudian yang kelima itu ada affinity
  • 00:04:32
    chromatografi ini berdasarkan kekuatan
  • 00:04:35
    ikatan jadi menggunakan pas diam yang
  • 00:04:38
    memiliki ligan yang berikatan secara
  • 00:04:40
    spesifik dengan molekul targetnya
  • 00:04:42
    biasanya ini cocok untuk eh kromatografi
  • 00:04:46
    yang digunakan untuk biomolekul Seperti
  • 00:04:48
    contohnya pada protein
  • 00:04:52
    Oke e selanjutnya
  • 00:04:55
    adalah kromatografi juga dapat
  • 00:04:57
    diklasifikasikan berdasarkan jenis
  • 00:05:00
    material penunjangnya atau support
  • 00:05:02
    materialnya digunakan ada pack bed atau
  • 00:05:06
    kolom kolom peratografi ini menggunakan
  • 00:05:08
    kolom yang berisi partikel fase diam
  • 00:05:11
    yang ukuran-ukurannya lebih kecil
  • 00:05:13
    umumnya digunakan pada kolom
  • 00:05:15
    kromatografi secara
  • 00:05:16
    tradisional kemudian tipe yang kedua itu
  • 00:05:19
    tipe kilaryi op Open tubular ini kolom
  • 00:05:24
    kapiler dengan fase diam yang dilapisi
  • 00:05:26
    pada permukaan dalam kapiler
  • 00:05:28
    eh ini biasanya digunakan pada gas
  • 00:05:31
    kromatografi kapilleriu ya kemudian
  • 00:05:34
    jenis yang ketiga ada open bed atau
  • 00:05:36
    planelanar kromatografi ini menggunakan
  • 00:05:39
    fase diamnya berupa planelar atau
  • 00:05:41
    lapisan tipis gitu ya seperti pada TLC
  • 00:05:44
    atau klt yang sudah kita pelajari
  • 00:05:49
    kemarin ini adalah beberapa jenis fase
  • 00:05:53
    diam eh tipe-tipe kromatografi seperti
  • 00:05:57
    kromatografi kertas biasanya menggunakan
  • 00:05:59
    Material fediamnya berupa ee filter
  • 00:06:03
    paper ada juga yang berupa selulosa
  • 00:06:05
    kemudian kalau TLC itu material fase
  • 00:06:08
    diamnya Biasanya berupa silik gel
  • 00:06:10
    alumina ataupun poliamida pada gas
  • 00:06:14
    kromatografi material fase diamnya
  • 00:06:16
    berupa sukvalen atau karbowx HPLC
  • 00:06:20
    Biasanya berupa eh kolom c8 atau c18
  • 00:06:24
    untuk fase
  • 00:06:27
    diamnya lalu ini adalah tipe atau
  • 00:06:31
    eh fase yang digunakan pada kromatografi
  • 00:06:35
    ada yang normal f atau reverse jadi ada
  • 00:06:39
    yang fase normal ataupun fase terbalik
  • 00:06:41
    Ada yang fase normal maka biasanya fase
  • 00:06:45
    diam yang digunakan itu sifatnya lebih
  • 00:06:47
    polar kemudian mobileennya atau fase
  • 00:06:50
    geraknya itu lebih nonpol atau hipo eh
  • 00:06:54
    hidrofobik nah sementara pada rever pada
  • 00:06:57
    yang fase terbalik untuk diamnya
  • 00:07:00
    Biasanya kita gunakan yang lebih non
  • 00:07:02
    pool sementara pada fase geraknya itu
  • 00:07:05
    kebalikannya yang lebih polar nah pada
  • 00:07:08
    materi klt kemarin kita ingat bahwa Fe
  • 00:07:11
    diam yang kita gunakan misalkan pada
  • 00:07:12
    silik gel itu sifatnya lebih polar nah
  • 00:07:16
    yang seperti itu itu dinamakan dengan
  • 00:07:18
    fase normal sementara biasanya kalau
  • 00:07:20
    misalkan kita menggunakan KCKT nih ya
  • 00:07:23
    HPLC itu banyak yang menggunakan fase
  • 00:07:26
    terbalik atau reverse Nah itu fase
  • 00:07:28
    diamnya itu berupa ee komponen nonpolar
  • 00:07:32
    sementara fase geraknya adalah yang
  • 00:07:33
    lebih polar ini adalah contoh dari fase
  • 00:07:38
    diam jenis-jenis fase diam berdasarkan
  • 00:07:40
    ee peningkatan kepolaritasan atau
  • 00:07:43
    penurunan tingkat kepolaran gitu ya Jadi
  • 00:07:47
    semakin ke bawah itu jenis kolom jenis
  • 00:07:51
    fas diamnya semakin polar jadi kalau
  • 00:07:53
    kita lihat c18 itu sifatnya lebih
  • 00:07:56
    nonpolar dibandingkan dengan c8 di
  • 00:07:59
    bandingkan dengan C4 ciano fenil dan
  • 00:08:02
    amino dan
  • 00:08:06
    kebalikannya eh G kemudian selanjutnya
  • 00:08:10
    jenis kromatografi ada tadi yang disebut
  • 00:08:13
    dengan eh ion exchange atau kromatografi
  • 00:08:16
    pertukaran ion di sini memanfaatkan
  • 00:08:19
    interaksi antara ion positif atau
  • 00:08:21
    negatif dari analit kita dengan matriks
  • 00:08:25
    yang bermuatan pada
  • 00:08:26
    pesed contoh penggunaannya adalah dalam
  • 00:08:29
    pemisahan anion dan kation dari larutan
  • 00:08:32
    jadi prinsip pemisahannya didasarkan
  • 00:08:34
    pada interaksi muatan positif dan
  • 00:08:35
    negatif antara molekul sampel kita
  • 00:08:39
    dengan eh dengan eh ion yang ada pada
  • 00:08:42
    kolom
  • 00:08:45
    kromatografi kemudian eh selanjutnya ada
  • 00:08:49
    kromatografi permeasi gel atau juga
  • 00:08:53
    kadang disebut dengan size exclusion
  • 00:08:55
    chromatography ini berbasis Ukuran
  • 00:08:58
    molekul jadi seperti tadi yang telah
  • 00:09:00
    disebutkan di awal jika molekul
  • 00:09:02
    ukurannya itu lebih kecil maka dia
  • 00:09:05
    cenderung lebih mudah untuk masuk ke
  • 00:09:07
    dalam pori-pori pada fase diam
  • 00:09:09
    dibandingkan yang ukurannya lebih besar
  • 00:09:12
    otomatis maka yang lebih cepat keluar
  • 00:09:14
    duluan itu adalah yang molekulnya lebih
  • 00:09:16
    besar di sini dilakukan bila campuran
  • 00:09:19
    melalui partikel berkori maka Partikel
  • 00:09:22
    analit kecil masuk ke dalam Kori
  • 00:09:24
    sementara partikel besar keluar melalui
  • 00:09:27
    kolom kolom dikemas dengan partikel
  • 00:09:29
    kecil biasanya seukuran 10 mikr berpori
  • 00:09:33
    yang diikat silang dari dekrin atau
  • 00:09:39
    poliakrilamida
  • 00:09:41
    eh dalam kromatografi jadi ada beberapa
  • 00:09:44
    hal yang mempengaruhi terjadinya
  • 00:09:46
    pemisahan atau beberapa efek yang
  • 00:09:48
    ditimbulkan dari hal-hal tersebut gitu
  • 00:09:51
    ya pertama adalah efek dari fase gerak
  • 00:09:55
    jadi perbedaan fase gerak itu dapat
  • 00:09:57
    mengakibatkan e edan hasil pemisahan
  • 00:10:01
    atau P pada kromatogram misalkan di sini
  • 00:10:04
    ini adalah contoh dari
  • 00:10:06
    eh fase gerak yang berbeda yaitu
  • 00:10:10
    Eh pada kromatogram yang pertama itu
  • 00:10:13
    menggunakan 60
  • 00:10:15
    asetonitril hasilnya ternyata seperti
  • 00:10:17
    itu jadi masih ada komponen yang belum
  • 00:10:21
    terpisahkan secara sempurna kemudian
  • 00:10:23
    piknya juga masih agak dempet gitu ya
  • 00:10:26
    kemudian kalau
  • 00:10:28
    eh konsentrasinya diturunkan menjadi 50%
  • 00:10:32
    asetonitril ee hasilnya lebih melebar
  • 00:10:36
    jadi piknya lebih melebar namun tetap
  • 00:10:39
    masih ada dua senyawa di sini yang tidak
  • 00:10:42
    terpisahkan masih belum sempurna
  • 00:10:44
    pemisahannya kemudian kita lihat di
  • 00:10:46
    kromatogram yang paling bawah kita ganti
  • 00:10:48
    fase geraknya komposisinya juga berubah
  • 00:10:50
    ternyata dapat hasil kromatogram yang
  • 00:10:53
    jauh lebih baik jadi ee jarak antarpik
  • 00:10:56
    itu relatif baik kemudian pemisahannya
  • 00:10:59
    juga ee sudah sempurna gitu ya Nah ini
  • 00:11:03
    adalah contoh dari perbedaan pase gerak
  • 00:11:06
    untuk menghasilkan eh kromatogram yang
  • 00:11:08
    lebih
  • 00:11:11
    baik kemudian ini adalah
  • 00:11:15
    eh perbandingan antara mode isokratik
  • 00:11:19
    isokratik mod ee dibandingkan dengan
  • 00:11:22
    gradien jadi kepada isocratic mode ini
  • 00:11:27
    komponen pada fase gerap tetap konstan
  • 00:11:29
    sepanjang waktu komposisi pada fase
  • 00:11:32
    gerak konstan sepanjang waktu jadi kalau
  • 00:11:34
    misalkan kita menggunakan campuran air
  • 00:11:36
    dengan metanol dengan komposisi 50 b50
  • 00:11:40
    maka
  • 00:11:42
    eh pada proses injeksinya maka itu saja
  • 00:11:45
    yang digunakan jadi tidak berubah
  • 00:11:47
    komposisinya pada ee proses kromatografi
  • 00:11:50
    nah mode ini biasanya digunakan untuk
  • 00:11:53
    sampel yang sederhana atau yang memiliki
  • 00:11:55
    Interaksi yang eh serupa gitu ya nah
  • 00:11:59
    sementara ada satu jenis mode lagi yaitu
  • 00:12:02
    gradien program pada mode ini eh
  • 00:12:06
    komposisi fas gerak itu berubah selama
  • 00:12:08
    analisis jadi contohnya untuk eh
  • 00:12:11
    peningkatan konsentrasi pelarut dalam
  • 00:12:13
    waktu tertentu jadi awal penyuntikan itu
  • 00:12:17
    bisa jadi 50 Bing 50 kemudian pada detik
  • 00:12:21
    atau menit kesekian maka dilakukan
  • 00:12:23
    peningkatan pada salah satu komponen
  • 00:12:26
    pesegeraknya misalkan ada air dan
  • 00:12:29
    metanol maka di titik atau Di menit ke
  • 00:12:31
    seekian ditingkatkan komposisi airnya
  • 00:12:34
    menjadi 60 dan dikurangi komposisi
  • 00:12:36
    metanolnya menjadi
  • 00:12:38
    40 jadi ada peningkatan konsentrasi atau
  • 00:12:41
    perubahan konsentrasi pelarut dalam
  • 00:12:43
    waktu tertentu ini membantu tujuannya ad
  • 00:12:46
    membantu pemisahan komponen dengan
  • 00:12:49
    interaksi yang lebih Lemah atau lebih
  • 00:12:51
    kuat dengan fase diam jadi kita bisa
  • 00:12:54
    menggunakan tipe yang isokratik dengan
  • 00:12:56
    komposisi yang sama dari mulai awal
  • 00:12:59
    penyuntikan sampai akhir proses
  • 00:13:01
    kromatografi atau kita bisa menggunakan
  • 00:13:04
    metode atau mode yang EE gradien ada
  • 00:13:07
    peningkatan komposisi salah satu dari
  • 00:13:10
    fase
  • 00:13:14
    geraknya kemudian ada faktor lagi yang
  • 00:13:17
    mempengaruhi dari hasil kromatografi
  • 00:13:20
    yaitu
  • 00:13:21
    eh efek dari jenis kolom yang kita pakai
  • 00:13:25
    jadi eh jenis kolom misalkan pada slide
  • 00:13:28
    ini di contokan dengan kolom zorbx xdb
  • 00:13:32
    ini memiliki pesediam khusus untuk
  • 00:13:34
    meningkatkan efisiensi pemisahan pada
  • 00:13:37
    yang eh kromatogram yang berwarna merah
  • 00:13:40
    ini menggunakan zorbx eclipse SDB
  • 00:13:44
    eh tipenya CN ya dengan fase geraknya
  • 00:13:48
    berupa perbandingan antara acetonitril
  • 00:13:51
    dengan air komposisinya 35 B 65 hasil
  • 00:13:54
    pemisahannya seperti yang kita lihat
  • 00:13:56
    yang ada kromatogram berwarna merah ini
  • 00:14:00
    nah kemudian yang bawah itu menggunakan
  • 00:14:02
    kolom zorbx eclipse SDB venil dengan
  • 00:14:06
    fase geraknya berupa asetonitril dengan
  • 00:14:09
    air juga tapi komposisinya berbeda
  • 00:14:12
    komposisinya 48 Bing 52 ternyata
  • 00:14:15
    hasilnya berbeda dibandingkan dengan
  • 00:14:18
    eh dengan kolom yang digunakan di atas
  • 00:14:22
    ini kita lihat eh struktur molekul dari
  • 00:14:25
    kolom zorbx xdb di sini
  • 00:14:32
    Nah selanjutnya selain efek dari fase
  • 00:14:35
    gerak kemudian efek dari jenis kolom
  • 00:14:37
    yang berbeda ada juga efek PH jadi PH
  • 00:14:41
    fase gerak ini mempengaruhi ionisasi
  • 00:14:43
    molekul analit kita sehingga dapat
  • 00:14:46
    mempengaruhi interaksinya dengan fase
  • 00:14:48
    Diang misalkan di sini perbedaan
  • 00:14:51
    0,1 saja pada pH fase gerak itu dapat
  • 00:14:56
    memberikan hasil pemisahan yang berbeda
  • 00:14:59
    kita lihat di sini eh pada fase gerak
  • 00:15:02
    dengan PH 5,1 hasil pemisahannya baik
  • 00:15:06
    jadi pikpiknya itu jelas terbentuk ya
  • 00:15:09
    kita lihat di PIK nomor 5 dan 6 itu
  • 00:15:12
    jelas terjadi pemisahan sementara kalau
  • 00:15:14
    terjadi kenaikan PH 0,1 saja menjadi 5,2
  • 00:15:19
    ternyata pada senyawa 5 dan 6 ini belum
  • 00:15:22
    terjadi pemisahan yang sempurna jadi
  • 00:15:25
    masih belum sampai ke bawah gitu Dia
  • 00:15:27
    sudah naik lagi sedikit G nah ini ee
  • 00:15:32
    contoh dari efek pH terhadap hasil
  • 00:15:35
    pemisahan makanya memang sebelum kita
  • 00:15:38
    melakukan pengujian ee harus dilakukan
  • 00:15:41
    validasi metode analisis terlebih dahulu
  • 00:15:44
    termasuk salah satunya adalah bagaimana
  • 00:15:46
    efek pH terhadap hasil
  • 00:15:48
    kromatografi Nah selanjutnya juga ada
  • 00:15:51
    efek temperatur atau suhu kolom jadi
  • 00:15:54
    peningkatan atau penurunan suhu pada
  • 00:15:56
    kolom mempengaruhi kecepatan difusi kita
  • 00:15:59
    dan juga resolusi pada puncak di mana
  • 00:16:02
    suhu yang lebih tinggi umumnya dapat
  • 00:16:04
    mempercepat pemisahan kita lihat di sini
  • 00:16:07
    ada perbandingan tiga suhu yang
  • 00:16:09
    digunakan yaitu pada Suhu 25 derajat
  • 00:16:13
    Celcius Ini hasilnya seperti ini ya Jadi
  • 00:16:16
    waktu yang dibutuhkan itu relatif lebih
  • 00:16:18
    lama dibandingkan dengan suhu 35 dan
  • 00:16:22
    lebih cepat lagi adalah yang pada suhu
  • 00:16:24
    45 derajat Celcius jadi memang secara
  • 00:16:27
    penelitian telah diketahui bahwa semakin
  • 00:16:30
    tinggi suhu maka ee dapat mempercepat
  • 00:16:33
    terjadinya
  • 00:16:36
    pemisahan Nah ini mungkin eh sedikit
  • 00:16:39
    mengulang adik-adik ya untuk penggunaan
  • 00:16:42
    kromatografi dalam analisis kualitatif
  • 00:16:45
    ada tiga pendekatan yang dapat digunakan
  • 00:16:47
    yaitu pertama dengan perbandingan data
  • 00:16:51
    retensi jadi data retensi analit itu
  • 00:16:54
    dapat dibandingkan dengan data standar
  • 00:16:56
    yang sudah ada pada kondisi yang sama
  • 00:16:58
    kita bisa mengetahui senyawa Apakah itu
  • 00:17:01
    molekul Apakah itu dengan membandingkan
  • 00:17:03
    data retensinya dengan data standar
  • 00:17:06
    kemudian pendekatan yang kedua adalah
  • 00:17:07
    spiking spiking ini dengan menambahkan
  • 00:17:10
    senyawa baku ke dalam sampel kita untuk
  • 00:17:13
    memastikan
  • 00:17:14
    identifikasinya kemudian yang ketiga
  • 00:17:16
    adalah kombinasi dengan spektrum
  • 00:17:18
    fotometri massa eh kombinasi dengan
  • 00:17:21
    spektrum fotometri massa ini berguna
  • 00:17:23
    untuk analit yang biasanya belum
  • 00:17:25
    memiliki standar yang murni
  • 00:17:29
    jadi bisa dengan pendekatan
  • 00:17:31
    membandingkan data retensinya ataukah
  • 00:17:34
    dengan mencampurkan pengujian sampel
  • 00:17:36
    kita dengan bahan baku atau standarnya
  • 00:17:39
    atau dengan mengombinasikannya dengan
  • 00:17:40
    spekum
  • 00:17:42
    fometri untuk tujuan
  • 00:17:45
    analisistif Kemudian untuk tujuan
  • 00:17:47
    analisis kuantitatif atau untuk
  • 00:17:49
    mengetahui konsentrasi atau kadar suatu
  • 00:17:52
    molekul atau senyawa dalam
  • 00:17:54
    sampel maka syarat yang harus dipenuhi
  • 00:17:57
    ada yang pertama adalah solut itu harus
  • 00:18:00
    telah diketahui dan terpisah sempurna
  • 00:18:02
    dari komponen lain kemudian baku dengan
  • 00:18:05
    kemurnian yang tinggi dan telah
  • 00:18:07
    diketahui harus tersedia juga dan yang
  • 00:18:09
    ketiga prosedur kalibrasi yang sudah
  • 00:18:11
    diketahui harus digunakan jadi dalam eh
  • 00:18:16
    metode analisis apapun jika itu untuk
  • 00:18:18
    ketentuan atau eh kebutuhan kuantitatif
  • 00:18:22
    maka harus dilakukan kalibrasi atau
  • 00:18:25
    validasi metode analisis terlebih dahulu
  • 00:18:27
    nah metode
  • 00:18:29
    ada berbagai macam ada l di sini saya
  • 00:18:32
    Tuliskan pertama adalah metode tinggi
  • 00:18:35
    Puncak kedua Adah meteas punc ketigaah
  • 00:18:39
    metode baku eksternal ke mete baku
  • 00:18:42
    internal dan K normalisasi internal kita
  • 00:18:46
    akan lihat satu peratu metode kutifikasi
  • 00:18:50
    pertamaal metode tinggi
  • 00:18:53
    puncaktingak ini Inya
  • 00:18:59
    ke Puncak
  • 00:19:00
    maksimum cocok bis ee biasanya digunakan
  • 00:19:03
    pada
  • 00:19:04
    ee Jika perubahan tinggi Puncak itu
  • 00:19:08
    linear dengan konsentrasi analit Jadi
  • 00:19:10
    kalau semakin tinggi konsentrasinya maka
  • 00:19:13
    mungkin puncaknya akan semakin tinggi
  • 00:19:16
    begitu ya Nah metode tinggi Puncak ini
  • 00:19:19
    sebenarnya adalah metode yang paling
  • 00:19:20
    sederhana untuk pengukuran kuantitatif
  • 00:19:23
    ee dengan tinggi Puncak tinggi Puncak
  • 00:19:26
    diukur sebagai jarak dari garis dasar ke
  • 00:19:29
    Puncak maksimum seperti Puncak 1 2 dan 3
  • 00:19:33
    kemudian penyimpangan garis dasar
  • 00:19:35
    diimbangi dengan interpolasi garis dasar
  • 00:19:38
    antara awal dan akhir Puncak kurva baku
  • 00:19:40
    dibuat dengan memplotkan konsentrasi
  • 00:19:42
    analit dengan tinggi Puncak eh metode
  • 00:19:46
    tinggi Puncak ini hanya dapat digunakan
  • 00:19:48
    jika tinggi Puncak itu linear dengan
  • 00:19:50
    konsentrasi
  • 00:19:51
    analit ini untuk metode kuantifikasi
  • 00:19:54
    yang pertama
  • 00:19:59
    selanjutnya metode kuantifikasi yang
  • 00:20:01
    kedua adalah metode luas puncak pada
  • 00:20:04
    metode luas Puncak ini
  • 00:20:07
    e kita gunakan dengan cara mengukur luas
  • 00:20:10
    area di bawah Puncak Jadi au Ya kita
  • 00:20:13
    harus tahu area area di bawah
  • 00:20:17
    puncakromatr yang dihasilkan o anal
  • 00:20:20
    Puncak ini sebanding dengan jumlah atau
  • 00:20:22
    konsentri
  • 00:20:24
    analampama
  • 00:20:27
    dengangak itu sebanding dengan
  • 00:20:30
    konsentrasi analit dalam sampel kemudian
  • 00:20:33
    kurva baku dibuat dengan memplotkan
  • 00:20:34
    konsentrasi analit terhadap luas Puncak
  • 00:20:37
    dan hanya digunakan bila luas Puncak
  • 00:20:39
    berhubungan linear dengan
  • 00:20:42
    konsentrasi jadi perbedaannya kalau yang
  • 00:20:44
    tadi kita mengukur tingginya sementara
  • 00:20:46
    yang kedua ini kita mengukur
  • 00:20:50
    luasnya selanjutnya eh metode
  • 00:20:53
    kuantifikasi yang ketiga adalah metode
  • 00:20:55
    baku eksternal pada metode yang ketiga
  • 00:20:58
    ini eh standar eksternal dengan
  • 00:21:01
    konsentrasi yang telah diketahui
  • 00:21:02
    digunakan untuk membuat kurva kalibrasi
  • 00:21:05
    Jadi kita pakai standar luar gitu ya
  • 00:21:07
    dengan konsentrasi yang sudah diketahui
  • 00:21:09
    sampel diuji secara terpisah dari
  • 00:21:12
    standar eksternal jadi beda dengan yang
  • 00:21:15
    spiking tadi ya kalau spiking itu kan
  • 00:21:17
    standarnya kita campur dengan sampel
  • 00:21:19
    kalau untuk metode baku eksternal ini
  • 00:21:22
    sampelnya diuji secara terpisah dari
  • 00:21:24
    standar eksternal kemudian konsentrasi
  • 00:21:26
    analit dalam sampel dihitung dengan
  • 00:21:29
    membandingkan respon kromatografi sampel
  • 00:21:31
    dengan kurva kalibrasi dari standar
  • 00:21:34
    eksternal metode ini syaratnya adalah
  • 00:21:36
    kondisi analit harus sangat konsisten
  • 00:21:38
    agar hasilnya
  • 00:21:41
    akurat J tadi yang pertama adalah metode
  • 00:21:44
    tinggi Puncak yang kedua adalah metode
  • 00:21:46
    luas Puncak ketiga adalah metode baku
  • 00:21:50
    eksternal selanjutnya metode baku
  • 00:21:52
    internal sebagai metode kuantifikasi
  • 00:21:54
    yang keempat ini seperti cara yang
  • 00:21:57
    spiking tadi yaitu menambahkan standar
  • 00:21:59
    internal ke dalam sampel ini tujuannya
  • 00:22:02
    untuk mengurangi efek variasi jadi pada
  • 00:22:05
    metode baku internal ini senyawa dengan
  • 00:22:07
    sifat kimia mirip dengan analit
  • 00:22:10
    ditambahkan ke dalam sampel sebagai
  • 00:22:12
    standar internalnya jadi rasio antara
  • 00:22:15
    respon analit dan standar internal
  • 00:22:17
    digunakan untuk menghitung konsentrasi
  • 00:22:19
    analit metode ini dapat membantu
  • 00:22:21
    mengatasi variasi analisis yang mungkin
  • 00:22:23
    terjadi karena perubahan kondisi
  • 00:22:25
    operasional
  • 00:22:29
    nah terakhir adalah normalisasi internal
  • 00:22:34
    untuk metode kuantifikasi yang kelim ini
  • 00:22:37
    eh kita melibatkan perhitungan
  • 00:22:40
    persentase setiap komponen dalam
  • 00:22:42
    campuran tanpa menggunakan standar
  • 00:22:44
    eksternal atau internal jadi kita tidak
  • 00:22:46
    menggunakan baku standar baik internal
  • 00:22:48
    maupun eksternal pada metode yang kelima
  • 00:22:53
    ini perhitungan persentase komponen
  • 00:22:56
    dalam campurannya nanti itu berdasarkan
  • 00:22:59
    luas Puncak relatif jadi ee dihitung
  • 00:23:02
    luas puncaknya setiap Puncak dianggap
  • 00:23:05
    mewakili bagian dari total campuran dan
  • 00:23:08
    perhitungannya didasarkan pada
  • 00:23:09
    persentase relatif dari luas Puncak
  • 00:23:12
    terhadap Total luas Puncak secara
  • 00:23:14
    komponen metode ini Paling berguna untuk
  • 00:23:17
    analisis kuantitatif dalam campuran yang
  • 00:23:19
    kompleks seh yang tidak membutuhkan
  • 00:23:22
    tidak perlu adanya referensi eksternal
  • 00:23:28
    oke eh sampai di sini adik-adik materi
  • 00:23:32
    dari eh kelanjutan perkuliahan kimia
  • 00:23:37
    analisis Du kita mengenai kromatografi
  • 00:23:40
    jadi memang E hanya sebentar atau hanya
  • 00:23:42
    sedikit ya karena melengkapi materi yang
  • 00:23:44
    sudah pernah diberikan sebelumnya
  • 00:23:46
    khususnya pada kesempatan kali ini
  • 00:23:48
    adalah tentang jenis dan macam-macam
  • 00:23:51
    dari
  • 00:23:53
    kromatografiitu baik
  • 00:23:55
    eh Semoga dapat dipahami ee kurang
  • 00:23:59
    lebihnya saya mohon maaf wasalamualaikum
  • 00:24:01
    warahmatullahi wabarakatuh
Tags
  • Chromatography
  • Gas Chromatography
  • Liquid Chromatography
  • Stationary Phase
  • Mobile Phase
  • Separation Methods
  • Ion Exchange
  • Size Exclusion
  • Quantitative Analysis
  • Qualitative Analysis